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[发明专利]使用杂合CHEF1启动子的改善重组蛋白表达-CN201480014593.5有效
发明人：霍华德·R·克拉可 -专利权人： CMC依科斯生技制品公司
申请日： 2014-03-11 - 公布日： 2019-03-29 - 主分类号： C12N15/85 文献下载
摘要：本发明提供用于高水平表达重组蛋白的表达载体和宿主细胞。所述表达载体包含中国仓鼠卵巢延长因子1‑α(CHEF1)转录调控DNA元件和巨细胞病毒(CMV)启动子和/或人腺病毒三联前导(AdTPL)序列。与以前描述的表达系统相比，本发明实现宿主细胞的增加蛋白表达和更好的产率。
使用 chef1 启动子改善重组蛋白表达

[发明专利]一种2A肽、双顺反子表达载体、重组蛋白表达系统及应用-CN202011476275.4在审
发明人：王天云;林艳;张俊河;张继红;樊振林;米春柳;杨献军 -专利权人：河南普诺易生物制品研究院有限公司;新乡医学院
申请日： 2020-12-14 - 公布日： 2021-04-02 - 主分类号： C07K14/09 文献下载
摘要：本发明涉及一种2A肽、双顺反子表达载体、重组蛋白表达系统及应用。本发明提供了一种2A肽(SEQ ID NO：1或SEQ ID NO：3)，提供了含有所述2A肽编码基因的双顺反子表达载体及其构建方法，并通过构建含有所述2A肽的重组蛋白表达系统，将其应用于重组蛋白的表达，可以实现2个目的基因在哺乳动物细胞的高效表达。试验证明，在同等条件下，与其他2A肽比较，本发明提供的基于E2A和F2A的重组蛋白表达系统能够显著提高哺乳动物细胞重组蛋白的稳定表达水平，可广泛应用于制备各种目的蛋白，特别是抗体的制备。为改善哺乳动物细胞表达系统，进一步提高重组蛋白的表达量、增强细胞株的稳定性、降低生产成本奠定了基础。
一种顺反子表达载体重组蛋白系统应用

[发明专利]FasL蛋白作为生物标记在定性检测大肠癌干细胞对阿司匹林敏感性中的应用-CN201510323724.4在审
发明人：黄建;陈志刚;孔冬 -专利权人：浙江大学;孔冬
申请日： 2015-06-11 - 公布日： 2015-09-30 - 主分类号： G01N33/68 文献下载
摘要：本发明公开了FasL蛋白作为生物标记在定性检测大肠癌干细胞对阿司匹林敏感性中的应用。本发明还公开了编码所述FasL蛋白的mRNA作为生物标记在定性检测大肠癌干细胞对阿司匹林敏感性中的应用。本发明又公开了乙酰化H3K9蛋白作为生物标记在定性检测大肠癌干细胞对阿司匹林敏感性中的应用。本发明发现Aspirin选择性清除大肠癌的肿瘤干细胞，并且Aspirin明显上调大肠癌肿瘤干细胞中FasL蛋白的表达水平，因此FasL是Aspirin应答蛋白，通过检测FasL基因或FasL蛋白在肿瘤干细胞中的表达水平，可以准确、快速地评估肿瘤干细胞对Aspirin的敏感性，从而直接在基因转录与蛋白质表达或修饰水平上评价Aspirin的有效性。
fasl 蛋白作为生物标记定性检测肠癌干细胞阿司匹林敏感性中的应用

[发明专利]KNSL4的转移相关基因功能和预测乳腺癌患者预后的标志物用途及其应用方法-CN200710111637.8无效
发明人：冯玉梅;李晓青;万艳芳 -专利权人：天津医科大学附属肿瘤医院
申请日： 2007-06-01 - 公布日： 2007-12-19 - 主分类号： C12Q1/68 文献下载
摘要：本发明公开了①驱动蛋白样DNA结合蛋白基因KNSL4具有转移相关基因的功能；②KNSL4基因表达水平预测乳腺癌患者预后的标志物用途；③基于KNSL4mRNA表达量用于乳腺癌患者预后判断的应用方法：建立了实时定量RT－PCR检测KNSL4的mRNA表达水平的方法，根据患者复发转移阳性病例和复发转移阴性病例的KNSL4基因mRNA表达水平确定判断患者预后的临界值，KNSL4mRNA表达量高于临界值的患者预后好，而低于临界值的患者预后差
knsl4 转移相关基因功能预测乳腺癌患者预后标志用途及其应用方法

