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[发明专利]抑制谷氨酸棒杆菌中全局转录调控因子基因glxR的表达生产5-ALA的方法-CN202310889013.8在审
发明人：罗健诚;王智文;郑洋洋;王子尧 -专利权人：天津大学
申请日： 2023-07-19 - 公布日： 2023-10-24 - 主分类号： C12N15/77 文献下载
摘要：本发明公开了抑制谷氨酸棒杆菌中全局转录调控因子基因glxR的表达生产5‑ALA的方法，所述全局转录调控因子基因glxR的核苷酸序列如SEQ ID NO.1所示。实验证明，谷氨酸棒杆菌中全局转录调控因子基因glxR表达的抑制使得谷氨酸棒杆菌工程菌株中5‑氨基乙酰丙酸产量比CGS15‑h3提升约1.37倍。
抑制谷氨酸杆菌全局转录调控因子基因 glxr 表达生产 ala 方法

[发明专利]高产3-羟基丙酸的谷氨酸棒杆菌菌株及构建方法与应用-CN202210673552.3有效
发明人：陈涛;戴维;常志帅;崔洁瑶;王智文 -专利权人：天津大学
申请日： 2022-06-13 - 公布日： 2023-10-20 - 主分类号： C12N15/77 文献下载
摘要：本发明公开了高产3‑羟基丙酸的谷氨酸棒杆菌菌株及构建方法与应用，其构建：(1)在谷氨酸棒状杆菌重组菌株Cgz14中用弱启动子PP7替换编码脂肪酸合酶fasA基因的启动子；敲除msmA和cg0635基因；(2)在pEC‑sod‑N‑C*质粒的mcr‑N基因和mcr‑C*基因之间插入来自谷氨酸棒杆菌ATCC 13032clpP基因的前62bp，得到pEC‑sod‑N‑HP‑C*质粒；(3)将pEC‑sod‑N‑HP‑C*质粒导入步骤(1)获得的谷氨酸棒杆菌中，即得，本发明所构建的菌株安全无害，可以利用乙酸在有氧条件下使用较简单的生产工艺生产3‑羟基丙酸，发酵产量30g/L以上。
高产羟基丙酸谷氨酸杆菌菌株构建方法应用

[发明专利]生产L-精氨酸的棒状杆菌属的微生物和使用其生产L-精氨酸的方法-CN201880005103.3有效
发明人：金善慧;金亨俊;H·吴;尹炳勋;姜旻景 -专利权人： CJ第一制糖株式会社
申请日： 2018-12-18 - 公布日： 2023-10-20 - 主分类号： C12N15/77 文献下载
摘要：本公开内容涉及生产L‑精氨酸的棒状杆菌属的微生物，以及使用其生产L‑精氨酸的方法。
生产精氨酸杆菌微生物使用方法

[发明专利]一种渗透压耐受性功能基因鉴定方法及功能基因的应用-CN202310256561.7在审
发明人：孙际宾;王钰;赵晓佳;郑平;刘娇;王猛;周文娟;陈久洲;郭轩;程海娇 -专利权人：中国科学院天津工业生物技术研究所
申请日： 2023-03-16 - 公布日： 2023-10-17 - 主分类号： C12N15/77 文献下载
摘要：本发明公开了一种渗透压耐受性功能基因鉴定方法及功能基因的应用。本发明首先构建了一种基于谷氨酸棒杆菌全基因组单基因过表达库的功能基因筛选方法，用于高通量快速地筛选能提高菌株对高渗透压力的耐受性的功能基因。通过过表达这些功能基因提高菌株对高渗透压力的耐受性，从而提升菌株的氨基酸产量。
一种渗透压耐受性功能基因鉴定方法功能应用

[发明专利]一种一步法生产D-阿洛酮糖的基因工程菌的构建方法-CN202310670216.8在审
发明人：赵伟;杨倩;张金祥;张静超;赵钰涵;刘晓文 -专利权人：山东福洋生物科技股份有限公司
申请日： 2023-06-07 - 公布日： 2023-10-13 - 主分类号： C12N15/77 文献下载
摘要：本发明公开一种一步法生产D‑阿洛酮糖的基因工程菌的构建方法，属于生物工程技术领域，以淀粉或糊精或麦芽糖为底物通过体外酶法直接产出阿洛酮糖的方法，通过一株谷棒杆菌同时表达ɑ‑葡萄糖水解酶、葡萄糖异构酶和优化后的D‑阿洛酮糖3‑差向异构酶这三种酶从而实现从二糖或者多糖底物一步法生产阿洛酮糖的方法；采用此法获得的得到的D‑阿洛酮糖3‑差向异构酶重组细胞具有极高的生物安全性，可直接用于工业化生产。
一种一步法生产阿洛酮糖基因工程构建方法

