[发明专利]一种普鲁兰酶突变体及其应用有效
| 申请号： | 201811426687.X | 申请日： | 2018-11-27 |
| 公开（公告）号： | CN109355276B | 公开（公告）日： | 2020-08-04 |
| 发明（设计）人： | 周哲敏;周丽;闫勤;崔文璟;刘中美;庞博 | 申请（专利权）人： | 江南大学 |
| 主分类号： | C12N9/44 | 分类号： | C12N9/44;C12N15/56;C12N15/70;C12N1/21;C12P19/14;C12P19/04 |
| 代理公司： | 哈尔滨市阳光惠远知识产权代理有限公司 23211 | 代理人： | 张勇 |
| 地址： | 214000 江*** | 国省代码： | 江苏;32 |
| 权利要求书： | 查看更多 | 说明书： | 查看更多 |
| 摘要： | 本发明公开了一种普鲁兰酶突变体及其应用，属于基因工程和酶工程技术领域。本发明构建了一种普鲁兰酶突变体，得到的单突变体K419R(第419位赖氨酸突变为精氨酸)的酶活是野生型的1.3，67℃保温30min剩余酶活达67.3U/mg；迭代突变体K419R+Y102C+K383C(第419位赖氨酸突变为精氨酸，第102位酪氨酸和第383位赖氨酸分别突变为半胱氨酸)的酶活提高为野生型的2倍，在67℃保温30min剩余酶活达88.3U/mg，为保温前的43.1％，具有较好的热稳定性。本发明的普鲁兰酶突变体能够应用于淀粉糖化过程。 | ||
| 搜索关键词： | 一种 普鲁兰酶 突变体 及其 应用 | ||
【主权项】：
1.一种普鲁兰酶突变体，其特征在于，所述酶突变体是通过将出发氨基酸序列为SEQ ID NO.1的普鲁兰酶第419位氨基酸进行突变；或，同时将出发氨基酸序列为SEQ ID NO.1的普鲁兰酶第419位、第102位、第383位氨基酸进行突变。
下载完整专利技术内容需要扣除积分，VIP会员可以免费下载。
该专利技术资料仅供研究查看技术是否侵权等信息，商用须获得专利权人授权。该专利全部权利属于江南大学，未经江南大学许可，擅自商用是侵权行为。如果您想购买此专利、获得商业授权和技术合作，请联系【客服】
本文链接：http://www.vipzhuanli.com/patent/201811426687.X/，转载请声明来源钻瓜专利网。
- 同类专利
- 利用枯草芽孢杆菌发酵制备普鲁兰酶的方法-202310442999.4
- 张立;张成杰;吴菡;张茜茜;詹羿扬;王启军;辜玲芳;王晓亮;张庆丽;袁志超 - 武汉新华扬生物股份有限公司
- 2023-04-24 - 2023-07-18 - C12N9/44
- 本发明提供一种利用枯草芽孢杆菌发酵制备普鲁兰酶的方法，该制备方法依靠菌种活化工艺、初级发酵工艺、补料发酵工艺至特定pH环境结束，可以获得的酶活达550U/mL以上的含普鲁兰酶发酵液。本发明方法在发酵过程通过严格控制pH变化区间，来确认放罐终点，整体上既保证普鲁兰酶的高酶活，同时也为生产提供一种更有时效性的终点判别方法。
- 一种超嗜热II型普鲁兰酶及应用-202111483679.0
- 周哲敏;周丽;谢婷;韩来闯;崔文璟;刘中美;程中一;郭军玲 - 江南大学
- 2021-12-07 - 2023-07-18 - C12N9/44
- 本发明公开了一种超嗜热II型普鲁兰酶及应用，属于基因工程技术领域。本发明通过对超嗜热II型普鲁兰酶进行氨基酸突变，获得了超嗜热II型普鲁兰酶突变体Q13H、I25E和Q13H/I25E。本发明获得的突变体催化性能有了很大的提高，且突变体在反应过程中不需要其他金属离子辅助(例如Ca
