[发明专利]BACE1剪切型高效价抗体的制备及应用在审

专利信息
申请号: 201610410720.4 申请日: 2016-06-13
公开(公告)号: CN106084057A 公开(公告)日: 2016-11-09
发明(设计)人: 李晓萌;王娅;沈晓延;汪小莞;李晓春;李江 申请(专利权)人: 东北师范大学
主分类号: C07K16/40 分类号: C07K16/40;C12N15/13;C07K16/06;G01N33/573
代理公司: 暂无信息 代理人: 暂无信息
地址: 130024 吉林*** 国省代码: 吉林;22
权利要求书: 查看更多 说明书: 查看更多
摘要: 发明属于生物工程技术领域,涉及利用GST表达体系制备的BACE1剪切型高效价抗体及应用。利用基因工程技术将BACE1剪切型基因克隆到原核表达载体中,酶切鉴定后用重组质粒转化大肠杆菌,IPTG诱导产生GST‑BACE1146‑189aa和GST‑BACE1190‑214aa融合蛋白,以纯化的融合蛋白免疫新西兰兔制备抗血清并用ProteinA/G纯化。这两种抗BACE1剪切型多克隆抗体效价与特异性良好,可以应用于细胞中BACE1不同剪切型52KD、49KD的检测以及四种剪切型的区分,并能有效检出BACE1剪切型在不同细胞中的差异表达,对于系统研究BACE1功能及其在AD中的作用机制意义重大。
搜索关键词: bace1 剪切 高效 抗体 制备 应用
【主权项】:
发明保护两种抗体共同用于BACE1四种剪切型55KD、52KD、49KD和47KD的区分,以及这两种抗体用于BACE1剪切型中52KD和49KD的鉴定;用于区分BACE1四种剪切型55KD、52KD、49KD和47KD的2个抗体片段分别为:BACE1146‑189aa(insert1),BACE1190—214aa(insert2);BACE1剪切型BACE1146‑189aa(insert1)BACE1190—214aa(insert2)BACE1—55KDBACE1—52KD×BACE1—49KD×BACE1—47KD××
注:表中“√”表示包含该片段且能被该抗体识别,“×”表示不包含该片段且不能被该抗体识别;抗体BACE1146‑189aa可用于识别BACE1剪切型55KD和52KD,抗体BACE1190—214aa可用于识别BACE1剪切型55KD和49KD;BACE1剪切型55KD可同时被抗体BACE1146‑189aa和抗体BACE1190—214aa识别;BACE1剪切型52KD只可被抗体BACE1146‑189aa识别;BACE1剪切型49KD只可被抗体BACE1190—214aa识别;BACE1剪切型47KD既不能被抗体BACE1146‑189aa识别,又不能被抗体BACE1190—214aa识别;因此这两种抗体可以用于四种剪切型55KD、52KD、49KD和47KD的区分。
下载完整专利技术内容需要扣除积分,VIP会员可以免费下载。

该专利技术资料仅供研究查看技术是否侵权等信息,商用须获得专利权人授权。该专利全部权利属于东北师范大学,未经东北师范大学许可,擅自商用是侵权行为。如果您想购买此专利、获得商业授权和技术合作,请联系【客服