[发明专利]新型启动子及利用其生产L-氨基酸的方法-CN201980004245.2有效
发明人：李智软;张真淑;金亨俊;尹炳勋;崔先亨;崔允祯 -专利权人： CJ第一制糖株式会社
申请日： 2019-03-27 - 公布日： 2023-10-03 - 主分类号： C12N15/77 文献下载
摘要：本申请涉及新型启动子和使用其生产L‑氨基酸的方法，且更具体地，涉及具有启动子活性的新型多核苷酸、包含其的载体和棒杆菌属的微生物、利用该微生物生产L‑氨基酸的方法、和生产发酵组合物的方法、以及该发酵组合物。
新型启动子利用生产氨基酸方法

[发明专利]一种棒杆菌中基因多拷贝整合方法-CN202310699287.0在审
发明人：史锋;陈睿;李永富 -专利权人：江南大学
申请日： 2023-06-14 - 公布日： 2023-09-12 - 主分类号： C12N15/77 文献下载
摘要：本发明公开了一种棒杆菌中基因多拷贝整合方法，具体涉及一种在谷氨酸棒杆菌等棒杆菌中进行基因多拷贝整合的方法，属于基因工程领域。本发明提供的多拷贝整合系统是基于IScg1基因在谷氨酸棒杆菌有8个拷贝，通过不断进行整合质粒的转化及逐步提高的筛选压力将多个目的/外源基因表达框整合在染色体上，最后经过10轮进化，成功构建多拷贝整合目的基因的重组菌株。本发明提供的整合质粒以pBlueScript IISK(‑)为骨架，携带IScg1的上下游同源臂、筛选标记基因、目的基因表达框。其中，所述筛选标记表达盒包括内源性启动子和筛选标记基因，通过弱启动子降低菌株对抗生素的耐受性，从而提高目的菌株的筛选效率，为谷氨酸棒杆菌基因多拷贝整合提供了新的思路。
一种杆菌基因拷贝整合方法

[发明专利]一种重组微生物的构建方法及其应用-CN202310463896.6在审
发明人：王亚迪;胡丹;冯帆;赵津津;李岩 -专利权人：廊坊梅花生物技术开发有限公司
申请日： 2023-04-26 - 公布日： 2023-08-25 - 主分类号： C12N15/77 文献下载
摘要：本发明涉及基因工程技术领域，尤其涉及一种重组微生物的构建方法及其应用。所述构建方法包括：降低微生物中的转录调控因子Cg12680的表达水平，提高转氢酶基因pntAB的表达水平。本发明研究发现转录调控因子Cg12680的失活可以在一定程度上提升棒杆菌生产赖氨酸的能力，而在同时提高转氢酶基因pntAB的表达水平时，棒杆菌生产赖氨酸的能力进一步大幅度提高，这在赖氨酸或其他天冬氨酸家族的生产领域有重要意义。
一种重组微生物构建方法及其应用

[发明专利]一种生产4-羟基异亮氨酸的动态调控菌及其应用-CN202210151278.3有效
发明人：史锋;来文梅;李永富 -专利权人：江南大学
申请日： 2022-02-16 - 公布日： 2023-08-25 - 主分类号： C12N15/77 文献下载
摘要：本发明公开了一种生产4‑羟基异亮氨酸的动态调控菌及其应用，属于基因工程领域。本发明构建了能够响应支链氨基酸的双向动态调控系统，促进了异亮氨酸向4‑羟基异亮氨酸的转化，同时利用衰减子PilvBNC负调控异亮氨酸合成途径中ilvA基因的表达，使底物异亮氨酸的含量达到动态平衡，促进4‑羟基异亮氨酸的合成，使4‑羟基异亮氨酸产量可达123.2mM。在此基础上，加入赖氨酸核糖体开关，显著减少副产物赖氨酸的合成，使得4‑羟基异亮氨酸的产量进一步得到提升，达到177.3mM。本发明所提供的动态调控系统及菌株适合应用于调控系统的宿主细胞在支链氨基酸的平衡和动态调控、以及制备与支链氨基酸相关的代谢产物及其衍生物。
一种生产羟基异亮氨酸动态调控及其应用

[发明专利]一种在棒状杆菌中辅助sacB基因编辑系统的CRISPR-cpf1筛选工具-CN202210184437.X有效
发明人：史锋;陈睿;李永富 -专利权人：江南大学
申请日： 2022-02-24 - 公布日： 2023-08-25 - 主分类号： C12N15/77 文献下载
摘要：本发明公开了一种在棒状杆菌中辅助sacB基因编辑系统的CRISPR‑cpf1筛选工具，属于基因工程领域。本发明通过对现有基因编辑技术的改进及组合，提供了一种提高基于自杀质粒介导的同源重组及sacB系统二轮交换时的筛选效率的筛选工具，基于CRISPR/Cpf1机理及谷氨酸棒杆菌不存在非同源修复机制给予的致死性，创造性地开发了一种反向筛选工具，并无需再做改造或更换sgRNA就能直接用于筛选二轮交换菌株，解决了sacB系统二轮交换低效的问题，并具有普适性。同时降低了假阳性的概率、显著提升了筛选效果。在棒状杆菌的基因编辑及进一步利用中有广阔的应用前景。
一种杆菌辅助 sacb 基因编辑系统 crispr cpf1 筛选工具

