[发明专利]重组猪肠病毒G型VP2、VP3蛋白多克隆抗体及间接ELISA检测方法在审
| 申请号： | 202210683692.9 | 申请日： | 2022-06-16 |
| 公开（公告）号： | CN115093467A | 公开（公告）日： | 2022-09-23 |
| 发明（设计）人： | 欧阳康;边金妮;陈樱;韦祖樟;黄伟坚 | 申请（专利权）人： | 广西大学 |
| 主分类号： | C07K14/085 | 分类号： | C07K14/085;C12N15/70;C07K16/10;G01N33/569;G01N33/543 |
| 代理公司： | 广西南宁公平知识产权代理有限公司 45104 | 代理人： | 黄宗全 |
| 地址： | 530004 广西壮族*** | 国省代码： | 广西;45 |
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| 摘要： | 本发明公开了重组猪肠病毒G型VP2、VP3蛋白，分别由序列表SEQ.ID.No.1、SEQ.ID.No.2的基因碱基序列编码或者具有SEQ.ID.No.3、SEQ.ID.No.4的氨基酸序列。据此，还制备了多克隆抗体，同时基于VP2、VP3蛋白建立了两种间接ELISA检测方法。所得重组蛋白具有抗原性好、免疫原性强的特点，ELISA检测方法操作简单，特异性强，重复性好，敏感度高，可用于检测并准确判断猪肠病毒G型的感染情况，应用前景良好。综上，本发明为猪肠病毒G型的流行病学调查提供技术手段，为猪肠病毒G型感染提供新型快速的血清学检测方法。 | ||
| 搜索关键词： | 重组 肠病毒 vp2 vp3 蛋白 克隆 抗体 间接 elisa 检测 方法 | ||
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- 本发明属于免疫生物学领域，涉及一种肠道病毒71型VP1抗原的免疫原性多肽及其制备方法与应用。具体的，涉及一种肠道病毒71型VP1抗原的免疫原性多肽，其具有如序列表中SEQ ID NO.1‑SEQ ID NO.5任一序列所示的氨基酸序列，或上述序列经替换、缺失或添加一个或几个氨基酸形成的具有同等功能的氨基酸序列。本发明还涉及所述免疫原性多肽的制备方法和在制备EV71病毒的诊断试剂中的用途。本发明的免疫原性多肽具有良好的抗原性和免疫原性，为EV71的早期诊断试剂开发和疫苗研发提供了研究基础。
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- 苏彩霞;韩旭东;金贞姬;李逦;江春虎;刘佳璐;王凤鑫 - 众盈生物（青岛）有限公司
- 2021-01-22 - 2021-04-30 - C07K14/085
- 本发明提供了一种肠道病毒EV71型病毒样颗粒、其编码基因、表达载体、重组酵母菌及其制备方法和应用，属于生物免疫技术重组蛋白表达技术领域。在本发明中，所述病毒样颗粒由EV71病毒的P1前体蛋白的四个结构蛋白VP1、VP2、VP3和VP4在酵母细胞内自组装获得。四个结构蛋白经重组酵母载体表达后自动组装为形态均一稳定且具有免疫原性的病毒样颗粒，证明了在P1蛋白的四个结构蛋白VP1、VP2、VP3、VP4单独存在下，EV71病毒样颗粒在酵母细胞内可完全组装，不需要3CD蛋白酶，从而进一步简化了肠道病毒EV71型病毒样颗粒的构建方法。将本发明所述肠道病毒EV71型病毒样颗粒制成疫苗，具有良好的免疫原性。
- 一种塞尼卡谷病毒抗原的纯化方法-202011518274.1
- 田志辉;陈坚;赵冰婕;胡莉红;宋庆庆;赵丽霞;陈九连;齐志涛 - 金宇保灵生物药品有限公司
- 2020-12-21 - 2021-03-12 - C07K14/085
- 本发明公开了一种塞尼卡谷病毒抗原的纯化方法，从塞尼卡谷病毒悬浮培养液中纯化得到塞尼卡谷病毒抗原，包括经离心澄清、超滤浓缩和凝胶过滤层析等步骤。该方法可适用于大规模工业化生产高纯度的SVV抗原。该方法采用切向流过滤和凝胶过滤柱层析相结合的方式对SVV抗原进行纯化，具有操作简单的特点，易于进行工业化大规模生产。该方法可用于活病毒和灭活病毒的分离纯化，抗原回收率80％，蛋白去除率90％，可得到出高纯度的SVV抗原。
- 表达猪塞内加谷病毒VP1蛋白的细胞系、构建方法和应用-202011060872.9
- 董建国;饶丹;何书海;焦凤超;胡静 - 信阳农林学院
- 2020-09-30 - 2021-02-23 - C07K14/085
- 本发明公开了表达猪塞内加谷病毒VP1蛋白的细胞系、构建方法和应用，所述细胞系含有猪塞内加谷病毒VP1基因，并且能够稳定表达猪塞内加谷病毒VP1蛋白，所述构件方法包括设计引物，扩增VP1基因并纯化回收；构建pLV/VP1重组质粒；扩增S2获得重组质粒；将S3获得的重组质粒进行病毒包装，获得含有重组质粒的慢病毒；将S4获得的慢病毒转染PK15细胞系，得到表达猪塞内加谷病毒VP1蛋白的细胞系；该细胞系能够精准的产生大量的VP1蛋白，用于制备猪塞内加谷病毒亚单位疫苗，避免了产生许多无关抗原诱发的抗体，疫苗的副反应小且不易引起相关疾病，具有广阔的应用前景。
- 塞尼卡谷病毒结构蛋白抗原表位多肽及其应用-201910028355.4
- 张蕾;董春娜;肖进;李静;王飞;巴利民;齐鹏 - 中牧实业股份有限公司
- 2017-08-13 - 2021-02-09 - C07K14/085
- 本发明公开了塞尼卡谷病毒结构蛋白抗原表位多肽及其应用。本发明试剂盒包括酶标板、阳性对照血清、阴性对照血清、酶标二抗、样品稀释液、20倍浓缩洗涤液、底物液A、底物液B、终止液，其中所述酶标板包被有塞尼卡谷病毒结构蛋白抗原表位多肽组合物。该抗原表位多肽组合物为序列表中序列1所示的多肽、序列表中序列2、序列表中序列3所示的多肽或序列表中序列4所示的多肽中的一种或两种以上的任意组合。本试剂盒使用化学合成抗原肽包被酶标板，抗原用量少、灵敏性和特异性高，可以高效地检测是否存在感染塞尼卡谷病毒的结构蛋白抗体。本发明试剂盒敏感性高、特异性好、且操作便捷，具有良好的市场前景。
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