本文链接:http://www.vipzhuanli.com/patent/201610410720.4/,转载请声明来源钻瓜专利网。

同类专利
  • 一种抗人血管性血友病因子裂解酶的抑制性单克隆抗体及其应用-201610564881.9
  • 马珍妮;凌婧;沈飞;冯宇锋;苏健;阮长耿 - 苏州大学附属第一医院
  • 2016-07-18 - 2019-11-08 - C07K16/40
  • 本发明公开了一种抗人血管性血友病因子裂解酶的抑制性单克隆抗体及其应用,所述单克隆抗体属于IgG1亚类抗体,由杂交瘤细胞株SZ‑169产生;其中,杂交瘤细胞株SZ‑169的保藏编号为CCTCC NO:C2016134。与现有技术相比,本发明具有以下优点:(1)本发明所述单克隆抗体能够特异性的结合人全长ADAMTS13和截短型的ADAMTS13‑T7蛋白,且与截短型ADAMTS13‑T7蛋白结合能力明显高于全长ADAMTS13蛋白;(2)本发明的单克隆抗体在变性条件下,能够明显抑制ADAMTS13水解VWF,并随着单克隆抗体浓度的增加而抑制作用增强;(3)本发明所述单克隆抗体能够有效应用于药物制备中,增加了药物的靶向性和特异性。
  • 一种抗白色念珠菌烯醇化酶特异性单克隆抗体的制备方法及其应用-201910420748.X
  • 陈兴 - 石家庄和亚生物技术有限公司
  • 2019-05-20 - 2019-09-06 - C07K16/40
  • 本发明提供了提供一种抗白色念珠菌烯醇化酶特异性单克隆抗体的制备方法及其应用,由此制备抗白色念珠菌烯醇化酶单克隆抗体,用于检测白色念珠菌烯醇化酶蛋白。配对的单克隆抗体可特异性的与白色念珠菌烯醇化酶蛋白反应,与其它主要的念珠菌病原烯醇化酶无交叉反应,因此可以应用于白色念珠菌的鉴定。配对的单克隆抗体可以扩展应用至其他基于抗原抗体反应的免疫学检测技术,包括免疫层析胶体金、化学发光定量检测等,与多克隆抗体相比,单克隆抗体具有稳定性好、易于标准化的优点,更适合用来建立商品化的标准检测方法。
  • 特异性针对V5标签蛋白的单域抗体的应用-201811241160.X
  • 苏志鹏;谢维;毕国强 - 南京融捷康生物科技有限公司
  • 2018-10-24 - 2019-08-20 - C07K16/40
  • 本发明公开了特异性针对V5标签蛋白的单域抗体的应用,所述的单域抗体具有SEQ ID NO:1、SEQ ID NO:9、SEQ ID NO:17、SEQ ID NO:25、SEQ ID NO:33、SEQ ID NO:41、SEQ ID NO:49、SEQ ID NO:57、SEQ ID NO:65‑72所示的氨基酸序列,通过本发明所公布的单域抗体基因序列及宿主细胞,单域抗体能够高效表达,并应用于随机光学重构显微技术(stochastic optical reconstruction microscopy,STORM)和光激活定位显微镜成像(Photo‑activated localization microscopy,PALM)中,对生物样本中的目标蛋白的进行示踪和检测。
  • 抗二肽基肽酶4的单克隆抗体及其制备方法和用途-201810125462.4
  • 李泰明;顾小骞;焦瑞;方金芝 - 中国药科大学
  • 2018-02-02 - 2019-08-16 - C07K16/40
