本发明涉及非洲猪瘟病毒B475L蛋白抗原表位及其应用，以非洲猪瘟病毒B475L蛋白的氨基酸序列为材料，通过T7噬菌体展示技术将包含截短的B475L蛋白序列展示其上，构成噬菌体展示文库，利用非洲猪瘟病毒感染猪阳性血清与上述T7噬菌体展示文库的免疫沉淀后测序，鉴定其为抗原优势表位，随后通过噬菌体文库与通过非洲猪瘟病毒感染猪阳性血清的生物淘选与单个噬菌斑挑取，获得展示如SEQ ID NO：1所示多肽序列的T7噬菌体，首次确定非洲猪瘟病毒B475L蛋白的B细胞抗原表位，该抗原表位的获得为以抗原表位为材料研发非洲猪瘟检测试剂及其试剂盒、单抗制备和安全、可鉴别诊断表位疫苗等急需战略防控产品奠定了基础。
本发明提供猪圆环病毒4型制备方法及其应用，猪圆环病毒4型基因序列是在如SEQ ID NO.4所示的PCV4全基因组序列上游和下游插入调控序列得到，如SEQ ID NO.2所示的调控序列位于PCV4全基因组序列上游，如SEQ ID NO.3所示的调控序列位于PCV4全基因组序列下游。本发明首次制备得到的PCV4病毒样品，可用于PCV4感染及致病机制的研究、疫苗研发等，为PCV4感染引起的疫病提供理论依据及预防控制该疫病的有效工具，在临床、实验室研究上均具有广阔的应用前景。
本发明涉及一种PCV2、PCV3和PCV4三联亚单位疫苗及其制备方法，包括三种重组蛋白，分别是PCV2 Cap蛋白、PCV3 Cap蛋白和PCV4 Cap蛋白，所述的PCV2 Cap蛋白是将如SEQ ID NO.1、所示的基因序列通过大肠杆菌表达得到的，所述的PCV3 Cap蛋白是将如SEQ ID NO.2所示的基因序列通过大肠杆菌表达得到的，所述的PCV4Cap蛋白是将如SEQ ID NO.3所示的基因序列通过大肠杆菌表达得到的。可用于同时防治PCV2、PCV3和PCV4感染，显著的提高了针对PCV2、PCV3和PCV4的免疫原性，免疫后动物可诱导产生高效价的抗体。
本发明公开了一种有效抑制Ⅱ型PRRSV感染的基因序列，为一种替换猪CD163第七外显子后可有效抑制Ⅱ型PRRSV感染的基因序列，同时还公开了该序列在抗病研究中的应用，利用CRISPR/Cas9技术；将基因序列如SEQ ID 1所示的猪CD163第五外显子基因序列成功地替换猪CD163第七外显子的基因序列，并获得了CD163基因序列如SEQ ID 2的阳性克隆猪的肺泡巨噬细胞；可用于阐明PRRSV感染的分子机制及为后续获得有效抑制PRRSV感染的猪种群提供了理论基础，减少因PRRSV给养猪业带来的巨大损失。
