本发明提供了一种CHO细胞来源的外泌体miRNA在调控重组蛋白表达中的应用，本发明属于生物医药技术领域。本发明提供的一种CHO细胞来源的外泌体miRNA在调控重组蛋白表达中的应用中所述miRNA为cgr‑miR‑92a‑3p，核苷酸序列如SEQ ID NO：1所示。本发明发现转染miRNA inhibitor下调CHO细胞来源的外泌体miR‑92a‑3p水平，阿达木抗体(重组蛋白)的表达水平显著升高，有望提供一种提高CHO细胞重组蛋白表达的新方法。
本发明涉及一种瞬时转染试剂及其应用，属于细胞生物学和生物技术领域。本发明的瞬时转染试剂，包括聚乙烯亚胺盐酸盐溶液、氯化钠溶液和氯化镁溶液；聚乙烯亚胺盐酸盐溶液的浓度为0.8～1.2mg/mL，pH为6.9～7.1，聚乙烯亚胺盐酸盐为PEI MAX 40K；氯化钠溶液的浓度为4.8～5.3mol/L；氯化镁溶液的浓度为0.8～1.2mol/L。本发明的瞬时转染试剂用于细胞转染时，具有较高的转染效率。由于聚乙烯亚胺盐酸盐的浓度较低，本发明的瞬时转染试剂具有较低的毒性。本发明的瞬时转染试剂是一种价廉、毒性小、转染效率高的瞬时转染试剂，可用于重组蛋白生产和基因治疗等方面。
本发明公开了一种用于检测与结直肠癌长春新碱耐药相关的miRNA表达的引物、试剂盒、方法及应用，属于肿瘤生物治疗技术领域。本发明首次通过试验证实SEQ ID NO:1所示miRNA序列与长春新碱的耐药性相关，miRNA在长春新碱耐药细胞中高表达、敏感细胞中低表达，因此可以作为肿瘤细胞长春新碱耐药的标志物。根据该标志物设计的引物、试剂盒及检测方法可用于临床判断肿瘤细胞对长春新碱的耐药性，进一步指导临床用药并实现精准治疗，提高疗效，降低副作用。本发明为设计肿瘤细胞长春新碱耐药药物提供了新的靶点，可用于直接开发拮抗肿瘤细胞长春新碱耐药性的药物。