  • 本发明涉及免疫学、药学及医学相关领域,公开了基于二肽基肽酶4(DPP‑4)的B细胞表位制备杂交瘤细胞株和单克隆抗体的方法和用途,特别涉及用分子内载体肽来偶联DPP‑4的B表位来制备小分子抗原肽并通过合成方法快速获得,其免疫小鼠产生强免疫应答,可用于制备免疫脾脏淋巴细胞,制备杂交瘤细胞和抗体等,本发明单克隆抗体由杂交瘤细胞株(保藏编号为CCTCC No:C2017227)分泌,为Th2型抗体,在小鼠为IgG1,其抑制DPP‑4酶活性,特异结合DPP‑4,可开发DPP‑4检测试剂及DPP‑4抑制剂,其显著降血糖和尿酸及肌酐血脂四项、升高GLP‑1、调节氧化应激和免疫平衡由Th1趋向Th2,减轻胰腺炎症,可制备药物用于防治糖尿病及其并发症、高尿酸、痛风、肾肝病、高血脂、AS、心血管疾病及Th1偏高相关疾病。
  • 一种用于制备针对甜菜夜蛾caspase-5大亚基的抗体的方法-201610798617.1
  • 蒋红云;王丽萍;杨菁菁;张燕宁;毛连纲;张兰 - 中国农业科学院植物保护研究所
  • 2016-08-31 - 2019-08-09 - C07K16/40
  • 本发明涉及一种用于制备针对甜菜夜蛾caspase‑5大亚基的抗体的方法,包括以下步骤:使用氨基酸序列如SEQ ID NO:1所示的多肽免疫动物后,收集所述动物的血清,然后从所述血清中纯化所述抗体。本发明还涉及由所方法得到的抗体。本发明还涉及用所述抗体检测甜菜夜蛾caspase‑5大亚基的方法。通过使用本发明的方法和抗体,可特异性地检测样品中甜菜夜蛾caspase‑5大亚基,并且为首次检测到昆虫细胞凋亡过程中caspase‑5蛋白的活化,即大小亚基断裂。对研究昆虫caspase基因家族的毒理学意义及以caspase为靶标的新杀虫剂的开发都具有重要意义。
  • 一种用于制备针对甜菜夜蛾caspase-1大亚基的抗体的方法-201610799939.8
  • 张兰;王丽萍;杨菁菁;张燕宁;毛连纲;蒋红云 - 中国农业科学院植物保护研究所
  • 2016-08-31 - 2019-08-09 - C07K16/40
  • 本发明涉及一种用于制备针对甜菜夜蛾caspase‑1大亚基的抗体的方法,包括以下步骤:使用氨基酸序列如SEQ ID NO:1所示的多肽免疫动物后,收集所述动物的血清,然后从所述血清中纯化所述抗体。本发明还涉及由所方法得到的抗体。本发明还涉及用所述抗体检测甜菜夜蛾caspase‑1大亚基的方法。通过使用本发明的方法和抗体,可特异性地检测样品中甜菜夜蛾caspase‑1大亚基,并且为首次检测到昆虫细胞凋亡过程中caspase‑1蛋白的活化,即大小亚基断裂。对研究昆虫caspase基因家族的毒理学意义及以caspase为靶标的新杀虫剂的开发都具有重要意义。
  • 兔抗人TRK蛋白单克隆抗体制备及其免疫组化用途-201910124596.9
  • 李智;李海南;蔡林波;李军;李沛祥;李雪;方洁羽 - 广东三九脑科医院;镇江爱必梦生物科技有限公司
  • 2019-02-18 - 2019-07-19 - C07K16/40
  • 本发明公开了一种兔抗人TRK蛋白的单克隆抗体,能够特异性地识别细胞表达的TRK和/或TRK融合蛋白,表现稳定且效价高,与细胞内其它蛋白无交叉反应,具有一定的医学基础研究价值。本发明还涉及上述单克隆抗体在制备用于检测TRK和/或TRK融合蛋白的免疫组化检测工具中的应用。本发明采用免疫组织化学的方法检测肿瘤细胞TRK和/或TRK蛋白,主要包括肺癌、甲状腺癌、黑色素瘤、胃肠癌、结肠癌、软组织肉瘤、唾液腺、婴儿纤维肉瘤、阑尾癌、乳腺癌、胆管癌、胰腺癌等,为能否使用TRK激酶抑制剂进行治疗提供有力的科学参考,有效降低治疗费用,具有重要的应用价值。
  • LP-PLA2抗体及其用途-201810011001.4
