本发明提供了复性后具有舍雷肽酶活性的多肽包涵体,编码该多肽包涵体的基因序列如SEQ ID NO:3所示,或者基因序列为SEQ ID NO:3所示的序列经消除、添加、取代一个或多个碱基后能够编码复性后具有舍雷肽酶活性的多肽包涵体的基因序列制备方法为采用来源于沙雷氏菌的舍雷肽酶基因,构建重组质粒并将其转化至宿主细胞中进行表达,然后筛选出高效表达转化子,经乳糖、异丙基硫代半乳糖苷或其他乳糖类似物诱导产生多肽包涵体。本发明通过基因工程技术将目的基因克隆至载体中构建表达载体,并将表达载体导入宿主细胞中,经过培养和诱导表达,重组菌株能够表达出复性后具有高舍雷肽酶活性的多肽包涵体。
本发明公开了一种转肽活力提高的γ‑谷氨酰转肽酶突变体及其构建方法,属于基因工程领域。本发明的突变体是在SEQ ID N0.3所示的氨基酸的基础上,将第463位氨基酸由苏氨酸突变成天冬氨酸。本发明得到的突变体在枯草芽孢杆菌中表达,γ‑谷氨酰转肽酶突变体酶的转肽反应活力较突变前提高22.6%,水解反应活力降低了90%。本发明表明463位氨基酸残基对γ‑谷氨酰转肽酶的转肽反应活力有较大影响,对该酶的催化机理的研究提供了一定的基础,并提高了该酶的工业应用潜力。本发明所得的γ‑谷氨酰转肽酶突变体可用于制备L‑茶氨酸。