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[发明专利]一种嗜热中性蛋白酶基因、工程菌、酶及其应用-CN201710396332.X在审
发明人：解桂秋;高仁钧;李杏杏;宗利;霍锐;陈曼利 -专利权人：吉林大学
申请日： 2017-05-24 - 公布日： 2017-09-15 - 主分类号： C12N9/52 文献下载
摘要：一种嗜热中性蛋白酶基因、生产该嗜热中性蛋白酶的工程菌JD‑TP(大肠埃希氏菌Escherichia coli)、利用该基因工程菌发酵生产的嗜热中性蛋白酶、自催化剪切后获得的成熟的嗜热中性蛋白酶、该嗜热中性蛋白酶及成熟的嗜热中性蛋白酶在降解蛋白质中的应用本发明通过PCR从嗜热细菌Thermus thermophilus HB8基因组中扩增得到嗜热中性蛋白酶基因，将其连入表达载体，在大肠杆菌中成功表达；嗜热中性蛋白酶的最适反应温度85℃，在85℃的半衰期为8d，成熟的嗜热中性蛋白酶的最适反应温度为75℃；嗜热中性蛋白酶的最适pH为7.5至10.0，成熟的嗜热中性蛋白酶最适反应pH为6.5；嗜热中性蛋白酶和成熟的嗜热中性蛋白酶有很高的最适反应温度、热稳定性和较宽的反应
一种中性蛋白酶基因工程及其应用

[发明专利]一种中性蛋白酶及其基因和应用-CN201710537024.4在审
发明人：吴培均;李富伟;张士彬;罗建杰 -专利权人：北京科为博生物科技有限公司
申请日： 2017-07-04 - 公布日： 2017-09-26 - 主分类号： C12N9/56 文献下载
摘要：本发明属于生物工程领域，具体地，本发明涉及一种中性蛋白酶及其基因和应用。本发明的中性蛋白酶，其氨基酸序列如SEQ ID NO.1所示。本发明的中性蛋白酶基因，其碱基序列如SEQ ID NO.2所示。本发明还提供了包含所述中性蛋白酶基因的重组载体，以及包含所述中性蛋白酶基因的重组菌株。本发明运用基因工程技术构建了含有中性蛋白酶基因的重组质粒，并在解淀粉芽孢杆菌中实现了中性蛋白酶的高效表达。构建的中性蛋白酶重组菌株具有较高的应用价值，具有很高的产中性蛋白酶的能力，发酵液中酶活可达到9000U/ml。
一种中性蛋白酶及其基因应用

[发明专利]分步水解大豆分离蛋白制备外啡肽的方法-CN201010137676.7无效
发明人：石彦国;孙冰玉;胡春林;林宇红 -专利权人：哈尔滨商业大学
申请日： 2010-04-01 - 公布日： 2010-07-07 - 主分类号： C12P21/02 文献下载
摘要：分步水解大豆分离蛋白制备外啡肽的方法，它涉及一种制备外啡肽的方法。本发明解决了现有的外啡肽制备方法成本高、制备过程中容易产生有害物质的问题。方法一：胃蛋白酶水解后用胰蛋白酶、酸性蛋白酶、碱性蛋白酶或中性蛋白酶进行水解；方法二：胰蛋白酶水解后用胃蛋白酶、酸性蛋白酶、碱性蛋白酶或中性蛋白酶进行水解；方法三：碱性蛋白酶水解后用胃蛋白酶、胰蛋白酶、酸性蛋白酶或中性蛋白酶进行水解；方法四：中性蛋白酶水解后用胃蛋白酶、胰蛋白酶、酸性蛋白酶或碱性蛋白酶进行水解；方法五：酸性蛋白酶水解后用胃蛋白酶、胰蛋白酶、碱性蛋白酶或中性蛋白酶。
分步水解大豆分离蛋白制备外啡肽方法