  • 方磊 - 苏州诺瓦麦迪医药科技有限公司
  • 2018-01-05 - 2019-07-12 - C07K16/40
  • 本发明公开了一种分离的单克隆抗体或其抗原结合部分,其结合LP‑PLA2分子。本发明还公开了上述单克隆抗体或其抗原结合部分在制备诊断心脑血管疾病的产品中的用途。本发明的LP‑PLA2抗体,能高效特异地结合LP‑PLA2分子,能诊断冠心病、缺血性卒中等心脑血管疾病,灵敏度高,特异性强,具有很好的应用前景。
  • 一种黄鳝醛酮还原酶多克隆抗体的制备方法-201611152038.6
  • 李伟;孙文秀 - 长江大学
  • 2016-12-14 - 2019-06-28 - C07K16/40
  • 本发明公开了一种黄鳝醛酮还原酶多克隆抗体的制备方法,包括(1)黄鳝Eakr基因的克隆;(2)黄鳝Eakr基因重组表达载体的构建;(3)黄鳝Eakr重组蛋白的诱导表达和纯化;(4)多克隆抗体的制备及Western blot分析。本发明采用分子生物学和基因工程的方法,构建了黄鳝Eakr基因的重组表达载体,诱导表达,亲和层析获得纯化的重组表达蛋白。本发明的方法制备的黄鳝Eakr多克隆抗体可用于免疫组化、免疫印迹实验要求,建立体外免疫分析、研究黄鳝Eakr的功能以及黄鳝免疫荧光染色激光共聚焦显微观察,还可用于草鱼、黄颡、团头鲂、乌鳢和鲫鱼的醛酮还原酶的免疫检测。
  • 针对HDAC6-cat1区域的纳米抗体及其应用-201811634833.8
  • 谢维;于笑笑;苏志鹏 - 南京融捷康生物科技有限公司
  • 2018-12-29 - 2019-05-10 - C07K16/40
  • 本发明公开了针对HDAC6‑cat1区域的纳米抗体及其应用,具体涉及针对组蛋白脱乙酰基酶6过氧化氢酶1区域(HDAC6‑cat1)区域的纳米抗体及其应用,公开了其VHH链的框架区FR和互补决定区CDR的氨基酸序列,同时还公布了编码该重链纳米抗体的基因序列以及其表达纳米抗体的宿主细胞。通过本发明所公布的单域重链纳米抗体基因序列及宿主细胞,该纳米抗体能够在大肠杆菌内高效表达,该纳米抗体经表达纯化后可与目标抗原进行识别及特异性鉴定,并可用于目标抗原的表位的分析。同时构建了pcDNA5/FRT重组质粒,以此来探究该纳米抗体对组蛋白脱乙酰基酶6(HDAC6)生物学功能的影响。
  • 治疗性的人Plk1蛋白单克隆抗体及其制备方法-201910145658.4
  • 刘丽;邬玉兰;汪涛 - 南方科技大学
  • 2019-02-27 - 2019-05-10 - C07K16/40
  • 本发明提供了一种治疗性的人Plk1蛋白单克隆抗体及其制备方法,首先体外表达纯化了人Plk1蛋白,以重组Plk1蛋白为免疫原,免疫Balb/c小鼠,取免疫小鼠脾细胞与小鼠骨髓瘤SP2/0细胞融合;通过间接ELISA法筛选分泌特异性McAb的杂交瘤细胞;用杂交瘤细胞株诱导小鼠产生腹水,再用蛋白G亲和层析法纯化抗体,最终获得5株治疗性的人Plk1蛋白单克隆抗体。相比现有技术,本发明的制备工艺简单、易行,试剂易得,一次性可提取5株针对癌症治疗靶点:人Plk1蛋白的鼠单克隆抗体,它们通过调控蛋白的活性调控细胞周期;可以通过进一步的抗体人源化改造使其成为具有治疗功能的抗癌药物前体。
  • 一种基于BMCA纳米抗体序列的嵌合抗原受体的构建方法及其应用-201910036367.1
  • 梅志超;王雨;罗新高 - 深圳市南科生物工程有限公司
  • 2019-01-15 - 2019-04-26 - C07K16/40