[发明专利]一种利用isPLA技术对蛋白复合体表达进行定量的方法-CN202310696622.1在审
发明人：严飞;赵宏锟 -专利权人：昆明医科大学
申请日： 2023-06-13 - 公布日： 2023-09-08 - 主分类号： C12Q1/6804 文献下载
摘要：本发明涉及病理组织切片检测技术领域，具体公开了一种利用isPLA技术对蛋白复合体表达进行定量的方法。通过将石蜡病理组织切片进行脱蜡及水化后进行isPLA蛋白复合体评分或对冰冻组织切片直接进行isPLA检测蛋白复合体，将组织isPLA结果的强度和频率所得的评分相乘以得到最后的复合体表达水平的评分。据此可以通过isPLA技术检测肺癌患者肿瘤组织中SQSTM1及其结合因子的复合体的表达，并根据以上方法对复合体的表达水平进行定量，最后可以进行复合体的表达水平与患者生存期及淋巴结转移的相关性分析。
一种利用 ispla 技术蛋白复合体表达进行定量方法

[发明专利]一种人胰岛素原C肽的生产方法-CN200710147082.2无效
发明人：黄阳滨;郭学彦;任军;徐晓燕 -专利权人：上海新生源生物医药有限公司
申请日： 2007-09-05 - 公布日： 2008-03-12 - 主分类号： C12P21/02 文献下载
摘要：本发明提供了一种使用毕赤酵母高效表达人胰岛素原C肽串联蛋白的发酵方法。重组人胰岛素原C肽串联蛋白在毕赤酵母中分泌表达非常稳定，同时通过发酵工艺优化，提高了表达量，具有稳定性好、表达水平高、生产工艺简便的优点。本发明可高效、简便、低成本的获得重组人胰岛素原C肽串联蛋白。
一种胰岛素生产方法

[发明专利]用于生成空小RNA病毒壳体的构建体-CN201080058064.7有效
发明人： B.查尔斯顿;I.琼斯 -专利权人：动物健康研究院
申请日： 2010-09-24 - 公布日： 2012-12-19 - 主分类号： C12N7/04 文献下载
摘要：本发明提供了一种在宿主细胞中表达时能够生成空病毒壳体的构建体，该构建体包含：(i)编码壳体前体蛋白的核苷酸序列；(ii)编码能够切割所述壳体前体蛋白的蛋白酶的核苷酸序列；和(iii)控制元件，其控制所述蛋白酶的表达，使得在所述宿主细胞中存在所述构建体时，所述控制元件引起所述蛋白酶以如下的水平表达，该水平足以切割所述壳体前体蛋白，但是不足以在宿主细胞中诱导显著的毒性。
用于生成 rna 病毒壳体构建

[发明专利]一种表达呼吸道合胞病毒F蛋白的重组载体及方法-CN201610757052.2有效
发明人：彭涛;许煜华;卢全占;马书智;王弋;尹海滨;安鸿 -专利权人：广东华南疫苗股份有限公司
申请日： 2016-08-29 - 公布日： 2019-10-11 - 主分类号： C12N15/866 文献下载
摘要：本发明公开了一种表达呼吸道合胞病毒F蛋白的重组载体及方法，重组载体由骨架载体和插入其中的呼吸道合胞病毒F蛋白表达框构成，呼吸道合胞病毒F蛋白表达框位于载体启动子下游，包括F2蛋白基因序列、F1蛋白基因序列本发明的重组载体，同时表达多个基因，表达的蛋白可以高效自剪切为F2和F1，进而形成F1‑F2同源三聚体。本发明方法可以高效制备得到纯化的F蛋白，得到的纯化F蛋白可以作为抗原使用，可以诱导高水平的抗体免疫反应。
一种表达呼吸道病毒蛋白重组载体方法

