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- [发明专利]一种藻类叶绿体DNA的提取方法-CN201110085374.4无效
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付万冬;段德麟;郑斌;姚建亭;钟明杰;杨会成;王秀良
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浙江省海洋开发研究院
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2011-03-30
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2012-10-17
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C12N15/10
- 本发明涉及一种藻类叶绿体DNA的提取方法,新鲜或冷冻藻体为原料,用组织匀浆机匀浆,加入缓冲液A以3,000-6,000×g离心力离心处理,取沉淀物,加入缓冲液B,在60-70℃下水浴裂解1-2h,裂解液去除变性蛋白质,加入CsCl和Hoechst 33258,以360,000-400,000×g离心力离心8-12h,取出含叶绿体DNA条带去除Hoechst 33258,加入2.5~3.5M醋酸钠、双蒸水和异丙醇,在-20℃下放置20~40min,离心力12,000-16,000×g离心15-30min,得到的沉淀纯化后,即得到藻类叶绿体DNA。与现有技术相比,本发明简化了提取步骤,操作简单易行,提高了藻类叶绿体DNA的提取率和纯度,提取的藻类叶绿体DNA得率在150-200μg/g(新鲜藻体),且完全能够满足基因组测序、特异性酶切、RAPD、
- 一种藻类叶绿体dna提取方法
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