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[发明专利]细胞图像解析方法和细胞图像解析装置-CN201980098569.7在审
发明人：高桥涉 -专利权人：株式会社岛津制作所
申请日： 2019-07-18 - 公布日： 2022-03-01 - 主分类号： C12Q1/04 文献下载
摘要：该细胞图像解析方法包括以下步骤：实施确定第一图像(21)中的已经开始分化的细胞的区域(12)和未分化细胞的区域(11)的分割处理，来变换为标签图像(21A)；从标签图像获取形状特征量(25)；以及基于形状特征量(25)和判定基准(30)来判定是否包含成为搜索对象的候选的菌落区域。
细胞图像解析方法装置

[发明专利]一种大量提取细菌质粒的方法-CN201610992136.4在审
发明人：吴政卿;周正富;杨攀;常阳;秦毛毛;雷振生;晁岳恩;王亚欢;王美芳;何盛莲;李文旭;汪庆昌;张琨;柳东阳;刘加平;徐福新;李巍 -专利权人：河南省农业科学院小麦研究所
申请日： 2016-11-11 - 公布日： 2017-02-22 - 主分类号： C12N15/10 文献下载
摘要：该方法包括筛选获得含有质粒的原核细胞、玻璃珠悬起菌落、裂解细胞、提取质粒等步骤。本申请通过对细菌中质粒提取操作流程的优化，结果表明，利用玻璃珠悬起菌落并快速提取质粒的方法在原核表达系统中具有较好的应用效果，可较为快速的获得大量质粒，为转基因、BAC文库构建、细胞转染等应用研究奠定基础
一种大量提取细菌质粒方法

[发明专利]一种高效的利用蓝斑筛选的基因敲除方法-CN202210922716.1在审
发明人：陈忠军;刘瑾;孙子羽;满都拉;王帅;金晶晶;董晶;刘亚茹;梁家玮 -专利权人：内蒙古农业大学
申请日： 2022-08-02 - 公布日： 2023-03-10 - 主分类号： C12Q1/04 文献下载
摘要：本发明提供一种高效的利用蓝斑筛选的基因敲除方法，首先构建插入基因lacZ和目的基因上下同源臂的质粒，将重组质粒转化入目标菌株的感受态细胞进行一次筛选和二次筛选，挑选在含有X‑gal和蔗糖的LB平板上生长且变蓝色，且在含卡那霉素的LB抗性平板上不生长的单菌落，所得单菌落经PCR验证正确即为成功敲除目的基因的目的菌株。当要选择在蔗糖平板上生长而在卡那霉素平板上未生长的单菌落进行验证时，本发明通常在对点50个以内单菌落即可获得阳性菌株。
一种高效利用筛选基因方法

[发明专利]一种苦瓜蛋白肠溶片的制备工艺-CN201610067205.0在审
发明人：龚国利;蔡东梅;李慧 -专利权人：陕西科技大学
申请日： 2016-01-29 - 公布日： 2016-06-29 - 主分类号： A61K38/16 文献下载
摘要：一种苦瓜蛋白肠溶片的制备工艺，将种子去壳，然后放入研钵中加入液氮进行研磨；接着使用CTAB法得到全基因组；根据苦瓜蛋白MAP30的基因序列设计相关引物，确定PCR的条件及体系；PCR产物回收后进行TA克隆，导入感受态细胞DH5α，筛选出阳性菌落，培养后进行双酶切；过夜培养PET‑28a，提取表达质粒，进行酶切；将经双酶切过后的目标DNA片段和表达质粒片段在solution Ⅰ体系下进行过夜连接；接着将其导入BL21(DE)感受态细胞中，筛选出阳性菌落；将阳性菌落放大培养并在IPTG的诱导下进行蛋白的表达；将蛋白进行纯化干燥；得到目标蛋白MAP30将作为主要的有效成分与一系列辅料共同制成有保健功能的苦瓜蛋白肠溶片；本发明的苦瓜片中有效蛋白
一种苦瓜蛋白肠溶片制备工艺