[发明专利]一种提高重组蛋白在谷氨酸棒杆菌中表达水平的方法及其应用-CN202210032555.9在审
发明人：刘秀霞;王亚丽;詹锦玲;刘春立;李业;杨艳坤;白仲虎 -专利权人：江南大学
申请日： 2022-01-12 - 公布日： 2022-04-29 - 主分类号： C12N15/77 文献下载
摘要：本发明提供了一种提高重组蛋白在谷氨酸棒杆菌中表达水平的方法及其应用。其能有效提高谷氨酸棒杆菌外源蛋白的表达。通过通用RBS引物及PCR技术将RBS序列引入基因上游，然后利用生物砖组装技术完成基因多拷贝载体构建，利用该技术实现了蛋白的高效表达。
一种提高重组蛋白谷氨酸杆菌表达水平方法及其应用

[发明专利]一种同型半胱氨酸诱导的内质网蛋白在制备治疗或预防EV71感染药物中的应用-CN201510398925.0有效
发明人：吴建国;邬开朗;葛茂林;乔智;罗震;谭秋萍;刘芳 -专利权人：广东龙帆生物科技有限公司
申请日： 2015-07-08 - 公布日： 2018-02-13 - 主分类号： A61K38/17 文献下载
摘要：本发明公开一种同型半胱氨酸诱导的内质网蛋白在制备治疗或预防EV71感染药物中的应用，其步骤是A利用pCMV‑Tag‑Flag2B载体构建pCMV‑HERP质粒；B EV71病毒的VP1结构蛋白和3C非结构蛋白作为EV71病毒复制的检测标志物，并针对VP1蛋白基因设计了荧光定量检测引物；C时间梯度实验。表达HERP蛋白能够明显抑制EV71病毒VP1的mRNA水平，随着HERP质粒浓度的提高呈现梯度降低的剂量依赖效应。免疫印迹实验也显示了VP1和3C蛋白的表达水平也随着HERP蛋白表达量的提高而降低。
一种半胱氨酸诱导内质网蛋白制备治疗预防 ev71 感染药物中的应用

[发明专利]一种个体差异表达蛋白质的识别方法-CN202111362073.1在审
发明人：俞容山;刘亚琛;童梦莎;林雅岚;吴雨娟;林育祥 -专利权人：厦门大学
申请日： 2021-11-17 - 公布日： 2022-03-22 - 主分类号： G16B25/10 文献下载
摘要：本发明公开了一种个体差异表达蛋白质的识别方法，该方法包括以下步骤：S1、对蛋白质丰度数据进行预处理；S2、验证正常队列的蛋白质丰度数据中是否存在高度显著的蛋白质对；S3、选取个体层面差异表达算法中的参考组；S4、基于参考组采用个体层面差异表达算法识别差异表达蛋白质；该发明首先基于蛋白质丰度数据的特征，对蛋白质丰度数据进行预处理，去除变异系数高以及缺失值比例高的蛋白质，减少蛋白质定量误差对个体差异蛋白结果的影响；其次基于蛋白质稳定对选取参考组，并且利用迭代的方法，不断优化参考组中存在差异表达的蛋白质，保证了参考组的稳定性，可在个体水平上有效识别差异表达的蛋白质，识别精度高，应用前景好。
一种个体差异表达蛋白质识别方法

