[发明专利]一种提高古龙酸产酸的发酵方法

摘要

本发明涉及微生物发酵技术领域，特别涉及一种提高古龙酸产酸的发酵方法。本发明的发酵方法为用巨大芽孢杆菌与氧化葡萄糖酸杆菌混合菌系为生产菌株，以山梨糖为原料进行有氧发酵，在前期流加葡萄糖，中后期流加牛肉蛋白胨。前期流加葡萄糖，可以让大菌生长迅速；中后期流加牛肉蛋白胨，可以解决小菌生长缓慢、产酸期短、产酸慢的问题。此发明方法可以提高发酵终点古龙酸的含量，提高产酸浓度，提升发酵生产效率，并且成功运用在500L发酵罐。

主权项

一种提高古龙酸产酸的发酵方法，用巨大芽孢杆菌与氧化葡萄糖酸杆菌混合菌系为生产菌株，以山梨糖为原料进行有氧发酵，其特征在于：在发酵过程的前期流加葡萄糖溶液，中后期流加牛肉蛋白胨；包括以下步骤：(1)制备巨大芽孢杆菌和氧化葡萄糖酸杆菌的混合菌液，并接入到发酵初始培养基中；所述混合菌液中巨大芽孢杆菌和氧化葡萄糖酸杆菌数量比为1:2～1:3；所述发酵初始培养基，按质量体积比包括2～2.5mg/100ml的山梨糖、0.9～1.2mg/100ml玉米浆、0.1～0.2mg/100ml的尿素、0.02～0.04mg/100ml的MgSO4·7H2O、0.05～0.08mg/100ml的KH2PO4，发酵初始培养基pH值为6.7～7.0；(2)第一发酵阶段：控制发酵液PH值为6.5～6.7，在步骤(1)所得的混合物中流加葡萄糖溶液，使发酵液中葡萄糖浓度为1～3mg/ml，培养5～7h；(3)第二发酵阶段：调整发酵液PH值为6.0～6.4，在步骤(2)所得的发酵液中流加葡萄糖溶液，使发酵液中葡萄糖浓度为1～3mg/ml，培养3～5h；(4)第三发酵阶段：在步骤(3)所得发酵液的基础上，培养19～21h；(5)第四发酵阶段：在步骤(4)所得发酵液的基础上，培养5～7h，在培养的过程中流加牛肉蛋白胨；牛肉蛋白胨的流加量与发酵液终体积的质量体积比为0.1～0.3g/100ml；其中，步骤(1)～步骤(5)中流加山梨糖，使山梨糖浓度保持在15～20mg/ml，发酵温度为28～33℃；(6)第五发酵阶段：在步骤(5)所得发酵液的基础上，培养至发酵终点。