本发明公开了一种猫ω干扰素、其编码基因及其表达和应用,本发明根据已公布的猫源fIFNω2蛋白的氨基酸序列,经过序列设计,筛选出如SEQ ID NO.1所示的重组蛋白,经过鉴定本申请所提出的SUMO融合标签表达纯化的fIFNω2重组蛋白具有优秀的特异性和较高的体外抗病毒活性,同时其在大肠杆菌中的表达量较高。提出的编码基因能够实现在大肠杆菌中高效表达,并提高重组蛋白的制备效率。利用上述制备表达方法可获得纯度较高、活性较好的重组蛋白,制备方法具有工艺简单、成本低廉、蛋白纯度高、易于放大生产的特点,利于工业生产和大规模的推广应用。
本发明提供了一种草鱼干扰素、草鱼干扰素突变体及其应用和产品,涉及生物技术领域。本发明提供的草鱼干扰素,其氨基酸序列如SEQ ID NO.1所示。经发明人研究发现,本发明提供的草鱼干扰素安全高效,对于草鱼出血病病毒(GCHV)和草鱼小RNA病毒(GCPV)具有较强的抗病毒活性,能够用于抗水产动物病毒产品的制备中。本发明提供的草鱼干扰素突变体安全高效,相较于草鱼干扰素,对于草鱼出血病病毒和草鱼小RNA病毒具有更强的抗病毒活性,能够用于抗水产动物病毒产品的制备中。
本发明属于干扰素基因工程的技术领域,具体涉及一种猫ω干扰素突变体及其制备方法和应用。所述突变体包括成熟肽猫ω干扰素突变体;所述成熟肽猫ω干扰素突变体为将成熟肽猫ω干扰素进行定点突变得到,其氨基酸序列如序列表SEQ ID NO.1~SEQ ID NO.6所示;对猫ω干扰素进行氨基酸位点的突变形成具有糖基化位点的突变体,对毕赤酵母密码子优化修饰后的猫ω干扰素及猫ω干扰素突变体进行表达,适度的糖基化修饰提高了猫干扰素突变体的生物活性及延长了半衰期,解决现有表达系统及相关生物技术制备的猫干扰素含量低、生物学活性低、半衰期短、稳定性差、二硫键难以形成、生产工艺复杂、纯化制备成本高等问题。
本发明公开了一种水貂IFN‑ε成熟肽的制备方法。本发明还公开了一种优化后的水貂IFN‑ε成熟肽的编码核苷酸序列,其核苷酸序列如SEQ ID NO.1所示。本发明通过构建含有优化后的编码水貂IFN‑ε成熟肽基因的重组表达载体,并在大肠杆菌中成功表达。对其抗病毒活性进行分析,结果显示,得到的重组水貂IFN‑ε成熟肽具有明显的抗病毒活性。本发明的提出研制开发具有抗病毒活性的基因工程干扰素制剂,提供了一种有效的技术手段。
本发明公开了一种猫干扰素ω、其编码基因及其在抗病毒方面的应用。所述的猫干扰素ω的氨基酸序列如SEQ ID NO.2所示。优选的编码所述的猫干扰素ω的核苷酸序列如SEQ ID NO.1所示。此外,本发明还公开了一种制备所述的猫干扰素ω的方法及其在制备抗病毒药物中的应用。本发明采用病毒刺激(猫肠道冠状病毒)结合干扰素诱生剂刺激(聚肌胞poly I:C)方法对宠物猫体进行刺激,进而诱导猫干扰素基因表达。然后通过PCR扩增得到了一条猫干扰素ω基因,细胞试验显示本发明获得的一种猫干扰素ω具有明显的抗病毒活性,并优于现有已知猫干扰素。本发明的提出为猫干扰素制品的进一步研发和应用奠定了基础。