- 一种具有高分泌能力的普鲁兰酶突变体及其应用-201910650235.8
- 段绪果;朱秋雨;张心怡;沈镇炎;金璐;栾舒越;史洁莹;刘龙 - 南京林业大学
- 2019-07-18 - 2023-05-09 - C12N9/44
- 本发明公开了一种具有高分泌能力的普鲁兰酶突变体及其应用，属于酶工程和微生物工程技术领域。本发明普鲁兰酶突变体胞外分泌能力较野生型有了明显的提高，将携带编码本发明普鲁兰酶突变体PulBd‑306的基因的大肠杆菌摇瓶诱导发酵44h，即可使发酵液上清液中的胞外酶活达38.9U·mL
- 一种采用酶制剂制备黑麦酒的方法及黑麦酒复合酶-202310175893.2
- 王建国;岳军胜;关志洁;王胜伟;王胜雷;王士栋;王玉民;孙素丽;袁安民;贺文中 - 山东一品农夫农业科技有限公司
- 2023-02-28 - 2023-05-02 - C12N9/44
- 本发明提供了一种采用酶制剂制备黑麦酒的方法及黑麦酒复合酶。该黑麦酒复合酶由普鲁兰酶1份～3份、木聚糖酶2.5份～5份、β‑葡萄糖苷酶1份～5份、中性蛋白酶0.1～0.5份和脂肪酶0.05～0.15份组成。普鲁兰酶、木聚糖酶和中性蛋白酶复配，降低糖化液的粘度，促进酵母生长繁殖，提高酵母菌数量，缩短发酵时间，提高淀粉利用率；脂肪酶有助于催化水解发酵过程中产生的酯类化合物，生成酸类和醇类等物质，使酒质协调、促进酒体的芳香味和醇厚感。黑麦酒制备方法中使用适量的α‑淀粉酶和糖化酶进行糊化、糖化，添加酶制剂辅助发酵，减少了生产中酒曲的用量，提高了发酵酒精度，并产生更加丰富的风味物质，提高了黑麦白酒质量。
- 一种稳定性提高的普鲁兰酶突变体及其构建方法-202210987248.6
- 张显;饶志明;王志;胡孟凯;徐美娟 - 江南大学
- 2022-08-17 - 2023-03-31 - C12N9/44
- 本发明公开了一种稳定性提高的普鲁兰酶突变体及其构建方法，属于基因工程和酶工程领域。本发明在高酶活长野芽胞杆菌来源普鲁兰酶的基础上，筛选获得两株单点热稳定性提高的突变菌株D147F，G690M以及一株组合突变体D147F/G690M。且突变体在热稳定显著提高的同时，酶的活性不受影响。本发明中的这些突变体比天然普鲁兰酶更适用于工业生产，具有非常巨大的应用前景和产业价值。
- 一种淀粉降解能力提高的嗜热酸性III型普鲁兰水解酶突变体及其制备方法和应用-202210355246.5
- 曾静;何础阔;袁林;郭建军;侯安伟;聂俊辉 - 江西省科学院微生物研究所（江西省流域生态研究所）
- 2022-04-06 - 2023-03-28 - C12N9/44
- 本发明公开了一种淀粉降解能力提高的嗜热酸性III型普鲁兰水解酶突变体及其制备方法和应用，属于基因工程和酶工程领域。对嗜热酸性III型普鲁兰水解酶TK‑PUL中进化偶联氨基酸残基对K526/L538进行饱和突变，构建相应的饱和突变体文库，通过比较各突变体对可溶性淀粉的酶活力，筛选出针对可溶性淀粉的比酶活力显著提高的III型普鲁兰水解酶突变体Mut(K526N/L538E)。本发明提供的III型普鲁兰水解酶突变体Mut对可溶性淀粉的酶活力由对照(突变前)的54.08U/mg提高到190.47U/mg，提高了2.52倍，更适用于淀粉酶法制糖工业，有利于简化工艺、节约能源。
- 一种提高普鲁兰酶终浓度的发酵液处理方法-201911147726.7
- 祝冬君;德青美朵;王施岚;孙娟娟;沈微;陈献忠;杨海泉;夏媛媛 - 江南大学
- 2019-11-21 - 2023-03-24 - C12N9/44
