本发明属于生物医药技术领域,特别涉及一种同时检测EGFR多种顺式反式突变组合的引物探针序列组合、试剂盒、方法及应用。所述引物探针序列组合包括SEQ ID NO:1‑SEQ ID NO:5序列;SEQ ID NO:1和SEQ ID NO:2为扩增引物对,SEQ ID NO:1为扩增上游引物,SEQ ID NO:2为扩增下游引物;所述扩增引物能特异性扩增包含EGFR 790‑797的片段,且所述引物中的下游引物与所述796‑797野生型特异性Blocker存在至少3个重叠序列;SEQ ID NO:3为790突变型探针,SEQ ID NO:4为790野生型探针;SEQ ID NO:5为796‑797特异性阻遏Blocker。
本发明涉及一种环状RNA hsa_circ_0059707及其特异性扩增引物,所述环状RNA对应的cDNA核苷酸序列如SEQ ID NO:1所示,所述特异性扩增引物包括上游引物和下游引物,其中,所述上游引物的核苷酸序列如SEQ ID NO:2所示,所述下游引物的核苷酸序列如SEQ ID NO:3所示。
本发明涉及一种环状RNA hsa_circ_0059706及其特异性扩增引物,所述环状RNA对应的cDNA核苷酸序列如SEQ ID NO:1所示,所述特异性扩增引物包括上游引物和下游引物,其中,所述上游引物的核苷酸序列如SEQ ID NO:2所示,所述下游引物的核苷酸序列如SEQ ID NO:3所示。
本发明涉及一种MUT基因突变检测试剂盒,所述检测试剂盒包含:12对MUT基因特异性扩增引物、7条MUT基因特异性探针和1条MUT基因野生序列封阻探针;所述12对MUT基因特异性扩增引物的序列分别如SEQID NO.1‑SEQ ID NO.24所示;所述7条MUT基因特异性探针的序列分别如SEQ ID NO.25‑SEQ ID NO.31所示;所述MUT基因野生序列封阻探针的序列如SEQ ID NO.32
本发明属于海藻分子遗传学领域,涉及一种浒苔性别特异分子标记及其应用。其特征是:浒苔雌配子体和雄配子体DNA特异性分子标记各一个,其核苷酸序列分别为SEQ ID NO.1和SEQ ID NO.2。SEQ ID NO.1由浒苔雌性性别特异扩增引物扩增得到,SEQ ID NO.2由浒苔雄性性别特异扩增引物扩增得到。本发明是通过PCR检测上述的特异性片段来完成,步骤包括待检测浒苔基因组DNA提取,PCR扩增,扩增产物的琼脂糖凝胶电泳检测。该特异性引物设计参考实验室已有高通量数据结果,结合基因组DNA提取,目的片段扩增及回收,利用pGEM‑T vector及大肠杆菌感受态菌株TOP10进行克隆等技术获得。利用该特异性分子标记,可以快速、简单、准确地对大量浒苔藻体的倍性以及配子体的性别进行鉴定,为浒苔生活史研究以及品种选育提供重要的分子工具。