[发明专利]一种新型睾丸线粒体标记物检测试剂盒的制备方法-CN202310059084.5在审
发明人：于骏;孙斐;陈霞;李志然;付杨博;何磊;黄秋汝;孙飞腾 -专利权人：南通大学
申请日： 2023-01-16 - 公布日： 2023-06-02 - 主分类号： G01N33/68 文献下载
摘要：本发明公开了一种新型睾丸线粒体标记物检测试剂盒的制备方法，所述的试剂盒以在睾丸组织中优势表达CG8728蛋白作为睾丸线粒体特异性检测方法。试剂盒通过检测果蝇睾丸组织中CG8728蛋白的第312‑326位氨基酸(C‑DSGPKQVDTSIAQYT)的表达水平进行睾丸线粒体表达模式的检测。CG8728蛋白在睾丸组织各级生精细胞的线粒体中均有表达。本发明通过检测睾丸组织中CG8728蛋白的表达模式可以有效判断睾丸组织中各级生精细胞的线粒体分布情况。CG8728蛋白作为一种新型睾丸优势表达蛋白，利用其制备的试剂盒可有效应用于睾丸组织线粒体表达分布的检测，对睾丸线粒体研究具有重要的应用价值。
一种新型睾丸线粒体标记检测试剂盒制备方法

[发明专利]HPV融合蛋白、基因、载体、菌株、制备方法及用途-CN200810227047.6无效
发明人：田厚文;高见;赵莉;任皎;张卉;阮力 -专利权人：中国疾病预防控制中心病毒病预防控制所
申请日： 2008-11-20 - 公布日： 2010-06-16 - 主分类号： C07K14/025 文献下载
摘要：本发明涉及一种在大肠杆菌中高效表达的人乳头瘤病毒16型L2E7重组蛋白的密码子优化基因，将其插入原核表达载体pET9a，优化基因获得高效表达，表达水平占全菌的50％，表达蛋白经纯化后免疫小鼠，实验结果表明该蛋白与未经优化基因表达的蛋白具有相同的免疫原性，可诱发特异性的γ-INF的释放，肿瘤生长抑制动物实验表明蛋白免疫对肿瘤的生长有明显抑制作用，其中90％小鼠肿瘤细胞生长完全抑制。该优化基因建立的L2E7重组蛋白原核高效表达系统能用于HPV16感染和相关宫颈癌的预防和治疗疫苗的中试生产及新药研发。
hpv 融合蛋白基因载体菌株制备方法用途

[发明专利]核酸外切酶Ⅲ消化FRET－dsDNA微阵列芯片检测转录因子蛋白-CN200410041684.6无效
发明人：王进科 -专利权人：王进科;南京新益华集团有限公司
申请日： 2004-08-13 - 公布日： 2006-02-15 - 主分类号： C12Q1/68 文献下载
摘要：转录因子是一类负责基因表达调控的重要蛋白质，是基因表达调控通路及网络的枢纽，是功能基因组和蛋白质组研究的重要对象，也是转录治疗和药物研究的重要靶点。本发明提出了一种检测转录因子表达和活化水平的新方法“核酸外切酶III消化FRET－dsDNA微阵列芯片检测转录因子蛋白”。运用该方法分析转录因子表达和活化水平包括如下步骤：(a)准备FRET－dsDNA微阵列芯片；(b)转录因子蛋白与FRET－dsDNA微阵列芯片反应；(c)核酸外切酶III与FRET－dsDNA微阵列芯片反应
核酸外切酶消化 fret dsdna 阵列芯片检测转录因子蛋白

[发明专利]稳定表达植物甜味蛋白基因的哺乳动物细胞系及构建方法-CN201010292842.0无效
发明人：赖良学;闫森;欧阳红生;逄大欣;李莉;李小平;高飞;王海军;宋娜;周杨 -专利权人：吉林大学
申请日： 2010-09-27 - 公布日： 2011-02-23 - 主分类号： C12N5/10 文献下载
摘要：本发明提供了一种植物甜味蛋白基因稳定表达哺乳动物细胞系及构建方法，将构建的pCAG-neo-Thauamtin载体线性化后，利用脂质体LipofectamineTM2000转染HEK-293细胞，经G418采用一系列的方法对所获得的细胞在基因水平、转录水平和翻译表达水平进行鉴定，获得了稳定表达Thauamtin基因的HEK-293细胞系，利用RT-PCR、Westernblot在哺乳动物细胞水平上检测了植物甜味蛋白Thaumatin基因的表达。
稳定表达植物甜味蛋白基因哺乳动物细胞系构建方法