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[发明专利]一种简便的植物BY-2细胞冷冻保存方法-CN201310243031.5有效
发明人：贺彬 -专利权人：贺彬
申请日： 2013-06-08 - 公布日： 2013-09-11 - 主分类号： A01N1/02 文献下载
摘要：一种简便的植物BY-2细胞冷冻保存方法，将BY-2细胞在8％蔗糖液体培养基中预培养，然后在冷冻保护剂(山梨醇、二甲基亚砜)的存在下，采用降温冷冻步骤，经过4℃，-20℃，-40℃分阶段降温处理，最后于-80℃保存备用。细胞复苏时采用快速融化法融化冷冻细胞液，离心去上清液后换入新鲜培养基进行培养即可使用。该方法简单易行，减少了液氮冷冻保存的损耗。冷冻保存后的细胞有较高的存活率，能够解决实验室在细胞的培养和使用中存在的人力、物力的消耗和细胞质量降低等问题，可以作为生物实验室的通用技术。
一种简便植物 by 细胞冷冻保存方法

[发明专利]用于细胞的冷冻保存的组合物和方法-CN202080047728.3在审
发明人： A·休布尔;李睿 -专利权人：明尼苏达大学董事会
申请日： 2020-04-24 - 公布日： 2022-02-01 - 主分类号： A01N1/02 文献下载
摘要：冷冻保存组合包括在组合物中总浓度为300mM或更低的糖类组分；在组合物中总浓度为2M或更低的糖醇组分；和至少一种聚合物组分和白蛋白，条件是该组合物包括少于冷冻保存含量的二甲基亚砜(DMSO)。一种冷冻保存细胞的方法包括向冷冻保存组合物添加细胞；冷冻该组合物；储存冷冻的组合物；解冻该组合物；将细胞从解冻的组合物中移除；和在有效维持细胞活性的条件下培养细胞。冷冻可包括以0.1℃/min至5℃/min的速率进行冷却。该方法可在解冻后无需洗涤步骤下进行。
用于细胞冷冻保存组合方法

[发明专利]汇集肝细胞的方法-CN201680082606.1有效
发明人： R·凯撒;M·谢尔曼 -专利权人：隆萨沃克斯维尔股份有限公司
申请日： 2016-02-26 - 公布日： 2023-07-07 - 主分类号： C12N5/071 文献下载
摘要：本发明涉及制备冷冻保存的细胞(例如，肝细胞)的汇集或混合群体的新颖方法。具体地，本发明需要对由单个个体供给的细胞(例如肝细胞)进行快速解冻，混合所述细胞以产生异质群体然后冷冻保存。本发明还涉及多冷冻保存细胞的制备以在临近使用前增加活力。该过程需要减少暴露于化学和物理应力，以增加最终的活细胞数量。
汇集肝细胞方法

[发明专利]用于细胞冷冻保存的组合物和方法-CN201780061611.9在审
发明人：施冰如;江昆琦;林政毅;黃廷宇 -专利权人：全崴生技股份有限公司
申请日： 2017-10-04 - 公布日： 2019-06-04 - 主分类号： A01N1/02 文献下载
摘要：本发明提供了一种用于细胞冷冻保存的组合物，其包含渗透性冷冻保护剂、糖类和大分子。冷冻保存组合物对细胞和组织具有低毒性，并且在冷冻保存期间促进生物材料的存活和活性保留。
细胞冷冻保存冷冻保存渗透性冷冻保护剂糖类活性保留生物材料低毒性存活细胞

[发明专利]一种三维微载体原位冷冻保存细胞的方法-CN201910097650.5有效
发明人：鄢晓君;刘伟 -专利权人：北京华龛生物科技有限公司
申请日： 2019-01-31 - 公布日： 2021-03-19 - 主分类号： A01N1/02 文献下载
摘要：本发明公开了一种三维微载体原位冷冻保存细胞的方法。它包括如下步骤：1)将细胞的三维微载体悬液进行离心，弃上清，得到含有细胞的载体；2)将含有细胞的载体，与冻存液混合，然后加入冻存管中；3)将步骤2)中加有含有细胞的载体的冻存管进行降温，然后转移至液氮中；即可实现三维微载体原位冷冻保存细胞。本发明能实现细胞培养在三维微载体上原位冷冻保存，无需将细胞与微载体分离再冷冻保存，实现了细胞冻存不再打断三维培养的过程，方便用户对培养后的三维细胞产品的储存、运输和复苏培养，也便于对细胞的长期保存。
一种三维载体原位冷冻保存细胞方法

[发明专利]冷冻保存来源于多能干细胞的组织的方法-CN201280058085.8在审
发明人：安藤觉;中野德重;笹井芳树;永乐元次 -专利权人：住友化学株式会社;独立行政法人理化学研究所
申请日： 2012-11-22 - 公布日： 2014-07-30 - 主分类号： C12N5/074 文献下载
摘要：本发明提供冷冻保存来源于多能干细胞的组织的方法，所述方法包括以下(1)至(3)：(1)使来源于多能干细胞的组织与含有亚砜和链状多元醇的细胞保护溶液接触，(2)将在所述第一步中与所述细胞保护溶液接触的所述来源于多能干细胞的组织保持在冷冻保存溶液中，以及，(3)在冷却剂存在下，冷冻保存在所述第二步中被保持在所述冷冻保存溶液中的所述来源于多能干细胞的组织。根据本发明的方法，可以提供稳定的来源于多能干细胞的组织的保存方法。
冷冻保存来源于多能干细胞组织方法

