本发明公开了一种PCV2ORF3特异性多肽及应用,涉及生物技术领域。本发明公开了一种PCV2ORF3特异性多肽,氨基酸序列如SEQ ID NO.1所示。本发明还公开了该特异性多肽在制备检测PCV2抗体的ELISA试剂盒中的应用。本发明选择ORF3蛋白作为目标抗原,通过分子生物学的方法预测分析其抗原表位,利用其特异性多肽作为包被抗原建立了一种检测PCV2抗体的ELISA方法,该方法具有良好的重复性、敏感性和特异性,可以从PCV2亚单位疫苗免疫猪群中鉴别出PCV2野毒感染猪,为猪场的PCV2净化提供了有力的技术支撑。
本发明公开了一种布鲁氏菌A19株特异性多肽、ELISA检测试剂盒及应用,属于生物检测技术领域。具体公开一种布鲁氏菌A19株特异性多肽作为抗原在制备布鲁氏菌A19抗体检测试剂盒中的应用,所述特异性多肽的氨基酸序列如SEQ ID NO:1所示。本发明通过比对布鲁氏菌A19株和2308株的核酸和蛋白序列差异,发现布鲁氏菌A19株特异性多肽,并且以该特异性多肽为抗原构建的ELISA检测方法可以特异性地检测A19疫苗的免疫抗体,结合其它抗体试剂盒,可在免疫动物群体中鉴别出布鲁氏菌野毒感染动物,为布病净化提供了有力的支撑。
本发明公开了一套同时检测EHNV、VNNV和RSIV的引物和探针组合,包括:针对EHNV的两条特异性引物和一条探针,针对VNNV的两条特异性引物和一条探针,针对RSIV的两条特异性引物和一条探针,其核苷酸序列如SEQ ID NO.1~9所示,所述探针的3’端连接有荧光标记基团。所述引物和探针组合在制备检测试剂盒中的应用,在同时检测EHNV、VNNV和RSIV中的应用。本发明还公开了一种同时检测EHNV、VNNV和RSIV的检测方法。本发明根据流行性造血器官坏死病毒、鱼类病毒性神经坏死病毒和真鲷虹彩病毒的基因保守区设计特异性引物和探针,用荧光PCR技术在同一反应体系中对EHNV、VNNV和RSIV核酸进行体外扩增检测,不仅提高了检测敏感度,而且也大大提高了检测效率。