[发明专利]中性蛋白酶在烧伤领域的新用途-CN03111955.7无效
发明人：赵玉山;苗得足;任正伟;李广;段祥勇 -专利权人：山东瑞阳制药有限公司
申请日： 2003-03-07 - 公布日： 2003-09-10 - 主分类号： A61K38/48 文献下载
摘要：本发明提供的是一种关于中性蛋白酶的新用途，将中性蛋白酶作为制备治疗烧伤疤痕药的应用，优选的应用方式为中性蛋白酶口服肠溶片。中性蛋白酶可以用于预防和治疗烧伤、烫伤疤痕，对其它软组织创伤、疮伤、刀伤等产生的疤痕也有不同程度的疗效。中性蛋白酶肠溶片应用方便，副作用小，效果好。
中性蛋白酶烧伤领域用途

[发明专利]中性蛋白酶在烧伤领域的用途-CN200510042210.8无效
发明人：赵玉山;何茂群;任正伟;李广;王子伟;段祥永 -专利权人：山东瑞阳制药有限公司
申请日： 2005-03-21 - 公布日： 2006-09-27 - 主分类号： A61K38/48 文献下载
摘要：本发明提供的是一种关于中性蛋白酶的新用途，将中性蛋白酶作为制备治疗烧伤疤痕外用药的应用，优选的应用方式为制成中性蛋白酶外敷制剂。中性蛋白酶可以用于预防和治疗烧伤、烫伤疤痕，对其它软组织创伤、疮伤、刀伤等产生的疤痕也有不同程度的疗效。中性蛋白酶外用制剂应用方便，副作用小，效果好。
中性蛋白酶烧伤领域用途

[发明专利]米曲霉LCCC30141在生产中性蛋白酶和烟叶发酵中的应用-CN201910912449.8在审
发明人：叶亚军;张庆华;田数;赵新海;陈晨;陈飞;张永岗;于宏男;刘月明;王旭东;李力群;乔月梅 -专利权人：内蒙古昆明卷烟有限责任公司
申请日： 2019-09-25 - 公布日： 2020-01-17 - 主分类号： C12N9/62 文献下载
摘要：本发明提供了一种米曲霉(Aspergillus oryzae)LCCC30141在生产中性蛋白酶和烟叶发酵中的应用，米曲霉(Aspergillus oryzae)LCCC30141能够产生高酶活性的中性蛋白酶，利用米曲霉(Aspergillus oryzae)LCCC30141生产中性蛋白酶，为中性蛋白酶的生产来源提供了一个新的途径，可以实现中性蛋白酶的规模化生产；将具有产高酶活力的中性蛋白酶的米曲霉应用到烟叶发酵中，能够加速烟叶中蛋白质的分解，明显缩短烟叶的发酵周期，提升烟叶的品质。
中性蛋白酶米曲霉烟叶发酵烟叶规模化生产发酵周期高酶活力加速烟叶高酶生产蛋白质应用分解

[发明专利]家蚕肠道内中性蛋白酶产酶菌株、其中性蛋白酶基因和原核表达载体及制备方法-CN201110440214.7无效
发明人：刘朝良;王在贵;杨文静;朱保建;魏国清;李大辉;刘金阳 -专利权人：安徽农业大学
申请日： 2011-12-19 - 公布日： 2012-07-04 - 主分类号： C12N1/20 文献下载
摘要：本发明家蚕肠道内中性蛋白酶产酶菌株、其中性蛋白酶基因和原核表达载体及制备方法，属于基因工程技术领域。所述家蚕肠道内中性蛋白酶产酶菌株是对家蚕肠道内菌体进行富集培养，用NA酪蛋白筛选培养基进行筛选获得的。同时通过基因工程技术对菌株的DNA进行扩增、筛选得到中性蛋白酶基因，将该中性蛋白酶基因连接入pET-28(a+)构建了原核表达载体pET28a-npr。本发明筛选出的家蚕肠道内中性蛋白酶产酶菌株及其所产蛋白酶，属于动物饲料级微生物与酶制剂，具有较强的应用前景。
家蚕肠道中性蛋白酶菌株基因表达载体制备方法

