[发明专利]一种支持产物高表达的CHO细胞无血清培养基

摘要

本发明公开了一种CHO细胞无血清培养基，主要成分包括氨基酸，无机盐成分，维生素、微量元素、酵母水解物及白蛋白等成分。本发明的CHO细胞无血清培养基，不含任何血清组分，无动物源成分，相比其他无血清培养基，增加了其亲和性。细胞从血清培养基或者其他无血清培养基可直接接种到此无血清培养基中，正常生长，免除了繁琐的驯化过程。本发明提高了CHO细胞的生长密度及其活率，增加了细胞在其中的耐受性能，延长生长平台维持时间,最重要的是提高了CHO工程细胞在其中表达外源蛋白的能力，大大提升产物的产量。

主权项

1.一种CHO细胞无血清培养基，其特征在于，由以下浓度的组分组成的：物质名称          添加浓度（mg/L）氨基酸甘氨酸            150‑750L‑丙氨酸          5‑50L‑精氨酸盐酸盐    200‑630L‑天冬酰胺        300‑1500L‑天冬氨酸        110‑320L‑半胱氨酸盐酸盐  50‑200L‑谷氨酸          135‑250L‑组氨酸盐酸盐    160‑500L‑异亮氨酸        125‑525L‑亮氨酸          50‑450L‑赖氨酸盐酸盐    55‑280L‑蛋氨酸          45‑375L‑苯丙氨酸        30‑160L‑脯氨酸          56‑90L‑丝氨酸          220‑355L‑苏氨酸          120‑350L‑色氨酸          110‑230L‑酪氨酸二钠      250‑450L‑缬氨酸          250‑460L‑胱氨酸          100‑300羟脯氨酸          2.4‑3.5维生素氯化胆碱          130‑250D‑泛酸钙          5‑8叶酸              1.7‑3.5烟酰胺            3.7‑6.6盐酸吡哆醇        6.5‑9.5核黄素            0.5‑2.3硫胺素盐酸盐      3.8‑5.6维生素B12         1‑10肌醇              10‑100硫辛酸            5‑10生物素            0.003‑0.03视黄醇            0.005‑0.5对氨基苯甲酸      0.008‑0.015无机盐二水氯化钙        100‑200碳酸氢钠          1000‑4000七水硫酸镁        50‑150氯化钾            500‑950氯化钠            2500‑5000七水合磷酸氢二钠  100‑300微量元素偏矾酸铵          0.00015‑0.00036偏硅酸钠          0.002‑0.05四水氯化锰        0.00002‑0.0001六水氯化钴        0.001‑0.002六水氯化铝        0.0001‑0.0005六水氯化铬        0.00001‑0.0001六水氯化镍        0.00001‑0.0001八水氧氯化锆      0.00001‑0.0001二氧化锗          0.00003‑0.0003七水硫酸锌        0.1‑1七水硫酸亚铁      0.25‑1五水硫酸铜        0.002‑0.02亚硒酸钠          0.0005‑0.005碳水化合物及其他成分亚油酸            0.02‑0.2亚麻酸            0.005‑0.05卵磷脂            0.5‑5硬脂酸            0.01‑0.025棕榈油酸          0.003‑0.009葡萄糖            3000‑6000丙酮酸钠          50‑200酵母水解物        200‑1000腐胺盐酸盐        0.2‑2重组人胰岛素      1‑10普朗尼克68        500‑2000牛磺酸            100‑250抗坏血酸          50‑200硫酸葡聚糖        10‑50氢化可的松        0.1‑0.5乙醇胺            0.25‑0.75胸腺嘧啶          0.08‑0.8柠檬酸铁          2000‑10000重组人血清白蛋白  0.2‑0.5吐温‑80           1‑5余量为水。