本发明提供了一种植物来源的磷酸甘露糖异构酶基因OsPMI1,该磷酸甘露糖异构酶基因OsPMI1的核苷酸序列如SEQ ID NO:1所示。本发明还提供一种含有OsPMI1的原核表达载体。本发明还提供一种磷酸甘露糖异构酶的酶活分析方法。并且本发明提供一种含有OsPMI1的表达盒和一种植物表达载体,以及该表达盒和表达载体在植物遗传转化方面的应用。本发明成功分离和克隆出植物来源的磷酸甘露糖异构酶基因,由于该磷酸甘露糖异构酶基因来源于植物(水稻),对人类没有潜在危险。可以用于替代来自大肠杆菌的磷酸甘露糖异构酶,从而降低潜在的安全风险。
本发明涉及一种具有较高热稳定性的D‑阿洛酮糖3‑差向异构酶及其突变体A13S/V235I以及编码基因,以及在微生物催化D‑果糖异构化制备D‑阿洛酮糖中的应用,解决了目前D‑阿洛酮糖3‑差向异构酶在工业生产中热稳定性差的技术问题所述D‑阿洛酮糖3‑差向异构酶氨基酸序列如SEQ ID NO.2所示,所述D‑阿洛酮糖3‑差向异构酶突变体由SEQ ID NO.2所示氨基酸经定点突变而得。本发明有益效果主要体现在:本发明提供了一种全新的热稳定性提高的D‑阿洛酮糖3‑差向异构酶及其突变体,该突变体具有高最适反应温度70℃,解决了现有酶无法在高温生产或其在高温下迅速失活的阻碍制备D‑psicose热稳定性优于原始酶和其他突变酶,具有较好工业应用前景。
本发明公开了一种L‑阿拉伯糖异构酶及其在L‑核酮糖生产中的应用,本发明还公开了编码上述L‑阿拉伯糖异构酶的基因序列SEQ ID NO:1,以及包含了上述L‑阿拉伯糖异构酶的基因工程菌及其构建方法以及上述L‑阿拉伯糖异构酶和其基因工程菌在生产L‑核酮糖中的应用。该L‑阿拉伯糖异构酶在温度20~70℃、pH 5.0~10.0之间对L‑阿拉伯糖有着较高的催化效率,且低浓度的Mn2+和Co2+等离子的存在可大幅提升该酶的活力和热稳定性在最适催化条件下,该酶对L‑阿拉伯糖的转化率可达95%以上,该L‑阿拉伯糖异构酶对于L‑核酮糖的生物法生产具有十分重要的意义和经济价值。
本公开涉及一种具有改良的己糖醛酸酯C4‑差向异构酶转化活性的己糖醛酸酯C4‑差向异构酶变异体、编码所述糖醛酸酯C4‑差向异构酶变异体的核酸、包括所述核酸的转化体和用于制造D‑塔格糖的组合物和方法。在己糖醛酸酯C4‑差向异构酶变异体中,由氨基酸序列SEQ ID NO:1组成的己糖醛酸酯C4‑差向异构酶(Hexuronate C4‑epimerase)的N端在位置185处的丝氨酸(S)氨基酸残基发生突变