- 一种提高普鲁兰酶终浓度的发酵液处理方法，属于酶工程和发酵工程技术领域。本发明将处理溶液C与普鲁兰酶发酵上清液混合后保温，超滤浓缩，即得高酶活的普鲁兰酶发酵液。采用本发明方法，在以重组菌解淀粉芽孢杆菌BF7658/pUC980‑
- 一种可降低高级醇含量的复合酶制剂及其应用-202211210836.5
- 伍彦华;朱宝生;邱杰;梁艳玲;蓝彩红;韦丽婷;李逸钊;李振玉;陈麒;程劲芝;赖开平;林一雄 - 广西轻工业科学技术研究院有限公司
- 2022-09-30 - 2022-12-27 - C12N9/44
- 本发明公开了一种可降低高级醇含量的复合酶制剂及其应用，酶制剂的成分含量按每kg原料计为：β‑葡聚糖酶15000‑45000u、普鲁兰酶600‑1800u、Ca
- 一种提高胞内普鲁兰酶提取效率的方法-202010380799.7
- 祝冬君;王施岚;德青美朵;杨梦莲;沈微;陈献忠;杨海泉;夏媛媛 - 江南大学
- 2020-05-08 - 2022-12-02 - C12N9/44
- 一种提高胞内普鲁兰酶提取效率的方法，属于微生物和酶工程技术领域。本发明采用两种特殊试剂对巴斯德毕赤酵母突变株处理，首先将重组巴斯德毕赤酵母突变体GS115/pPICK‑BdP5 WB138与10×试剂D反应，随后在冰水中放置，再加入10×试剂E反应。离心收集细胞后用柠檬酸缓冲液悬浮细胞进行超声波破碎。经过两种试剂处理的细胞经超声波处理6 min就将细胞全部破碎，破碎液中酶活保留在85%以上。使用本发明所提供的方法及专用处理液可以大幅度减少细胞破碎所需要消耗的电力等成本，减少设备占用时间。
- 一种耐热型中性普鲁兰酶的突变体及其应用-202110527128.3
- 聂尧;穆晓清;毕家华 - 宿迁市江南大学产业技术研究院
- 2021-05-14 - 2022-11-29 - C12N9/44
- 本发明公开了一种耐热型中性普鲁兰酶的突变体及其应用，属于基因工程和酶工程技术领域。本发明分别通过对普鲁兰酶的第73位、第135/314位、第135/314/126位和第135/314/126/72位的氨基酸进行突变，得到了4个热稳定性提高、催化效率不变或提高的普鲁兰酶突变体。在70℃下，其半衰期分别是野生型的2.6、1.9、3.3及3.1倍；T
- 一种淀粉普鲁兰酶突变体及其应用-202110205369.6
- 李丹;李晓磊;付雪侠;慕思雨 - 长春大学
- 2021-02-24 - 2022-11-18 - C12N9/44
- 本发明公开一种淀粉普鲁兰酶突变体及其应用，其获得的方法是以来源于古细菌Staphylothermus marinus F1的淀粉普鲁兰酶SmApu亲本酶，将位于第395位的苯丙氨酸或者位于第510位的苯丙氨酸进行突变得到的淀粉普鲁兰酶突变体。本发明的淀粉普鲁兰酶突变体具有水解支链淀粉中的α‑1，6‑糖苷键的活性的同时，完全丧失了水解环糊精活性，在淀粉、环糊精葡萄糖基转移酶的高温反应体系中，加入本发明的淀粉普鲁兰酶突变体，可以使环糊精的总产率提高43％以上。
- 一种普鲁兰酶-202210345524.9
- 王正祥;牛丹丹;田康明 - 天津科技大学
- 2020-12-01 - 2022-10-18 - C12N9/44
- 本发明属于酶工技术程领域，具体涉及普鲁兰酶酶分子的组合定点突变、突变体的筛选与表达制备。本发明以SEQ ID NO.2所示氨基酸的长野芽胞杆菌普鲁兰酶(PulA)为基础，通过定向分子进化，获得最适作用温度得到提高或降低、最适作用pH得到提高或降低、以及异源表达的水平显著提高的普鲁兰酶突变体，由此可改善普鲁兰酶的应用性能并拓展其应用领域，提升普鲁兰酶工业规模下的制造效率。
