本发明涉及两种沼水蛙抗菌肽的序列、制备方法及其应用。本发明从沼水蛙皮肤分泌物中分离出两种抗菌肽,对其抗菌和溶血活性进行了检测,并对其在模拟膜环境下的二级结构进行了研究。得到2条抗菌肽:抗菌肽A,其氨基酸序列如SEQ ID NO.1所述;抗菌肽B,其序列如SEQ ID NO.2所述。本发明所述抗菌肽A对金黄色葡萄球菌、大肠杆菌和枯草芽孢杆菌都有抑制作用,抗菌肽B对枯草芽孢杆菌和大金黄色葡萄球菌杀灭效果很好。本发明所涉及的两种抗菌肽具有结构新颖、抗菌活力强等特点,在药物开发和应用方面具有重要价值。本发明对于抗菌肽抑菌机制的研究和抗菌肽的进一步改造和开发利用具有重要的意义。
本发明公开了一组具协同效应的抗菌肽,所述抗菌肽选自下述序列中的任一个氨基酸序列:SEQ ID N33、SEQ ID N35。本发明所述的抗菌肽,兼具高协同效应与高效广谱抑菌作用;本发明所述的抗菌肽高效、低毒;与抗生素联用可形成更加高效的抗菌组合物,部分组合物可令抗生素用量减少128倍。本发明所述的抗菌肽及由上述抗菌肽得到的抗菌肽‑抗生素组合物,在抗菌剂、防腐剂、饲料添加剂中有潜力应用。
本发明公开了一种抗菌肽BMAPM及其表达方法和应用,属于生物医药领域。本发明以牛源Cathelicidins家族的抗菌肽为出发序列,通过人工设计螺旋结构氨基酸序列获得抗菌肽BMAPM,其氨基酸序列如SEQ ID NO.1所示,其杀菌能力与天然抗菌肽相比大大提高。本发明制备抗菌肽BMAPM方法是以酵母为表达宿主,通过在其C端融合荧光蛋白,并通过简并引物随机突变抗菌肽的N端序列,再由流式细胞仪分选荧光强度高的突变株,即筛选抗菌肽高表达的突变株。本发明为高效表达和检测抗菌肽提供了新的方式。