[发明专利]一株高产中性蛋白酶的米曲霉菌株及其液体发酵方法-CN201210559100.9有效
发明人：刘顺启;王兴吉;李方方;刘文龙 -专利权人：山东隆科特酶制剂有限公司
申请日： 2012-12-20 - 公布日： 2013-04-03 - 主分类号： C12N1/15 文献下载
摘要：本发明涉及一株高产中性蛋白酶的米曲霉突变株及其液体发酵方法，所述米曲霉菌株所产中性蛋白酶酶活力在20821u/mL以上。米曲霉突变菌株CGMCC 6848液体发酵产中性蛋白酶的方法，包括如下步骤：1.种子培养；2.液体发酵；3.中性蛋白酶的提取与精制。本发明建立的液体发酵中性蛋白酶的方法，发酵活力在2.5万u/ml，生产的中性蛋白酶在40℃保温1h后剩余酶活为91％，具有良好的耐热性，可广泛应用于食品、饲料、纺织等行业。
高产中性蛋白酶曲霉菌株及其液体发酵方法

[发明专利]一种大豆肽清洁生产用酶制剂-CN201810794769.3在审
发明人：孙丽媛;孙绪春;孙文静;李芳 -专利权人：山东瑞芝生物科技有限公司
申请日： 2018-07-19 - 公布日： 2019-01-29 - 主分类号： C12N9/50 文献下载
摘要：本发明公开了一种大豆肽清洁生产用酶制剂，按照质量百分比计，由以下组分配制而成：碱性蛋白酶39.2‑40%,酶活80000u/g；风味蛋白酶25.2‑25.6%,酶活127LAPu/g；中性蛋白酶34.8‑35.2%,酶活35000u/g，其中碱性蛋白酶、风味蛋白酶和中性蛋白酶的载体均采用精制硅藻土。本发明由碱性蛋白酶、风味蛋白酶和中性蛋白酶按照对应的质量比例进行配置而成，另外碱性蛋白酶、风味蛋白酶和中性蛋白酶的载体均采用精制硅藻土，极大的降低了大豆肽的生产成本、灰度含量和色度。
风味蛋白酶碱性蛋白酶中性蛋白酶大豆肽酶活硅藻土酶制剂精制质量百分比组分配制灰度色度生产成本配置

[发明专利]一种产中性蛋白酶的解淀粉芽孢杆菌CYSZG-3及其应用-CN202210730426.7在审
发明人：马鑫;董红红;李希;曹轶乐;蔡振山 -专利权人：深圳市长隆科技有限公司
申请日： 2022-06-24 - 公布日： 2022-09-23 - 主分类号： C12N1/20 文献下载
摘要：一种产中性蛋白酶的解淀粉芽孢杆菌(Bacillus amyloliquefaciens)CYSZG‑3及其应用，本发明属于生物工程领域，为克服目前酶制剂领域的产酶菌种种类的不足，本发明提供一种解淀粉芽孢杆菌(Bacillus amyloliquefaciens)CYSZG‑3，该解淀粉芽孢杆菌(Bacillus amyloliquefaciens)CYSZG‑3可通过发酵工艺生产中性蛋白酶，直接发酵液的酶产量约为一种中性蛋白酶生产菌种(解淀粉芽孢杆菌，Bacillus amyloliquefaciens)及其应用，本发明属于酶制剂生产领域，为了克服中性蛋白酶生产领域菌种种质资源的短缺，降低中性蛋白酶的生产成本，本发明提供一种中性蛋白酶生产菌种。通过控制培养基配方和发酵条件，可以使用该菌种生产中性蛋白酶，直接发酵液的酶产量为270U/mL。
一种中性蛋白酶淀粉芽孢杆菌 cyszg 及其应用

[发明专利]中性蛋白酶NPR表达和纯化的方法-CN201010609977.5无效
发明人：贾如;刘希;龚俊 -专利权人：北京九强生物技术股份有限公司
申请日： 2010-12-28 - 公布日： 2011-08-31 - 主分类号： C12N9/50 文献下载
摘要：本发明涉及中性蛋白酶NPR表达和纯化的方法。研究发现对pET系列的载体进行修饰并表达中性蛋白酶的全长基因可获得良好的表达效果。因此，本发明提供一种中性蛋白酶的表达方法，包括：a)通过中性蛋白酶的全长基因与去除T7启动子活性的pET载体构建重组表达质粒，以及b)通过步骤a)构建的重组表达质粒转化大肠杆菌，从而表达中性蛋白酶。本发明的方法可以方便、简单地得到纯的NPR蛋白，简化了NPR的纯化过程。
中性蛋白酶 npr 表达纯化方法