- 一种具有洗涤剂抗性的普鲁兰酶PulY103B及其应用-202210022264.1
- 韩鹏;吴昕尧;吴永民 - 昆明理工大学
- 2022-01-10 - 2022-09-09 - C12N9/44
- 本发明公开了一种具有洗涤剂抗性的普鲁兰酶PulY103B，其氨基酸序列如SEQ ID NO:1所示，其为Ⅰ型普鲁兰酶，具有洗涤剂抗性，能提高洗涤剂或去污剂的清洗能力，本发明为洗涤剂的增效提供了新的途径，且本发明普鲁兰酶PulY103B制备简单，适用于工业化生产和市场推广应用。
- 普鲁兰酶突变体、工程菌及其应用-202210272672.2
- 王亚军;李树芳;徐沈远;张伟;郑裕国 - 浙江工业大学
- 2022-03-18 - 2022-07-29 - C12N9/44
- 本发明公开了一种普鲁兰酶突变体、工程菌及其应用，所述普鲁兰酶突变体是将SEQ ID NO.1所示氨基酸序列的第365位、第401位、第504位或第499位氨基酸进行单突变或多突变获得的。本发明构建的普鲁兰酶突变体的催化活性、热稳定性与耐酸稳定性均得到了提高，其中突变体PulAR‑A365V‑401C‑H499A‑T504V的催化效率较野生型普鲁兰酶PulAR在pH5.0、6.0，60℃条件下分别提高了6.6倍与9.6倍；在60℃，65℃的半衰期分别比野生型普鲁兰酶提高了2.6和3.1倍，且在pH 4.5与pH 5.0的半衰期分别比野生型普鲁兰酶提高了1.6和1.8倍。
- 一种普鲁兰酶及其应用-202210345517.9
- 王正祥;牛丹丹;田康明 - 天津科技大学
- 2020-12-01 - 2022-07-26 - C12N9/44
- 本发明属于酶工技术程领域，具体涉及普鲁兰酶酶分子的组合定点突变、突变体的筛选与表达制备。本发明以SEQ ID NO.2所示氨基酸的长野芽胞杆菌普鲁兰酶(PulA)为基础，通过定向分子进化，获得最适作用温度得到提高或降低、最适作用pH得到提高或降低、以及异源表达的水平显著提高的普鲁兰酶突变体，由此可改善普鲁兰酶的应用性能并拓展其应用领域，提升普鲁兰酶工业规模下的制造效率。
- 一种普鲁兰酶突变体-202011380782.8
- 牛丹丹;王正祥;田康明;申培立 - 天津科技大学
- 2020-12-01 - 2022-06-07 - C12N9/44
- 本发明属于酶工技术程领域，具体涉及普鲁兰酶酶分子的组合定点突变、突变体的筛选与表达制备。本发明以SEQ ID NO.2所示氨基酸的长野芽胞杆菌普鲁兰酶(PulA)为基础，通过定向分子进化，获得最适作用温度得到提高或降低、最适作用pH得到提高或降低、以及异源表达的水平显著提高的普鲁兰酶突变体，由此可改善普鲁兰酶的应用性能并拓展其应用领域，提升普鲁兰酶工业规模下的制造效率。
- 一种降低环糊精对普鲁兰酶抑制作用的方法-201880007987.6
- 金征宇;柏玉香;李晓晓 - 江南大学
- 2018-07-05 - 2022-05-06 - C12N9/44
- 本发明公开了一种降低环糊精对普鲁兰酶抑制作用的方法，属于基因工程、酶工程或食品科学技术领域。本发明方法通过对普鲁兰酶与环糊精相互作用的关键氨基酸进行理性突变，制得普鲁兰酶突变体，以降低环糊精对普鲁兰酶的抑制作用，从而提高普鲁兰酶水解活力。本发明基于对酶与抑制剂晶体结构解析和不同来源酶的序列比对，找出普鲁兰酶与环糊精相互作用的位点，利用定点突变得到对环糊精敏感性降低的普鲁兰酶突变体，从而提高淀粉原料利用率及环糊精产率。
- α-淀粉酶变体以及对其进行编码的多核苷酸-201480031631.8
