本发明公开了一种桑树类胡萝卜素裂解双加氧酶基因及其原核表达,该基因为首次分离得到桑树类胡萝卜素裂解双加氧酶基因,对研究类胡萝卜素裂解双加氧酶基因的功能以及裂解产物奠定基础。本发明所提供的桑树类胡萝卜素裂解双加氧酶基因如SEQ IDNO.1或SEQ ID NO.2或SEQ ID NO.3或SEQ ID NO.4或SEQ ID NO.5或SEQ ID NO.6所示的核苷酸序列或者添加、取代、插入或缺失一个或多个核苷酸的同源序列或其等位基因及其衍生的核苷酸序列。本发明提供的桑树类胡萝卜素裂解双加氧酶基因的原核表达为首次通过原核表达的方式成功得到桑树类胡萝卜素裂解双加氧酶蛋白的方法。
本发明属于应用环境微生物和农业领域,公开了一个龙胆酸双加氧酶及其编码基因和应用。一种龙胆酸双加氧酶基因dsmD,其核苷酸序列为SEQ ID NO.1,全长1053bp,编码350个氨基酸,其氨基酸序列为SEQ ID NO.2。龙胆酸双加氧酶基因是首个公开能降解麦草畏中间代谢产物3‑氯龙胆酸的基因,它编码的蛋白能将龙胆酸和3‑氯龙胆酸开环降解。本发明提供的龙胆酸双加氧酶能在30min内降解100mg/l的龙胆酸和3‑氯龙胆酸。因此,龙胆酸双加氧酶基因dsmD在构建降解麦草畏转基因作物中应用潜能巨大,龙胆酸双加氧酶蛋白DsmD在降解麦草畏以及苯环类物质中应用前景很好。
本发明公开了一种邻苯二酚双加氧酶突变体、重组载体及其制备方法和应用,该突变型邻苯二酚双加氧酶为如下(a1)或(a2):(a1)由SEQ ID No.2所示的氨基酸序列经缺失、替代或增加一个或多个氨基酸得到的与本发明的突变型邻苯二酚双加氧酶包括单点突变体和组合突变体,与野生型邻苯二酚双加氧酶相比,其单点突变体和组合突变体在40℃下半衰期均更长;尤其是组合突变体,其半衰期大约是野生型的3倍,表现出单点突变体热稳定性的叠加效果
本发明公开了一种邻苯二酚双加氧酶突变体、重组载体及其制备方法和应用,该突变型邻苯二酚双加氧酶为如下(a1)或(a2):(a1)由SEQ ID No.2所示的氨基酸序列经缺失、替代或增加一个或多个氨基酸得到的与本发明的突变型邻苯二酚双加氧酶包括单点突变体和组合突变体,与野生型邻苯二酚双加氧酶相比,其单点突变体和组合突变体在40℃下半衰期均更长;尤其是组合突变体,其半衰期大约是野生型的3倍,表现出单点突变体热稳定性的叠加效果
本发明适用于生物技术领域,提供了一种儿茶酚1,2‑双加氧酶及其编码基团、制备方法和应用,该儿茶酚1,2‑双加氧酶的氨基酸序列如序列表SEQ ID NO.2所示,其制备方法包括以下步骤:将儿茶酚1,2‑双加氧酶的编码基因扩增产物进行双酶切后,再连接到克隆质粒上,得到重组克隆质粒;将重组克隆质粒电转移到第一菌株上,得到克隆菌株;对重组克隆质粒和表达质粒进行双酶切处理后,再将二者的酶切产区连接,得到重组表达质粒;将重组表达质粒电转化到第二菌株上,得到表达菌株;将表达菌株进行诱导表达培养,得到儿茶酚1,2‑双加氧酶。该儿茶酚1,2‑双加氧酶可以用于提高重油的微生物降解速率。
本发明公开了一种含有氮杂环螺旋结构的高效IDO/TDO双抑制剂,具体地,涉及一种式(I)化合物或其药学上可接受的盐、其立体异构体、或其互变异构体、或其前药。本发明的式(I)化合物,可以作为吲哚胺‑2,3‑双加氧酶抑制剂和色氨酸‑2,3‑双加氧酶,用于制备预防和/或治疗吲哚胺‑2,3‑双加氧酶和色氨酸‑2,3‑双加氧酶介导的疾病的药物,式( I )双加氧酶螺旋结构双抑制剂氮杂环色氨酸吲哚互变异构体立体异构体可接受抑制剂介导前药制备疾病预防治疗