[发明专利]一种4-羟基异亮氨酸生产菌的传感性进化控制方法及其应用-CN202010095685.8有效
发明人：史锋;余馨萍;谭书煜;刘海艳;李永富 -专利权人：江南大学
申请日： 2020-02-17 - 公布日： 2023-07-25 - 主分类号： C12N15/77 文献下载
摘要：本发明公开了一种4‑羟基异亮氨酸生产菌的传感性进化控制方法及其应用，属于基因工程领域。本发明提供了L‑异亮氨酸传感性进化控制系统及其构建方法，并将其应用于菌株的传感性进化控制。经实验证明，传代12‑200代，进化后的菌株中4‑HIL产量增加的正突变菌株的比例可以高达96％，L‑异亮氨酸含量减少的正突变菌株的比例可以高达100％，正突变菌中L‑异亮氨酸含量最高可以降低95％。采用这种方法可显著提高菌株的突变率，大大缩短进化时间。
一种羟基异亮氨酸生产传感进化控制方法及其应用

[发明专利]新的L-酪氨酸输出蛋白质变体及利用其的L-酪氨酸生产方法-CN202180047331.9在审
发明人：金贤雅;金希庭;郑武泳;徐昌一;宋规显 -专利权人： CJ第一制糖株式会社
申请日： 2021-05-27 - 公布日： 2023-07-21 - 主分类号： C12N15/77 文献下载
摘要：本申请涉及具有L‑酪氨酸输出活性的蛋白质变体、表达所述蛋白质变体的微生物及其用途。
酪氨酸输出蛋白质变体利用生产方法

[发明专利]用于生产目标物质的方法-CN201780066784.X有效
发明人： B.米吉茨;C.罗切;P.凯利;朝里彩香;福井启太;户矢崎未来 -专利权人：味之素株式会社
申请日： 2017-10-26 - 公布日： 2023-07-14 - 主分类号： C12N15/77 文献下载
摘要：提供了用于生产目标物质诸如香草醛和香草酸的方法。通过使用具有目标物质生产能力的微生物从碳源或目标物质的前体生产目标物质，所述微生物已经以L‑半胱氨酸生物合成酶活性得以增加的方式进行了修饰。
用于生产目标物质方法

[发明专利]用于发酵生产L-赖氨酸的表达盒、菌株及其应用-CN202111673635.4在审
发明人：张明明;杨晓晓;刘修才 -专利权人：上海凯赛生物技术股份有限公司;CIBT美国公司
申请日： 2021-12-31 - 公布日： 2023-07-11 - 主分类号： C12N15/77 文献下载
摘要：本发明公开了一种用于发酵生产L‑赖氨酸的表达盒、菌株及其应用。所述表达盒包含组氨酸激酶效应蛋白AUH99703.1的编码基因。所述AUH99703.1蛋白的氨基酸和核苷酸序列分别如SEQ ID NO:1和SEQ ID NO:2所示，或与SEQ ID NO:1具有至少约95％的同一性。所述菌株为谷氨酸棒状杆菌工程菌，其包含上述表达盒，本发明通过增强组氨酸激酶效应蛋白的方式，显著缩短发酵时间以及提高L‑赖氨酸产量。
用于发酵生产赖氨酸表达菌株及其应用

[发明专利]用于制备L-赖氨酸的表达盒、基因工程菌及其应用-CN202111668271.0在审
发明人：张明明;戎倩倩;刘修才 -专利权人：上海凯赛生物技术股份有限公司;CIBT美国公司
申请日： 2021-12-31 - 公布日： 2023-07-11 - 主分类号： C12N15/77 文献下载
摘要：本发明公开了一种用于制备L‑赖氨酸的表达盒、基因工程菌及其应用。一种表达盒，所述表达盒包含启动子；和，转醛醇酶基因和/或转酮醇酶基因。本发明提供的表达盒导入出发菌后，表达增强转酮醇酶和转醛醇酶的方式，增强戊糖磷酸途径，有效改善发酵过程中电子供应等，从而提高葡萄糖利用效率，进而提高L‑赖氨酸的产量。当使用秸秆水解液时，本发明的基因工程菌的赖氨酸产量比出发菌明显提升。本发明提供的基因工程菌可以有效利用秸秆等农业废料进行发酵，具备良好的应用前景。
用于制备赖氨酸表达基因工程及其应用

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