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- [发明专利]hTERT重组构建染色体易位细胞模型及其细胞库-CN201310403850.1在审
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翁炳焕;李晓;马袁英;马裕;叶光勇;金帆
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翁炳焕
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2013-09-01
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2015-03-18
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C12N5/10
- 本发明涉及用于医学领域的hTERT重组构建染色体易位细胞模型及其细胞库,其主要特征是以内切酶EcoR I和Xho I双酶切质粒pCIneo-hTERT和载体pLXSNneo,以Li gation Mix连接经PCR扩增、凝胶电泳分离的hTERT和pLXSNneo酶切产物,构建pLXSNneo-hTERT重组子,转化DH5a感受态细胞以纯化扩增并挑取耐氨苄青霉素菌落抽提质粒,以脂质体转染离体传代呈对数生长的染色体易位细胞,使重组子与细胞DNA整合,并扩大培养经G418筛选含阳性重组子克隆,筛选细胞形态、生长曲线、染色体核型、裸鼠致瘤试验、转染细胞端粒酶活性、hTERT mRNA表达、免疫组化、细胞增殖周期及其凋亡率符合永生细胞特性并与原代细胞相同或相近者作为hTERT介导染色体易位细胞模型冻存于液氮中,为从细胞水平在体外长期研究其发病机制奠定基础。
- htert重组构建染色体易位细胞模型及其
- [发明专利]hTERT转基因构建18-三体综合征细胞模型及其细胞库-CN201310407555.3在审
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翁炳焕;李晓;李红阁;叶光勇;郑金川;金帆
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翁炳焕
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2013-09-01
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2015-03-18
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C12N5/10
- 本发明涉及用于医学领域的hTERT介导18-三体综合征细胞模型及其细胞库的构建,其主要特征是以内切酶EcoR I和Xho I双酶切质粒pCIneo-hTERT和载体pLXSNneo,以Ligation Mix连接经PCR扩增、凝胶电泳分离的hTERT和pLXSNneo酶切产物,构建pLXSNneo-hTERT重组子,转化DH5a感受态细胞以纯化扩增并挑取耐氨苄青霉素菌落抽提质粒,以脂质体转染离体传代呈对数生长的18-三体综合征细胞,使重组子与细胞DNA整合,并扩大培养经G418筛选含阳性重组子克隆,筛选细胞形态、生长曲线、染色体核型、裸鼠致瘤试验、转染细胞端粒酶活性、hTERT mRNA表达、免疫组化、细胞增殖周期及其凋亡率符合永生细胞特性并与原代细胞相同或相近者作为hTERT介导18-三体综合征外研究细胞模型冻存于液氮中,为从细胞水平在体外长期研究其发病机制奠定基础。
- htert转基因构建18综合征细胞模型及其
- [发明专利]转染hTERT重组基因构建克氏综合征细胞模型及其细胞库-CN201310407538.X在审
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翁炳焕;李晓;徐向荣;朱瑞建;马裕;金帆
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翁炳焕
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2013-09-01
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2015-03-18
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C12N5/10
- 本发明涉及用于医学领域的转染hTERT重组基因构建克氏综合征细胞模型及其细胞库的方法,其主要特征是以内切酶EcoR I和Xho I双酶切质粒pCIneo-hTERT和载体pLXSNneo,以Ligation Mix连接经PCR扩增、凝胶电泳分离的hTERT和pLXSNneo酶切产物,构建pLXSNneo-hTERT重组子,转化DH5a感受态细胞以纯化扩增并挑取耐氨苄青霉素菌落抽提质粒,以脂质体转染离体传代呈对数生长的克氏综合征细胞,使重组子与细胞DNA整合,并扩大培养经G418筛选含阳性重组子克隆,筛选细胞形态、生长曲线、染色体核型、裸鼠致瘤试验、转染细胞端粒酶活性、hTERT mRNA表达、免疫组化、细胞增殖周期及其凋亡率符合永生细胞特性并与原代细胞相同或相近者作为hTERT转染克氏综合征细胞模型冻存于液氮中,为从细胞水平在体外长期研究其发病机制奠定基础。
- 转染htert重组基因构建综合征细胞模型及其
- [发明专利]hTERT基因重组构建唐氏综合征细胞模型及其细胞库-CN201310407553.4在审
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翁炳焕;李晓;舒静;马裕;郑金川;黄荷凤
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翁炳焕
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2013-09-01
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2015-03-18
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C12N5/10
- 本发明涉及用于医学领域的hTERT基因重组构建唐氏综合征细胞模型及其细胞库,其主要特征是以内切酶EcoR I和Xho I双酶切质粒pCIneo-hTERT和载体pLXSNneo,以Ligation Mix连接经PCR扩增、凝胶电泳分离的hTERT和pLXSNneo酶切产物,构建pLXSNneo-hTERT重组子,转化DH5a感受态细胞以纯化扩增并挑取耐氨苄青霉素菌落抽提质粒,以脂质体转染离体传代呈对数生长的唐氏综合征细胞,使重组子与细胞DNA整合,并扩大培养经G418筛选含阳性重组子克隆,筛选细胞形态、生长曲线、染色体核型、裸鼠致瘤试验、转染细胞端粒酶活性、hTERT mRNA表达、免疫组化、细胞增殖周期及其凋亡率符合永生化细胞特性并与原代细胞相同或相近者作为hTERT介导唐氏综合征体外研究细胞模型冻存于液氮中,为从细胞水平在体外长期研究其发病机制奠定基础。
- htert基因重组构建综合征细胞模型及其
- [发明专利]导入hTERT构建Turner综合征细胞模型及其细胞库-CN201310403829.1在审
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翁炳焕;李晓;舒静;徐向荣;朱瑞建;金帆
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翁炳焕
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2013-09-01
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2015-03-18
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C12N15/85
- 本发明涉及用于医学领域的hTERT介导Turner综合征细胞模型及其细胞库的构建,其主要特征是以内切酶EcoR I和Xho I双酶切质粒pCIneo-hTERT和载体pLXSNneo,以Ligation Mix连接经PCR扩增、凝胶电泳分离的hTERT和pLXSNneo酶切产物,构建pLXSNneo-hTERT重组子,转化DH5a感受态细胞以纯化扩增并挑取耐氨苄青霉素菌落抽提质粒,以脂质体转染离体传代呈对数生长的Turner综合征细胞,使重组子与细胞DNA整合,并扩大培养经G418筛选含阳性重组子克隆,筛选细胞形态、生长曲线、染色体核型、裸鼠致瘤试验、转染细胞端粒酶活性、hTERT mRNA表达、免疫组化、细胞增殖周期及其凋亡率符合永生细胞特性并与原代细胞相同或相近者作为hTERT介导Turner综合征细胞模型冻存于液氮中,为从细胞水平在体外长期研究其发病机制奠定基础。
- 导入htert构建turner综合征细胞模型及其
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