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[发明专利]一种组织类器官的制备方法-CN202111007532.4有效
发明人：姚斌;宋薇;李曌;朱冬振;黄沙;付小兵 -专利权人：中国人民解放军总医院
申请日： 2021-08-30 - 公布日： 2023-10-27 - 主分类号： C12N5/071 文献下载
摘要：本发明提供了一种组织类器官的制备方法，该制备方法包括以下步骤：步骤1、采用细胞外基质构建生物墨水；步骤2、向步骤1获得的生物墨水中加入细胞悬液，获得含有细胞悬液的生物墨水；步骤3、将步骤2获得的含有细胞悬液的生物墨水置于37℃恒温培养箱中预培养1‑3天，获得预培养生物墨水；步骤4、将预培养生物墨水转移至3D生物打印机进行打印，获得3D打印块；步骤5、将3D打印块在室温下进行交联，再放置于培养箱中培养，即得组织类器官；本发明通过调整生物墨水比例与细胞浓度并进行预培养，形成初步细胞微球并进行打印，为含细胞3D生物打印中，形成功能性及异质性类器官提供了良好的方法。
一种组织器官制备方法

[发明专利]一种原代汗腺细胞体外分离方法-CN202111407527.2有效
发明人：项江兵;孙晓艳;付小兵 -专利权人：中国人民解放军总医院
申请日： 2021-11-24 - 公布日： 2023-10-13 - 主分类号： C12N5/071 文献下载
摘要：本发明提供了一种原代汗腺细胞体外分离方法，其中，所述原代汗腺细胞体外分离方法包括：采用胶原蛋白包被细胞培养皿，获得包被细胞培养皿；向所述包被细胞培养皿内加入汗腺条件培养基，将汗腺组织加入所述包被细胞培养皿中；待汗腺组织贴壁并爬出细胞后，使用差速消化法实现原代汗腺细胞的体外高度富集。本发明利用胶原蛋白包被细胞培养皿以增加贴壁细胞的粘附性，使得90％的离体汗腺组织可以在8小时内快速贴壁，并在24小时内爬出汗腺细胞。本发明所提供的改良方法避免了传统酶消化法中涉及的二次组织消化、高强度机械吹打、及离心对细胞造成的伤害，简化了分离步骤，提高了原代汗腺的分离效率，有利于原代汗腺细胞的活性维持及其体外扩增。
一种汗腺细胞体外分离方法

[发明专利]一种原代汗腺细胞条件培养基及原代汗腺细胞培养方法-CN202111407515.X有效
发明人：项江兵;孙晓艳;付小兵 -专利权人：中国人民解放军总医院
申请日： 2021-11-24 - 公布日： 2023-10-10 - 主分类号： C12N5/071 文献下载
摘要：本发明提供了一种原代汗腺细胞条件培养基及原代汗腺细胞培养方法，其中，所述原代汗腺条件细胞培养基包括：细胞基础培养基、血清、Glutamax、缓冲液、细胞培养添加剂、青霉素/链霉素、表皮生长因子、碱性成纤维细胞因子、非必需氨基酸、胰岛素、ROCK抑制剂及NF‑κB激动剂。本发明在原代汗腺细胞基础培养基中添加有表皮细胞生长因子、碱性成纤维细胞生长因子、NF‑κB激动剂及ROCK抑制剂。通过这些生长因子和小分子的组合，以实现人原代汗腺细胞在二维条件下的体外长期扩增培养，并在传代中维持其自身的生物学特性，延缓原代汗腺细胞的衰老进程，为快速大量制备高质量的、可移植用人汗腺细胞，满足大规模临床治疗的需求提供了前提条件。
一种汗腺细胞条件培养基细胞培养方法

[发明专利]一种富集circCDK13的工程化细胞外囊泡及其制备方法和应用-CN202310785819.2在审
发明人：张翠萍;黄启林;马奎;褚自强;付小兵 -专利权人：中国人民解放军总医院
申请日： 2023-06-29 - 公布日： 2023-09-29 - 主分类号： C12N15/867 文献下载
摘要：本发明公开了一种富集circCDK13的工程化细胞外囊泡及其制备方法和应用，属于生物医药技术领域。本发明提供了一种富集circCDK13的工程化细胞外囊泡的制备方法，利用过表达circCDK13的载体感染胎盘间充质干细胞收集细胞上清获得circCDK13过表达的细胞外囊泡并用于糖尿病创面，其对糖尿病创面的治疗效果显著优于胎盘间充质干细胞分泌的天然细胞外囊泡，不仅在愈合速度上更具有优势，同时在刺激皮肤附属器再生和提升创面愈合质量方面具有更大应用潜力。
一种富集 circcdk13 工程细胞外囊泡及其制备方法应用