- C.安德森 - 诺维信公司
- 2014-06-04 - 2022-03-29 - C12N9/44
- 本发明涉及α‑淀粉酶变体。本发明还涉及编码这些变体的多核苷酸；包含这些多核苷酸的核酸构建体、载体、以及宿主细胞；以及使用这些变体的方法。
- 一种利用印度洋交替单胞菌制备普鲁兰酶的方法-202111021091.3
- 陈颢;何培青;王宗灵 - 自然资源部第一海洋研究所;中国大洋矿产资源研究开发协会;中国大洋事务管理局
- 2021-09-01 - 2022-03-11 - C12N9/44
- 本发明属于食品加工技术领域，提供了一种利用印度洋交替单胞菌制备普鲁兰酶的方法。步骤如下：提取菌株Alteromonas sp.162基因组；扩增获得普鲁兰酶基因并构建重组质粒，以重组质粒为模板，扩增获得普鲁兰酶点变体基因h611Q并构建点突变重组质粒，以点突变体重组质粒为模板，扩增普鲁兰酶叠加突变体基因puld5/h611Q，构建叠加突变体重组质粒；将重组质粒转入大肠杆菌感受态细胞，制备并纯化叠加突变体Puld5/H611Q。其优点：Puld5/H611Q比活力最高达145.2U·mg
- 一种ApuA蛋白抗原多肽及应用-202110857658.4
- 谭美芳;刘文舒;周锐;李海琴;张帆帆;谭佳;吴诚诚 - 江西省农业科学院畜牧兽医研究所
- 2021-07-28 - 2022-03-08 - C12N9/44
- 本发明属于生物医药技术领域，尤其涉及一种ApuA蛋白抗原多肽及应用。本发明通过对猪链球菌ApuA蛋白氨基酸序列的二级结构、亲疏水性和抗原性等进行分析，选择的肽段具有特异性好、免疫原性佳的特点；本发明通过人工合成所述抗原多肽，再与载体蛋白偶联，将偶联物免疫新西兰大白兔制备的兔多克隆抗体，抗体效价较为理想，可特异性识别猪链球菌全蛋白质组中的ApuA蛋白，对猪链球菌胞外或胞内其他6种同源蛋白质没有结合作用。
- 普鲁兰酶制备和存储方法-202111282348.0
- 陈耿鸿;陈武根;黄石桥;袁群;李书文;石团结;游启进;何满春;雷敏;严钦菊 - 湖南康捷生物科技有限公司
- 2021-11-01 - 2022-01-28 - C12N9/44
- 本发明提供一种普鲁兰酶的制备方法，包括以下步骤：制备发酵液，并利用发酵液制备粗酶液；还包括：分离菌株，将分离的菌株进行发酵，获得发酵菌液；将发酵菌液与原料进行发酵，产生发酵物；将发酵物进行压滤后，获得粗酶液对粗酶液进行酶纯化，获得普鲁兰酶液态制品。本发明提供一种普鲁兰酶制备和存储方法，用以实现制备的普鲁兰酶能够耐高温储存，进一步减少储存不当导致其酶活性降低或失活的情况。
- 一种猪链球菌重组蛋白抗原Pul及其应用-202111471013.3
- 谭美芳;张帆帆;杨群;李海琴;曾艳兵;谭佳;方绍培;吴诚诚;饶煜玲 - 江西省农业科学院畜牧兽医研究所
- 2021-12-03 - 2022-01-28 - C12N9/44
- 本发明属于生物技术领域，尤其涉及一种猪链球菌重组蛋白抗原Pul及其应用。本发明通过对猪链球菌ApuA蛋白质氨基酸序列的二级结构、亲疏水性和抗原表位等进行分析，选择评分较高的4个片段作为免疫原，设计特异性引物，PCR扩增目的条带，构建表达载体，诱导4种重组蛋白表达并进行纯化；用4种重组蛋白抗原分别免疫SPF级昆明小鼠制备多克隆抗体，对抗体进行检测，筛选出重组蛋白抗原Pul。所制备的多克隆抗体，对猪链球菌ApuA蛋白没有特异性，能够识别ApuA天然结构。
- 耐热的I型普鲁兰酶的突变体酶及其制备方法与应用-202010715201.5