[发明专利]中性蛋白酶在治疗肝炎病方面的新用途-CN03111954.9无效
发明人：赵玉山;苗得足;任正伟;李广;段祥勇 -专利权人：山东瑞阳制药有限公司
申请日： 2003-03-07 - 公布日： 2003-09-10 - 主分类号： A61K38/48 文献下载
摘要：本发明涉及中性蛋白酶的一种新用途，是将中性蛋白酶作为制备治疗肝炎病药的应用，优选的应用方式为中性蛋白酶口服肠溶片。中性蛋白酶对治疗病毒性肝炎有明显疗效，且无毒、无副作用，使用安全，应用方便，可用作治疗病毒性肝炎的新型药物，有广阔的应用前景。
中性蛋白酶治疗肝炎方面用途

[发明专利]复合中性蛋白酶稳定剂及其应用-CN202210642875.6在审
发明人：吴芳彤;曹倩荣;刘春卯;郑翔;秦梦;王力源;赵露;秦艳梅;马清河 -专利权人：河北省微生物研究所有限公司
申请日： 2022-06-08 - 公布日： 2022-09-27 - 主分类号： C12N9/96 文献下载
摘要：本发明涉及复合蛋白酶稳定剂及其应用，特别是指一种复合中性蛋白酶稳定剂及其应用。采用有效量的Na2SO4、蛋白胨、Aprotinin制成复合中性蛋白酶稳定剂。本发明解决了现有技术中存在的对中性蛋白酶JW‑3酶活保存率低等问题。具有原料来源及制备简单易行，应用于中性蛋白酶JW‑3后酶活保存率显著优于现有产品及文献报道等优点。
复合中性蛋白酶稳定剂及其应用

[发明专利]中性蛋白酶基因、中性蛋白酶及其制备方法和应用-CN202010619037.8有效
发明人：王建荣;祝木金;余思;王平;孟建军;刘小慧;曹革 -专利权人：深圳润康生态环境股份有限公司
申请日： 2020-07-01 - 公布日： 2022-09-09 - 主分类号： C12N9/50 文献下载
摘要：本发明属于基因工程技术领域，具体涉及一种中性蛋白酶基因、中性蛋白酶及其制备方法和应用。本发明中性蛋白酶基因的核苷酸序列如SEQ ID NO:1所示，其编码的氨基酸序列如SEQ ID NO:2所示。本发明通过将中性蛋白酶Np的第422位氨基酸和第433位氨基酸突变为半胱氨酸，可以形成二硫键，使所得中性蛋白酶的热稳定性得到显著提升，具有更广泛的应用前景。
中性蛋白酶基因及其制备方法应用

[发明专利]一种液体中性蛋白酶和木瓜蛋白酶的复合防腐剂-CN201010291310.5无效
发明人：吴鹏;郭峰;刘金花;王刚;幸芬;刘宝龙;赵岩;马清真;宋宵因;赵路 -专利权人：吴鹏;郭峰
申请日： 2010-09-26 - 公布日： 2011-02-16 - 主分类号： C12N9/96 文献下载
摘要：本发明涉及一种液体中性蛋白酶和木瓜蛋白酶的复合防腐剂，其构成组分及重量份数分别为：硼砂0.5-1；甘油0.5-1；乙二醇0.5-1；硫酸镁0.01-0.05；复合氨基酸0.5-1；将上述各组分充分溶解、混合后，即可制得一种液体中性蛋白酶和木瓜蛋白酶的防腐剂成品。本发明制备方法简单，成分合理，成本低廉液体中性蛋白酶和木瓜蛋白酶稳定性强(在25℃恒温保存3个月，酶活仍然在90％以上)，此方法是是一种高效的液体中性蛋白酶和木瓜蛋白酶的防腐剂，对目前高活力液体中性蛋白酶和木瓜蛋白酶制剂的产业化具有重大意义
一种液体中性蛋白酶木瓜蛋白酶复合防腐剂

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