本发明属于应用环境微生物和农业领域,公开了一个龙胆酸双加氧酶及其编码基因和应用。一种龙胆酸双加氧酶基因dsmD,其核苷酸序列为SEQ ID NO.1,全长1053bp,编码350个氨基酸,其氨基酸序列为SEQ ID NO.2。龙胆酸双加氧酶基因是首个公开能降解麦草畏中间代谢产物3‑氯龙胆酸的基因,它编码的蛋白能将龙胆酸和3‑氯龙胆酸开环降解。本发明提供的龙胆酸双加氧酶能在30min内降解100mg/l的龙胆酸和3‑氯龙胆酸。因此,龙胆酸双加氧酶基因dsmD在构建降解麦草畏转基因作物中应用潜能巨大,龙胆酸双加氧酶蛋白DsmD在降解麦草畏以及苯环类物质中应用前景很好。
本发明公开了一种桑树类胡萝卜素裂解双加氧酶基因及其原核表达,该基因为首次分离得到桑树类胡萝卜素裂解双加氧酶基因,对研究类胡萝卜素裂解双加氧酶基因的功能以及裂解产物奠定基础。本发明所提供的桑树类胡萝卜素裂解双加氧酶基因如SEQ IDNO.1或SEQ ID NO.2或SEQ ID NO.3或SEQ ID NO.4或SEQ ID NO.5或SEQ ID NO.6所示的核苷酸序列或者添加、取代、插入或缺失一个或多个核苷酸的同源序列或其等位基因及其衍生的核苷酸序列。本发明提供的桑树类胡萝卜素裂解双加氧酶基因的原核表达为首次通过原核表达的方式成功得到桑树类胡萝卜素裂解双加氧酶蛋白的方法。
本发明公开了角度双加氧酶基因dpeA1A2及其应用。一种角度双加氧酶基因dpeA1A2,其由SEQ ID NO.1所示的大小为1383bp的角度双加氧酶大亚基编码基因dpeA1、SEQ ID NO.2所示的大小为561bp的角度双加氧酶小亚基编码基因dpeA2因此角度双加氧酶基因dpeA1A2在构建降解二苯醚或2‑苯氧基苯甲酸转基因作物中应用。DpeA1A2BC全酶在降解二苯醚和2‑PBA中应用。
本发明公开了对芳氧苯氧丙酸类除草剂中间体具有手性选择性的双加氧酶Snpd及其编码基因和应用。一种具有立体选择性的双加氧基因snpd,核苷酸序列为:SEQ ID NO.1,其编码的双加氧酶Snpd,氨基酸序列为:SEQ ID NO.2。本发明通过全基因组测序和基因比对方法成功克隆到一个α‑酮戊二酸依赖型手性选择性双加氧酶基因snpd,该基因是首个公开的能降解S‑2‑(1‑萘氧基)丙酸及S‑2‑(2,4‑二氯苯氧基)丙酸、S‑2‑(4‑羟基苯氧基)丙酸和除草剂2,4‑二氯苯氧乙酸中间体的双加氧酶,对生产高光学纯的R型除草剂具有非常重要的理论价值和应用前景。
玉米9‑顺‑环氧类胡萝卜素双加氧酶蛋白基因ZmVP14及应用属分子生物学和生物技术领域,ZmVP14的核苷酸序列如SEQ ID NO:1所示;一种耐冷玉米自交系9‑顺‑环氧类胡萝卜素双加氧酶蛋白,由ZmVP14基因编码,其氨基酸序列如SEQ ID NO:2所示;一种植物表达载体,含有耐冷玉米自交系W98169‑顺‑环氧类胡萝卜素双加氧酶蛋白基因ZmVP14;构建了植物表达载体并转化拟南芥,通过低温胁迫后观测转基因拟南芥的表型、根长、萌发率等生命状态,结果显示耐冷玉米自交系W98169‑顺‑环氧类胡萝卜素双加氧酶蛋白基因ZmVP14可提高拟南芥的耐冷性。