  • 本发明涉及细胞免疫技术领域,且公开了一种基于BMCA纳米抗体序列的嵌合抗原受体的构建方法及其应用,步骤一:BCMA单域抗体文库构建,步骤二:BCMA特异性纳米抗体序列筛选,步骤三:嵌合抗原受体T细胞制备;其主要应用在肿瘤治疗药物中,所述肿瘤为血液相关的肿瘤疾病,所述血液相关的肿瘤疾病为主要包括各类白血病和恶性淋巴瘤。该基于BMCA纳米抗体序列的嵌合抗原受体的构建方法及其应用,制备出的纳米抗体表达序列更短,节省有限的慢病毒载体空间,基于该抗体构建的嵌合抗原受体T细胞特异性更好,肿瘤杀伤能力更强。
  • 针对PCSK9的全人源单克隆抗体的可变区基因及其应用-201510205553.5
  • 郭志刚;曹艳;高婷婷;杨欢 - 南京师范大学
  • 2015-04-27 - 2019-04-12 - C07K16/40
  • 本发明涉及基因工程抗体技术领域,特别涉及一种针对PCSK9的全人源单克隆抗体和全长抗体的制备方法和用途。所述可变区基因,其重链可变区编码的多肽与SEQ ID NO.1所示序列至少有80%同一性,其轻链可变区编码的多肽与SEQ ID NO.2所示序列至少有80%同一性。更具体而言,本发明利用人源单克隆抗体噬菌体展示文库筛选到针对人PCSK9的Fab抗体,并利用基因工程的方法得到完整全长抗体。本发明的抗体可以特异性的结合PCSK9,有效影响PCSK9与LDLR的相互作用,抑制LDLR的降解,可应用于治疗胆固醇及脂类代谢疾病。
  • 一种α-淀粉酶抑制剂及其制备方法和应用-201811509443.8
  • 赵伟;杨萃;杨瑞金 - 江南大学
  • 2018-12-11 - 2019-04-05 - C07K16/40
  • 本发明公开了一种α‑淀粉酶抑制剂及其制备方法和应用,属于天然活性物质制备技术领域。本发明以α‑淀粉酶为抗原,利用抗原抗体反应原理,在蛋鸡中得到了一种IgY,此IgY能与α‑淀粉酶结合,从而特异性抑制其活性,是一种优良的新型α‑淀粉酶抑制剂,且其具有制备成本低、特异性好(IC50值可低至1mg/mL)、稳定性高、抑制活性强(对α‑淀粉酶的抑制率可高达100%)等的优势,在制备糖尿病的防治药物方面具有极大的应用前景。
  • 一种PCSK9抗体的重链和轻链可变区及其应用-201610191117.1
  • 崔健;姜薇 - 河北仁博科技有限公司
  • 2016-03-31 - 2019-03-29 - C07K16/40
  • 本发明公开一种PCSK9抗体的重链和轻链的可变区及其应用,抗体轻链可变区氨基酸序列如SEQ ID NO.1所示,重链可变区氨基酸序列如SEQ ID NO.2所示。本发明通过酶联免疫实验证实所述抗体能够与PCSK9特异性结合。本发明所述的抗体能够有效检测PCSK9,对其检测的灵敏度达0.13ng/ml。本发明所述的抗体能够用于制备检测PCSK9的试剂盒和治疗心血管等相关疾病的药物。
专利分类
×

专利文献下载

说明:

1、专利原文基于中国国家知识产权局专利说明书;

2、支持发明专利 、实用新型专利、外观设计专利(升级中);

3、专利数据每周两次同步更新,支持Adobe PDF格式;

4、内容包括专利技术的结构示意图流程工艺图技术构造图

5、已全新升级为极速版,下载速度显著提升!欢迎使用!

请您登陆后,进行下载,点击【登陆】 【注册】

关于我们 寻求报道 投稿须知 广告合作 版权声明 网站地图 友情链接 企业标识 联系我们

钻瓜专利网在线咨询

400-8765-105周一至周五 9:00-18:00

咨询在线客服咨询在线客服
tel code back_top