本发明公开了一种检测Nebovirus的SYBR Green荧光定量RT‑PCR引物及应用,该引物的序列如SEQ ID NO:1~2所示。该引物可以应用于Nebovirus的快速诊断中,本发明可快速、特异、灵敏地检测Nebovirus,最低检测浓度为29copies/μL。本发明使用的操作方法简单、反应结果易于判断,灵敏性和检出率高,并且能够避免假阳性现象,适用于疾病监测、现场应急及临床样品的检测,适合大范围推广应用。
本发明公开了一种羊源嵴病毒VP1重组蛋白、ELISA检测试剂盒及其制备方法与应用。该羊源嵴病毒VP1重组蛋白的氨基酸序列如SEQ ID NO.1所示。该羊源嵴病毒VP1重组蛋白的制备方法包括:提取羊源嵴病毒核酸后进行扩增后,优化基因序列得到优化核苷酸序列,构建重组原核表达载体、诱导表达及纯化得到。本发明还提供了一种ELISA检测试剂盒,主要包括包被有羊源嵴病毒VP1重组蛋白的ELISA酶标板。本发明羊源嵴病毒VP1重组蛋白特异性高,易纯化制备、成本低,可作为抗原能够简便、快速、准确的检测出待测血液样品中的嵴病毒抗体;本发明ELISA检测试剂盒可以准确测定羊体内抗VP1重组蛋白抗体,可用于疫苗免疫后羊血清抗体的检测以协助判断疫苗的免疫效果。
本发明公开了一种检测猪非典型瘟病毒的荧光定量RT‑PCR引物和探针及方法与应用,该引物和探针的序列如SEQ ID NO:1~3所示。本发明可快速、特异、灵敏地检测猪非典型瘟病毒,最低检测浓度为5copies/μL。本发明使用的操作方法简单、反应结果易于判断,灵敏性和检出率高,并且能够避免假阳性现象,适用于疾病监测、现场应急及临床样品的检测,适合大范围推广应用。
本发明提供一种牛纽布病毒VP1基因、重组蛋白及其应用。所述VP1基因具有SEQ ID NO:1所示的核苷酸序列。所述重组VP1基因蛋白氨基酸序列如SEQ ID NO:2所示。用以上氨基酸序列构建的原核表达系统可以短期内获得大量优良的重组蛋白,同时缩短了重组蛋白的表达时间、提高了重组蛋白的生产效率。用所表达的重组蛋白包被抗原,成功的建立了一种牛纽布病毒抗体的间接ELISA检测方法,并确定该方法的最佳条件,为免疫牛群抗体检测和进行流行病学调查提供了一种快速简便的血清学方法。