[发明专利]一种治疗增生性瘢痕的工程化改造外泌体及其制备方法和应用-CN202310793039.2在审
发明人：张翠萍;孟升;马奎;刘熹;付小兵 -专利权人：中国人民解放军总医院
申请日： 2023-06-30 - 公布日： 2023-09-29 - 主分类号： C12N5/10 文献下载
摘要：本发明属于基因工程和生物治疗药物，涉及一种治疗增生性瘢痕的工程化改造外泌体及其制备方法和应用。本发明所述治疗增生性瘢痕的工程化改造外泌体为过表达miR‑141‑3p的间充质干细胞外泌体。本发明所述外泌体能够显著减少增生性瘢痕的形成。
一种治疗增生瘢痕工程改造外泌体及其制备方法应用

[发明专利]一种促进糖尿病创面愈合的自噬小体及其制备方法和应用-CN202310779646.3在审
发明人：张翠萍;崔胜楠;刘熹;马奎;付小兵 -专利权人：中国人民解放军总医院
申请日： 2023-06-29 - 公布日： 2023-09-29 - 主分类号： C12N5/071 文献下载
摘要：本发明公开了一种促进糖尿病创面愈合的自噬小体及其制备方法和应用，属于生物医药技术领域。本发明提供了所述自噬小体的制备方法，从饥饿处理的血管内皮细胞中提取所述自噬小体，所述自噬小体的产生无需额外的试剂进行诱导，且提取条件简单，不需要超高速离心机，在普通的实验室即可实验，且产量高于外泌体，为患有慢性难愈性创面的患者提供了一种无毒副作用的，易于生成，价格低廉的治疗方法。本发明所述自噬小体能够促进糖尿病创面的愈合，减轻糖尿病创面对患者造成的生理及心理负担。
一种促进糖尿病创面愈合小体及其制备方法应用

[发明专利]一种促进糖尿病创面愈合的工程化改造外泌体及其制备方法和应用-CN202310354160.5在审
发明人：张翠萍;褚自强;马奎;付小兵 -专利权人：中国人民解放军总医院
申请日： 2023-04-04 - 公布日： 2023-08-01 - 主分类号： C12N5/10 文献下载
摘要：本发明属于基因工程和生物治疗药物技术领域，涉及一种促进糖尿病创面愈合的工程化改造外泌体及其制备方法和应用。本发明提供了一种促进糖尿病创面愈合的工程化改造外泌体的制备方法，包括以下步骤：将miR‑17‑5p过表达慢病毒感染间充质干细胞，筛选获得稳转细胞系；对所述稳转细胞系进行扩增培养，提取外泌体，获得促进糖尿病创面愈合的工程化改造外泌体。本发明所述制备方法获得的外泌体能够显著保护糖尿病创面，更快促进创面的愈合。
一种促进糖尿病创面愈合工程改造外泌体及其制备方法应用

[发明专利]一种低氧诱导的人脐带间充质干细胞外泌体及其制备方法和应用-CN202310348957.4在审
发明人：张翠萍;褚自强;张文华;付小兵 -专利权人：中国人民解放军总医院
申请日： 2023-04-04 - 公布日： 2023-07-28 - 主分类号： C12N5/0775 文献下载
摘要：本发明提供了一种低氧诱导的人脐带间充质干细胞外泌体及其制备方法和应用，属于生物医学技术领域。本发明提供了一种低氧诱导的人脐带间充质干细胞外泌体的制备方法，包括：将人脐带间充质干细胞在低氧环境中进行培养，得到细胞培养液；所述低氧环境的氧气体积百分含量为0.5％～1.5％；将培养得到的人脐带间充质干细胞进行差速超速离心，得到低氧诱导的人脐带间充质干细胞外泌体。本发明利用低氧诱导制备外泌体的方法得到的外泌体用于糖尿病创面，其对糖尿病创面的治疗效果显著优于常氧条件下制备的外泌体，不仅在愈合速度上更具有优势，同时在刺激皮肤附属器再生和提升愈合质量方面具有更大应用潜力。
一种低氧诱导脐带间充质干细胞外泌体及其制备方法应用

