本发明公开了一种PCV2ORF3特异性多肽及应用,涉及生物技术领域。本发明公开了一种PCV2ORF3特异性多肽,氨基酸序列如SEQ ID NO.1所示。本发明还公开了该特异性多肽在制备检测PCV2抗体的ELISA试剂盒中的应用。本发明选择ORF3蛋白作为目标抗原,通过分子生物学的方法预测分析其抗原表位,利用其特异性多肽作为包被抗原建立了一种检测PCV2抗体的ELISA方法,该方法具有良好的重复性、敏感性和特异性,可以从PCV2亚单位疫苗免疫猪群中鉴别出PCV2野毒感染猪,为猪场的PCV2净化提供了有力的技术支撑。
本发明公开了一种布鲁氏菌A19株特异性多肽、ELISA检测试剂盒及应用,属于生物检测技术领域。具体公开一种布鲁氏菌A19株特异性多肽作为抗原在制备布鲁氏菌A19抗体检测试剂盒中的应用,所述特异性多肽的氨基酸序列如SEQ ID NO:1所示。本发明通过比对布鲁氏菌A19株和2308株的核酸和蛋白序列差异,发现布鲁氏菌A19株特异性多肽,并且以该特异性多肽为抗原构建的ELISA检测方法可以特异性地检测A19疫苗的免疫抗体,结合其它抗体试剂盒,可在免疫动物群体中鉴别出布鲁氏菌野毒感染动物,为布病净化提供了有力的支撑。
本发明公开一种基于布鲁氏菌BvrR序列的LAMP引物,包括上游外引物SEQ ID No.1、下游外引物SEQ ID No.2、上游内引物SEQ ID No.3和下游内引物SEQ ID No.4,分别命名为BF、BB、BFP和BBP。本发明还公开一种利用暖贴和LAMP引物进行现场LAMP检测的方法,包括以下操作步骤:(1)提取待测样本的基因组作为扩增模板;(2)预热:扩增反应进行前,将暖贴的外包装打开后,将暖贴卷紧进行预热;(3)配制LAMP扩增试剂;(4)将配制好的试剂置于预热好的暖贴中进行LAMP扩增;(5)结果判定。本发明方法基于布鲁氏菌BvrR序列的LAMP引物和暖贴加热方法,实现对布鲁氏菌的无设备快速检测,便于现场布鲁氏菌病的诊断,更好地进行布鲁氏菌病的防控和净化。