- 逄晓阳;吕加平;杨洋;芦晶;张书文;李伟勋;朱青;徐琛 - 中国农业科学院农产品加工研究所
- 2020-07-23 - 2021-12-07 - C12N9/44
- 本发明公开了耐热的I型普鲁兰酶的突变体酶，其氨基酸序列如SEQ ID No.1，或如SEQ ID No.2，或SEQ ID No.3，或SEQ ID No.4、或SEQ ID No.5所示。本发明还公开了编码突变体酶的基因，其如SEQ ID No.6，或SEQ ID No.7，或SEQ ID No.8，或SEQ ID No.9、或SEQ ID No.10。本发明还公开了突变体酶的制备方法，包括从普鲁兰酶的氨基酸序列选取突变位点，设计突变引物对；以携带普鲁兰酶基因的载体为模板，进行点突变反应，得到突变质粒；然后于转化工程菌中复制表达。本发明的突变体酶具有更优的耐热性能。
- I型普鲁兰酶的突变体酶及其制备方法与应用-202010716258.7
- 逄晓阳;吕加平;杨洋;芦晶;张书文;李伟勋;朱青;徐琛 - 中国农业科学院农产品加工研究所
- 2020-07-23 - 2021-11-23 - C12N9/44
- 本发明公开了I型普鲁兰酶的突变体酶，突变体酶的氨基酸序列如SEQ ID No.1所示。本发明还公开了编码所述突变体酶的基因的核苷酸序列如SEQ ID No.2所示。本发明还公开了突变体酶的制备方法，包括根据I型普鲁兰酶的氨基酸序列进行同源建模，基于序列比对分析和蛋白结构分析，选取突变位点并设计对突变引物对；以携带I型普鲁兰酶基因的载体为模板，分别进行定点突变反应，得到突变质粒；于突变质粒转化工程菌中复制表达对应的突变体酶。本发明的突变体酶具有更优的耐热性能和比酶活。
- 高性能淀粉脱支酶嵌合体菌种构建及其生产方法和应用-202110756019.9
- 范岩;牟洋 - 南京纽田科技有限公司
- 2021-07-05 - 2021-11-19 - C12N9/44
- 本发明公开了高性能淀粉脱支酶嵌合体菌种构建及其生产方法和应用。所述高性能淀粉脱支酶嵌合体由两个亲代普鲁兰酶氨基酸序列的有效嵌合得到，且所述高性能淀粉脱支酶嵌合体与亲代普鲁兰酶氨基酸序列同源性不低于95％；所述高性能淀粉脱支酶嵌合体是由Bacillus acidopullulyticus的亲代普鲁兰酶的N‑末端1‑476氨基酸残基和Bacillus deramificans的亲代普鲁兰酶C‑末端465‑976氨基酸残基嵌合而获得的。嵌合普鲁兰酶具有较高的糖化速率，这个嵌合普鲁兰酶同时还具有比亲本普鲁兰酶更高的耐热性和热稳定性，适用于糖化反应和淀粉液化。
- 一种中性普鲁兰酶突变体及其应用-202010180787.X
- 聂尧;徐岩;毕家华 - 江南大学
- 2020-03-16 - 2021-11-02 - C12N9/44
- 本发明公开了一种中性普鲁兰酶突变体及其应用，属于基因工程和酶工程技术领域。本发明分别通过对普鲁兰酶的第138位、第691位、第692位和第694位的氨基酸进行突变，得到了四个热稳定性提高且催化效率未改变的普鲁兰酶突变体D138F、C691R、G692M及T694F。在70℃下，其半衰期可分别是野生型的1.35、1.58、2.07及1.64倍。其中，G692M突变体的热稳定性得到最明显的改善，其在60、65℃下的半衰期甚至可分别达到58h、19h，分别是野生型的2.5、1.8倍。本发明中热稳定性提高的中性普鲁兰酶突变体将更适合于工业应用。
- 适合用于液化中的具有普鲁兰酶活性的多肽-202080016954.5
- 中西贵士;富木亚纪;仓方悠马 - 诺维信公司
- 2020-03-17 - 2021-10-08 - C12N9/44