[发明专利]一种重编程真皮成纤维细胞为内皮祖细胞的化学诱导方法-CN202111571277.6有效
发明人：仲苓芝;李美蓉;付小兵;侯倩 -专利权人：中国人民解放军总医院
申请日： 2021-12-21 - 公布日： 2023-07-18 - 主分类号： C12N5/071 文献下载
摘要：本发明涉及细胞工程技术领域，提出了一种重编程真皮成纤维细胞为内皮祖细胞的化学诱导方法。本发明筛选出合适的小分子化合物FSK，对成纤维细胞进行诱导，诱导后细胞中有明显的内皮祖细胞的特异性标志物CD31和CD34的表达，说明FSK成功实现采用单一小分子诱导真皮成纤维细胞为内皮祖细胞的技术，技术方案简单，成本低，无副反应出现，有利于临床应用，具有现实意义及临床价值。
一种编程真皮纤维细胞内皮化学诱导方法

[实用新型]一种天然气开采用除砂器-CN202320103376.X有效
发明人：王学军;王学民;王道辉;付小兵;杨万胜 -专利权人：徐州海浩石油科技有限公司
申请日： 2023-02-02 - 公布日： 2023-07-07 - 主分类号： B01D46/12 文献下载
摘要：本实用新型公开了除砂器技术领域的一种天然气开采用除砂器，包括除砂筒，所述除砂筒内上部设置有固定环，所述固定环上设置有固定块，所述固定块中部设置有进气孔，所述固定块上两侧设置有出气孔，所述进气孔底部设置有第一滤网，所述固定板底部设置有进气管道，所述进气管道底部设置有第二滤网，所述除砂筒右侧上部设置有连接管，所述除砂筒左侧顶部设置有出气管，所述除砂筒右侧顶部设置有进气管，所述除砂筒顶部设置有顶盖，所述顶盖底部设置有立柱，所述除砂筒顶部表面设置有螺纹孔，所述顶盖上设置有安装孔，所述安装孔内设置有螺栓，本装置经过第一滤网和第二滤网进行两次过滤，保证流向下游设备的不会含有沙砾。
一种天然气开采除砂

[实用新型]一种便于更换滤芯的天然气除砂器-CN202223056729.X有效
发明人：王学军;王学民;王道辉;杨万胜;付小兵 -专利权人：徐州海浩石油科技有限公司
申请日： 2022-11-17 - 公布日： 2023-06-06 - 主分类号： C10L3/10 文献下载
摘要：本实用新型公开了除砂器技术领域的一种便于更换滤芯的天然气除砂器，包括除砂筒、出气管道和进气管道，所述除砂筒内设置有定位环，所述定位环底部设置有挡板，所述定位环中部设置有滤芯，所述滤芯顶部设置有固定环，所述滤芯上部设置有密封圈，所述固定环前后两侧均设置有卡块，所述固定环顶部设置有U型杆，所述定位环前后两侧均设置有安装槽，所述安装槽内设置有压力弹簧，所述压力弹簧顶部设置有滑块，所述定位环顶部前后两端均设置有L型卡杆，U型杆通过固定环带动卡块转动，卡块移动至L型卡杆内，压力弹簧将向上顶住滑块，滑块向上移动卡住卡块，完成对滤芯的快速固定。
一种便于更换天然气除砂