[发明专利]一种多肽及含有该多肽的冷冻保存液-CN202210043367.6在审
发明人：李娜 -专利权人：君创永晟(东莞)生物科技有限公司
申请日： 2022-01-14 - 公布日： 2022-05-27 - 主分类号： C07K14/47 文献下载
摘要：本发明公开了一种多肽和含有该多肽的冷冻保存液，其中，所述多肽是LEA蛋白的功能区，在水溶液中具有良好的生物相容性好，是理想的控冰材料。含有上述多肽的冷冻保存液用于冷冻保存各类细胞具有较高的存活率，仅能达到常规冷冻液冷冻各类细胞的有效性，且与目前普遍使用的含有10％的DMSO的商品化冷冻保存液的冷冻保存复苏率相当。
一种多肽含有冷冻保存

[发明专利]一种氨基酸类冻存液在卵母细胞或胚胎冷冻保存中的应用-CN201910281979.7有效
发明人：乔杰;严杰;李蓉;闫丽盈;王健君;金晟琳 -专利权人：北京大学第三医院;中国科学院化学研究所
申请日： 2019-04-09 - 公布日： 2022-09-06 - 主分类号： A01N1/02 文献下载
摘要：本发明公开了一种氨基酸类冷冻保存液在卵母细胞或胚胎冷冻保存中的应用，每100mL冷冻保存液中含有：氨基酸类冷冻保存仿生控冰材料0.1‑50g，多元醇5.0‑45mL，DMSO 0‑15mL，血清0‑30mL本发明的冷冻保存液以氨基酸类仿生控冰材料为主要成分，DMSO含量低，毒性小，用于卵母细胞或胚胎冻存能达与商业化冷冻保存液(含有DMSO15％)同等甚至更高的细胞存活率。本发明的冷冻保存液组成简单，且原料来源方便，成本低廉。
一种氨基酸类冻存液细胞胚胎冷冻保存中的应用

[发明专利]一种基于声致微流的冷冻防护剂导入去除微系统和方法、及细胞的低温保存方法-CN201910012175.7有效
发明人：乌玛·儒可;许红升;董树荣;轩伟鹏;陈金凯;骆季奎 -专利权人：浙江大学
申请日： 2019-01-07 - 公布日： 2020-08-11 - 主分类号： A01N1/02 文献下载
摘要：本发明公开了一种基于声致微流的冷冻防护剂导入去除微系统，包括声表面波器件，对声表面波器件的部分表面进行疏水处理，形成疏水表面区域，在该疏水表面区域完成将冷冻防护剂导入细胞和/或将冷冻防护剂从细胞中去除。还公开了一种基于声致微流的冷冻防护剂导入去除方法，和一种细胞的低温保存方法。该冷冻防护剂导入去除系统和方法利用声致微流效应完成冷冻防护剂与胞内水的置换，以实现将CPA导入到细胞内或从细胞中去除，降低了传统手动操作方式对细胞造成的渗透压冲击和机械损伤。该低温保存方法能够更好地保存细胞的形态和完整性，提高细胞的存活率，适合微量细胞的低温保存。
一种基于声致微流冷冻防护导入去除系统方法细胞低温保存

[发明专利]细胞保存液及其调制方法、细胞保存方法、细胞培养方法-CN200510112642.1无效
发明人：田口淳史;佐藤威;矢部则次 -专利权人：尼普洛株式会社
申请日： 2005-10-11 - 公布日： 2006-05-17 - 主分类号： C12N5/00 文献下载
摘要：提供一种细胞保存液，使细胞不仅能够冷冻保存，还能够冷藏保存，并且提高了细胞保存性能，还提供使用该保存液的简便细胞保存方法。该细胞保存液特征在于至少含有糖类、钠离子和钾离子，且所含钠离子的摩尔浓度与钾离子的摩尔浓度相等或者比钾离子的摩尔浓度更大。这样细胞不仅能够冷冻保存，还能够冷藏保存，从而能够提供一种简便的细胞保存方法。并且，采用本发明的细胞保存液，可以不需经过洗涤等工序而将细胞悬浮于该保存液中直接接种于培养基中进行细胞培养，因此很简便。
细胞保存及其调制方法细胞培养

[发明专利]一种干细胞冷冻保存系统及干细胞冷冻保存方法-CN202210940416.6在审
发明人：王海平;孙飞达;胡众学 -专利权人：王海平
申请日： 2022-08-06 - 公布日： 2022-11-04 - 主分类号： A01N1/02 文献下载
摘要：本发明涉及一种干细胞冷冻保存系统及干细胞冷冻保存方法，包括：罐体，所述罐体内设置有滑板，所述罐体的开口处设置有上盖，且所述罐体的开口内壁设置有绳槽；冷冻组，设置于所述罐体内，所述冷冻组用于放置带干细胞的冷冻保存箱；控制机构，设置于所述罐体内，所述控制机构用于带动冷冻保存箱的取出或存入。本发明通过在轨道板上设置相互配合的链条和链轮，并在链条上设置放置架，在链轮转动时，可带动放置架进行循环移动，且使得放置架始终保持水平且开口向上，进而保证冷冻保存箱能在一个冷冻组中有序放置。
一种干细胞冷冻保存系统方法