- 本发明涉及相比于亲本普鲁兰酶具有增加的热稳定性和/或增加的热活性的变体普鲁兰酶，该变体普鲁兰酶包含在选自对应于SEQ ID NO:1的位置432、486、370、17、77、103、106、107、190、196、197、262、279、283、321、367、375、382、399、401、402、411、412、434、435、443、446、459、460、479、490、498、514、529、531、533、541、545、581、583、595、649、665、688、700、709、804、811的位置的至少一个位置处的取代，以及任选地在位置821、822、823、824、825、826、827和828处的一个或多个、例如所有氨基酸的缺失，其中该变体具有普鲁兰酶活性，并且其中该变体与选自由SEQ ID NO:1、SEQ ID NO:3、SEQ ID NO:4、SEQ ID NO:5组成的组的亲本α淀粉酶具有至少70％、至少75％、至少80％、至少85％、至少90％、至少95％、至少96％、至少97％、至少98％、或至少99％、但低于100％的序列同一性。本发明的另外的方面涉及使用α‑淀粉酶和本发明的热稳定普鲁兰酶用于在高于初始糊化温度的温度下液化含淀粉材料的方法。
- 普鲁兰酶变体以及编码它们的多核苷酸-201580004962.7
- 松井知子;A.雅马吉西 - 诺维信公司
- 2015-01-21 - 2021-09-03 - C12N9/44
- 本发明涉及普鲁兰酶变体，这些普鲁兰酶变体具有升高的热活性并且包括在对应于SEQ ID NO:3的多肽的位置393、143、150、243、244、345、346、368、370、373、381、382、385、387、402、429、430、431、432、456、486、492、610、624、631、632、665以及699的一个或多个位置处对亲本普鲁兰酶的取代。本发明还涉及编码这些变体的多核苷酸；包含这些多核苷酸的核酸构建体、载体、以及宿主细胞；以及使用这些变体的方法。这些变体主要衍生自来自脱支芽孢杆菌、嗜酸性普鲁兰芽孢杆菌或者杂合普鲁兰酶的普鲁兰酶。
- 耐高温中性普鲁兰酶及其应用-201910764525.5
- 俞峰;刘校函;丁少明 - 白银赛诺生物科技有限公司
- 2019-08-19 - 2021-08-10 - C12N9/44
- 本发明提供了一种耐高温中性普鲁兰酶及其应用。通过构建各种表达载体并转化相关菌株，从而获得了多种工程菌株，包括大肠杆菌、枯草芽孢杆菌、酵母菌表达菌株。采用这些工程菌可以有效的表达耐高温中性普鲁兰酶。本发明提供的重组宿主细胞包括具有上述编码基因的重组表达载体。根据本发明的中性普鲁兰酶最适温度高于65℃，pH范围5.5‑7.0，热稳定性好，适于工业上应用的要求，具有较高的经济效益和社会效益。
- 一种降低普鲁兰酶对环糊精敏感性的方法-201810181924.4
- 柏玉香;金征宇;李晓晓;纪杭燕;田耀旗;焦爱权;周星;王金鹏;赵建伟;谢正军;徐学明 - 江南大学
- 2018-03-01 - 2021-08-03 - C12N9/44
- 本发明公开了一种降低普鲁兰酶对环糊精敏感性的方法，所述方法通过对普鲁兰酶与环糊精相互作用的关键氨基酸进行理性突变，制得普鲁兰酶突变体，改变普鲁兰酶与环糊精之间的相互作用，从而降低普鲁兰酶对环糊精的敏感性，所述关键氨基酸为与环糊精之间存在疏水或氢键作用的氨基酸。本发明方法利用定点突变得到普鲁兰酶突变体，阻碍普鲁兰酶与环糊精的相互作用，从而提高原料淀粉利用率及环糊精产率。
- 专利分类