[发明专利]一种利用数字PCR检测食品中菌落总数的方法-CN201310613501.2无效
发明人：陈爱亮;吴英;蒋小玲;吕珍珍;刘金钏;杨曙明 -专利权人：中国农业科学院农业质量标准与检测技术研究所
申请日： 2013-11-27 - 公布日： 2014-03-26 - 主分类号： C12Q1/68 文献下载
摘要：本发明公开了一种利用数字PCR检测食品中菌落总数的方法。该方法包括如下步骤：1）富集待测食品中的细菌，将富集物与与DNA结合物共同孵育，获得PCR扩增模板；所述DNA结合物为不能穿过完整的细胞膜，但能与细胞膜受损后暴露出来的DNA结合的物质；2）配制PCR反应体系，进行数字PCR反应；所述PCR反应体系中含有所述PCR扩增模板、细菌通用引物对、荧光染料、dNTP和DNA聚合酶；3）根据反应产生的荧光信号，计算所述待测液体食品中的菌落总数。本方法无需对食品中细菌进行分离培养，检测时间缩短至2-3小时；同时大大减少了背景DNA和基质的干扰，灵敏度低至1个拷贝；而且该方法无需设置标准曲线，根据结果可直接判读样品中的菌落总数，大大简化了操作步骤
一种利用数字 pcr 检测食品菌落总数方法

[发明专利]一种双歧杆菌受体细胞的电转化方法及使用的改进液体培养基-CN200810231779.2无效
发明人：丁武;寇莉萍;刘变芳;张静;宋社果 -专利权人：西北农林科技大学
申请日： 2008-10-16 - 公布日： 2010-06-09 - 主分类号： C12N1/20 文献下载
摘要：一种双歧杆菌受体细胞的电转化方法，包括将双歧杆菌细胞处理成双歧杆菌感受态细胞、将双歧杆菌感受态细胞进行电转化前处理以及双歧杆菌感受态细胞电转化步骤。本发明采用独特的感受态细胞处理方法，并增加了感受态细胞电转化前处理，大大提高了双歧杆菌受体细胞成功电转化的几率，而且电转化的效率也有很大提高，可以达到每微克有105以上的转化菌落。
一种杆菌受体细胞转化方法使用改进液体培养基

[发明专利]一种乳杆菌及其应用-CN201710924630.1有效
发明人：朱作华;彭源德;石志刚;肖坤成;龚文兵;谢纯良;杨山河;胡镇修 -专利权人：中国农业科学院麻类研究所;花垣县天乐福农业科技有限责任公司
申请日： 2017-09-30 - 公布日： 2019-12-06 - 主分类号： C12N1/20 文献下载
摘要：所述乳杆菌菌株的菌落特征为：MRS琼脂平板，菌落乳白色，圆形，菌落直径为2mm±1mm，微凸起，湿润，边缘整齐，细胞形状为杆状，适宜生长温度25℃~35℃，为兼性厌氧型菌株。
一种杆菌及其应用

[发明专利]一种高通量筛选谷氨酸高产菌株的方法-CN201010018137.1无效
发明人：郑璞;孙志浩;杜巧燕 -专利权人：江南大学
申请日： 2010-01-12 - 公布日： 2010-06-16 - 主分类号： C12N1/20 文献下载
摘要：传统的筛选方法是从平板上挑取单菌落，然后通过试管或小摇瓶发酵初筛，再进行摇瓶发酵复筛。本发明对传统的筛选进行了改良，根据高产谷氨酸菌株的特点，在平板上挑取单菌落，用微孔细胞培养板进行初筛，摇瓶发酵复筛。本发明方法有效地增加了每次筛选的菌落数量，降低筛选工作强度，提高了整个筛选工作的效率。
一种通量筛选谷氨酸高产菌株方法

[发明专利]大肠杆菌细胞的制备方法-CN201310525800.0无效
发明人：徐丽 -专利权人：徐丽
申请日： 2013-10-31 - 公布日： 2014-02-26 - 主分类号： C12N1/20 文献下载
摘要：本发明公开了大肠杆菌细胞的制备方法。步骤如下：首选挑选合适的细胞菌落，然后将DH5平板划线，在35摄氏度环境下过夜；其后将菌落接种于菌液中，并导入离心管中；随后在35摄氏度的培养箱中过夜；加入10%琼脂；250rpm摇床过夜；加入100ml
大肠杆菌细胞制备方法