[发明专利]细胞、人工细胞构建体或三维复合组织装配体的冷冻保存方法-CN201080008180.8有效
发明人：蒂莫·施米特;洛塔尔·贾斯特;弗朗茨·马泽尔;霍尔格·贝克 -专利权人：纳托林两合公司
申请日： 2010-02-18 - 公布日： 2012-01-11 - 主分类号： C12N5/077 文献下载
摘要：本发明属于细胞和组织培养物的冷冻保存领域，更特别地，本发明涉及细胞、细胞构建体或三维复合组织装配体的冷冻保存和长期保存的方法。该方法基于使用具有特定组成以及高度特定的厚度和适当机械特性的胶原细胞载体，其在解冻后保持这些特性。此类胶原细胞载体(CCC)的使用为冷冻保存提供了一种非常适合的支持物，使其在解冻后具有非常高的存活率并提供已粘附在机械稳定且生物相容性支持物上的细胞和组织装配体。本发明还涉及冷冻胶原载体-细胞装配体，以及可通过本发明方法得到的冷冻人工细胞构建体或三维复合组织装配体，及其解冻后的用途。
细胞人工构建三维复合组织装配冷冻保存方法

[发明专利]一种新疆雪莲细胞系的超低温冷冻保存方法-CN201010224867.7无效
发明人：刘汉石 -专利权人：大连普瑞康生物技术有限公司;金银兵
申请日： 2010-07-13 - 公布日： 2010-11-17 - 主分类号： A01N1/02 文献下载
摘要：本发明为一种中药材新疆雪莲细胞系的超低温冷冻保存技术。在保存中首先选择合适的细胞系，然后分别用0.2M山梨醇溶液和0.4M山梨醇溶液进行保存前的预处理，最后再用冷冻保护剂对细胞系进行包埋，包埋完成后即可直接投入到液氮中进行超低温冷冻保存，冷冻好的细胞在1.2M
一种新疆雪莲细胞系超低温冷冻保存方法

[发明专利]一种贴壁培养的细胞的冷冻保存方法-CN201210152637.3无效
发明人：谭秀文;赵红波;宋恩亮;刘桂芬;成海建;刘晓牧;万发春 -专利权人：山东省农业科学院畜牧兽医研究所
申请日： 2012-05-17 - 公布日： 2012-10-03 - 主分类号： A01N1/02 文献下载
摘要：本发明公开了一种贴壁培养的细胞的冷冻保存方法。该方法直接在细胞培养瓶内加入冷冻液，然后将培养瓶逐步降温，最后放入超低温冰箱中保存，可保存2-3个月，待培养条件许可时解冻细胞，继续培养。本发明冷冻与解冻步骤简单、快速，省却传统冷冻方法中的细胞消化、离心等步骤，大大降低了细胞污染以及对细胞活性的损伤；冷冻时不受细胞贴壁程度的影响（20-30%即可），打破了传统冷冻对细胞数量的限制，非常适用于应对实验室中突发情况可能对细胞培养造成的毁灭性损失；不需要购买细胞冻存管，直接利用原培养瓶冷冻，解冻后细胞也不需接种到新的培养瓶，而是在原培养瓶内加入培养液继续培养，大大节省了试验费用。
一种培养细胞冷冻保存方法

[发明专利]一种杜仲悬浮细胞超低温保存方法-CN201910866610.2在审
发明人：徐宁 -专利权人：徐宁
申请日： 2019-09-12 - 公布日： 2019-11-22 - 主分类号： A01N3/00 文献下载
摘要：本发明涉及一种杜仲悬浮细胞超低温保存方法，该方法包括以下步骤：（1）建立细胞悬浮培养系；（2）预培养：将悬浮细胞接种到预培养基中4~6℃培养5d；（3）预处理：将悬浮细胞先后用预冷的玻璃化液、冷冻保护剂处理；（4）冷冻保存：悬浮细胞加入预冷的冷冻保护剂直接投入液氮保存；（5）化冻和洗涤：40℃水浴化冻，再重复洗涤3~5次；（6）恢复培养。本方法针对杜仲悬浮细胞特性，摸索出了合适的预培养基和冷冻保护剂，并对整个技术流程进行优化，应用本发明的方法保存的杜仲悬浮细胞，其成活率可达88%以上，并且所需设备简单，处理步骤方便，重复性好，细胞保存长期安全稳定
悬浮细胞冷冻保护剂杜仲预培养基预冷洗涤细胞悬浮培养系预处理超低温保存安全稳定玻璃化液恢复培养技术流程冷冻保存细胞保存液氮保存预培养水浴成活率接种保存重复应用优化