本发明公开了一种玫瑰的花青素还原酶RrANR基因及其编码蛋白和应用,玫瑰的花青素还原酶RrANR基因,其核苷酸序列为SEQ ID No.1所示,其长度为1020bp。该基因与植物原花青素合成有关。RrANR基因编码的花青素还原酶RrANR,其氨基酸序列为由SEQ ID No.2所示的氨基酸序列组成的蛋白质。本发明将玫瑰中克隆分离得到花青素还原酶基因(RrANR)导入烟草植株中,可以显著提高转基因植株中原花青素的含量,从而可以提取、分离纯化出更多的原花青素,创造出更大的经济效益有利于提高产品的附加值;并且将RrANR转化植株可以增强植物的抗逆性,为下一步培育具有高含量原花青素高抗氧化性的转基因玫瑰新品种奠定基础。
本发明公开了一种编码鸡血藤花青素还原酶的基因及其应用,填补了我国传统中药材鸡血藤中分离克隆花青素还原酶基因的空白。本发明所提供的花青素还原酶基因具有SEQ ID NO.1所示的核苷酸序列或者添加、取代、插入或缺失一个或多个核苷酸的同源序列或其等位基因及其衍生的核苷酸序列。所述基因编码的蛋白质具有SEQ ID NO.3所示的氨基酸序列或者添加、取代、插入或缺失一个或多个氨基酸的同源序列。该基因在鸡血藤根、茎、叶、花以及果实中均有表达,其中在根和茎中表达量较高,在叶中含量很低。本发明提供的花青素还原酶有助于利用基因工程技术提高鸡血藤中活性成分表儿茶素的含量,对今后鸡血藤种质资源改良具有很好的应用前景。
本发明公开了一种醛还原酶的氨基酸序列及其应用,具体公开了一种醛还原酶EupfE,其氨基酸序列如SEQ ID NO.1所示;公开了编码该醛还原酶基因的核苷酸序列,如SEQ ID NO.2所示,及经密码子优化后的核苷酸序列,如SEQ ID NO.3所示,使优化的醛还原酶EupfE的基因可以在大肠杆菌中表达;同时公开了含有所述核苷酸序列的蛋白表达载体和宿主细胞。本发明还公开了醛还原酶EupfE在催化醛类底物stipitaldehyde及其类似物或衍生物发生还原反应形成醇中的应用,该反应可用于抗肿瘤化合物neosetophomone B及其类似物的制备。
本发明涉及一种硫氧化博斯氏菌、硝基还原酶及其应用,属于生物技术领域。本发明提供了一种硫氧化博斯氏菌;提供了一种氨基酸序列如SEQ ID NO:1所示的硝基还原酶,及其核苷酸序列如SEQ ID NO:2所示的编码基因;以及提供了一种包含前述基因的质粒、基因工程菌。所述硝基还原酶具有更高的硝基催化活力和可溶性蛋白含量,适用于需要将硝基催化为氨基的反应。
本发明公开了一种3‑羟基‑3‑甲基戊二酰辅酶A还原酶及其编码基因和应用,该3‑羟基‑3‑甲基戊二酰辅酶A还原酶的氨基酸序列如SEQ ID NO.6所示。本发明通过提取灰树花子实体总RNA,逆转录合成cDNA,并通过RT‑PCR技术克隆灰树花的3‑羟基‑3‑甲基戊二酰辅酶A还原酶基因(Gfhg),得到了3669bp的完整基因序列;还构建了真核表达载体pCAMBIA1302‑Gfhg‑hyg,应用樟芝菌丝体系统,对克隆获得的pCAMBIA1302‑Gfhg‑hyg进行了功能性验证,灰树花3‑羟基‑3‑甲基戊二酰辅酶A还原酶基因(Gfhg)能够提高樟芝菌丝体中樟芝三萜的含量以及下游次级代谢产物
本发明涉及一种亚硝酸盐还原酶突变体及其编码基因和应用,所述亚硝酸盐还原酶突变体是对植物乳杆菌的亚硝酸盐还原酶完整亲本序列基础上,删除蛋白序列中1‑16位氨基酸和533‑545位氨基酸且在原有亲本序列基础上通过突变引入二硫键所得,其氨基酸序列为SEQ ID NO:49,其对应编码基因序列为SEQ ID NO:50。本发明制备得到的亚硝酸盐还原酶突变体相比野生型酶蛋白酶活力分别提高10倍,且在该酶最适反应温度条件下的半衰期提高9倍,表达量提升2.5倍。在食品、环保等领域将具有广泛应用前景。