[发明专利]一种免疫细胞培养方法及其应用-CN201810428733.3在审
发明人：徐智峰;张新 -专利权人：广州沙艾生物科技有限公司
申请日： 2018-05-07 - 公布日： 2018-11-06 - 主分类号： C12N5/0786 文献下载
摘要：本发明具体公开了一种免疫细胞培养方法，包括以下步骤：S1.分离单个核细胞；S2.血浆的分离与灭活；S3.免疫细胞的体外诱导培养；S4.细胞活性分析及表型分析。本发明的免疫细胞培养方法步骤简单，培养效率较高，有利于临床上大量开展免疫细胞应用试验或者免疫细胞临床使用。实验表明通过本发明的免疫细胞培养方法，其培养过程免疫细胞的生长速度快，增值率高，细胞形成的菌落更加大，有利于提高免疫细胞的培养效率，在免疫细胞的临床上有较为可观的应用前景。
免疫细胞免疫细胞培养单个核细胞表型分析体外诱导细胞活性细胞形成应用试验菌落灭活血浆应用生长分析

[发明专利]GM-CSF变体和使用方法-CN201780035659.2有效
发明人： T.鲁特科斯基;A.特普利亚科夫;N.旺德勒 -专利权人：詹森生物科技公司
申请日： 2017-06-07 - 公布日： 2021-07-20 - 主分类号： A61K45/00 文献下载
摘要：本发明公开了粒细胞‑巨噬细胞菌落刺激因子(GM‑CSF)变体，编码GM‑CSF变体的多核苷酸，以及制备和使用GM‑CSF变体以用于治疗免疫相关失调(诸如炎性肠病(IBD))的方法。
gm csf 变体使用方法

[发明专利]药物制剂包装材料和药物制剂容器-CN201410384299.5有效
发明人：加贺顺二;寺尾敏光 -专利权人：株式会社大冢制药工场
申请日： 2014-08-06 - 公布日： 2019-04-05 - 主分类号： C08L23/08 文献下载
摘要：本发明涉及的药物制剂包装材料由聚烯烃形成，细胞毒性试验的菌落形成率为0.95以上。
药物制剂药物制剂容器细胞毒性试验菌落形成聚烯烃

[发明专利]一种敲除杆状杆粒病毒必需基因的方法-CN202110502748.1有效
发明人：苏武杰;李兵 -专利权人：苏州大学
申请日： 2021-05-09 - 公布日： 2023-03-24 - 主分类号： C12N7/01 文献下载
摘要：本发明公开了一种敲除杆状病毒必需基因的方法，具体包括以下步骤将转移载体和改造的杆状病毒杆粒在家蚕细胞中进行同源重组和纯化，并抽提DNA，再转化大肠杆菌感受态，挑取菌落做菌液PCR，得到含有中间敲除株的菌株，然后将中间敲除株病毒与未经改造的杆粒病毒共感染家蚕细胞进行同源重组并抽提DNA，再转化大肠杆菌感受态，挑取蓝色菌落做菌液PCR，得到含有必需基因敲除的杆粒的菌株，实现杆状病毒必需基因的敲除。本发明无需特定的细胞或者细菌系统，省时省力，可以节省资金投入，而且无需特殊设备，操作简单，易于上手，可以应用于其它杆状病毒必需基因的敲除，具有广阔的应用前景。
一种杆状病毒必需基因方法

[实用新型]一种分离式细胞培养装置-CN202021806645.1有效
发明人：李咏梅 -专利权人：江西善行生物科技有限公司
申请日： 2020-08-25 - 公布日： 2021-07-20 - 主分类号： C12M3/00 文献下载
摘要：本实用新型公开了一种分离式细胞培养装置，属于细胞培养领域。一种分离式细胞培养装置，包括固定座，所述固定座顶面中部开设有放置槽，所述放置槽内设有培养皿，所述放置槽前侧中部开设有与其连通的活动槽，所述活动槽内转动连接有旋转板，所述滑动杆后端通过销轴转动连接有呈倾斜结构的转动杆通过设置的旋转板配合设置的放大镜，一方面能够对培养皿进行稳定的夹持，避免在移动中培养皿的晃动，对养成的菌落造成破坏，同时结合设置的放大镜能够实现对菌落的观察。
一种分离细胞培养装置

[发明专利]一种乳酸克鲁维酵母菌及其分离和培养方法-CN202210386801.0在审
发明人：王佳勇;刘建忠;姚奕 -专利权人：中义（北京）健康研究院
申请日： 2022-04-14 - 公布日： 2022-05-10 - 主分类号： C12N1/14 文献下载
摘要：本发明公开的乳酸克鲁维酵母菌菌落形态规则，大而厚，卵圆状，湿润略干燥，菌落质地均匀，容易挑起，有发酵香气水果香气，细胞形态为球形或橄榄形。
一种乳酸克鲁酵母菌及其分离培养方法