[实用新型]一种天然气井口用输送管道-CN202222005274.2有效
发明人：王学军;王学民;王道辉;付小兵;杨万胜 -专利权人：徐州海浩石油科技有限公司
申请日： 2022-08-01 - 公布日： 2023-05-26 - 主分类号： F16L23/08 文献下载
摘要：本实用新型公开了天然气输送技术领域的一种天然气井口用输送管道，包括第一管道和第二管道，所述第一管道的右端设置有左接头，所述左接头的右侧设置有安装块，所述左接头的右侧下部设置有下卡口，所述左接头的右侧上部设置有上卡口，所述第一管道的右侧设置有滤板，所述滤板的顶部设置有上定位杆，所述滤板的底部设置有下定位杆，所述第二管道的左侧设置有右接头，所述右接头的左侧表面设置有安装槽，滤板倾斜设置使滤板在将砂砾过滤下来后，不会堆积在滤板的表面，砂砾在天然气的高速流动下，使砂砾向滤板的底部移动，表面过滤的砂砾直接将滤板堵住。
一种天然气井口输送管道

[发明专利]一种具备零渗透高性能的易安装单元窗系统及其施工方法-CN202211681068.1在审
发明人：陈敬申;吴俊敏;张剑;苏伟锋;梁日勇;鲁宏军;付小兵 -专利权人：广州江河幕墙系统工程有限公司
申请日： 2022-12-27 - 公布日： 2023-05-05 - 主分类号： E06B1/60 文献下载
摘要：一种具备零渗透高性能的易安装单元窗系统及其施工方法，单元窗系统包括建筑顶板和建筑底板，二者之间形成窗洞，该窗洞内设有若干单元窗；该建筑顶板内设有顶部预埋钢槽，该建筑顶板底面设有上固定框，该建筑底板内设有底部预埋钢槽，该建筑底板顶面设有定位框，该定位框上方设有下固定框；该单元窗包括上横梁和下横梁，二者两端均分别与公立柱和母立柱的侧面固定连接，形成矩形框架，该矩形框架对应室外侧的一侧设有玻璃板；该上横梁包括截面呈U型的第一本体；该下横梁包括截面呈倒U型的第二本体；该公立柱设有插板，该母立柱设有与该插板对应的插槽；相邻的两个单元窗之间，其中一个单元窗的公立柱与另一个单元窗的母立柱相互插接。
一种具备渗透性能安装单元系统及其施工方法

[实用新型]鼠尾注射固定装置-CN202221623420.1有效
发明人：杨劼;李虹玉;肖茗露;马奎;杨思明;付小兵 -专利权人：中国人民解放军总医院第四医学中心
申请日： 2022-06-27 - 公布日： 2023-04-25 - 主分类号： A61D7/00 文献下载
摘要：本实用新型涉及一种鼠尾注射固定装置，包括工作台，工作台上开设有容纳腔，以供容放小鼠，所述工作台的容纳腔处设置有固定组件以及卡持组件，所述卡持组件包括可前后调节的纵向卡持扣以及可左右旋转的横向卡持扣。本实用新型鼠尾注射固定装置通过卡持组件中的纵向卡持扣夹持小鼠并进行前后调节，以便于小鼠置于容纳腔内，在通过横向卡持扣的横向卡持段夹持小鼠，并转动夹持小鼠的横向卡持段，以便于转动鼠尾并帮助调节鼠尾静脉的位置，方便医生快速便捷对鼠尾静脉注射。
尾注固定装置

[发明专利]一种丝素亲和性工程化外泌体及其构建方法和功能应用-CN202211614129.2在审
发明人：李倩坤;胡文治;张翠萍;付小兵;杨润功;续琴 -专利权人：中国人民解放军总医院第一医学中心
申请日： 2022-12-15 - 公布日： 2023-04-14 - 主分类号： C12N5/10 文献下载
摘要：本发明提供了一种丝素亲和性工程化外泌体及其构建方法和功能应用，属于生物医用材料与细胞分子治疗技术领域。本发明通过多轮筛选得到一段与丝素蛋白具有较强亲和性的丝素亲和肽，将丝素亲和肽在外泌体膜蛋白中融合表达有利于增强外泌体与亲和蛋白的结合性能，同时外泌体的膜蛋白通过融合表达MS2结构域，可高效捕捉大量特异性miRNA，从而发挥特定的功能作用。丝素蛋白结合丝素亲和性工程化外泌体后，提高了外泌体的稳定性及其在受体细胞中的内化效应，为生物分子活性材料在组织修复与再生医学领域的应用提供了研究基础，同时为临床中组织损伤修复的高效精准治疗提供了理论和技术支撑。
一种丝素亲和性工程化外及其构建方法功能应用

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