一种检测布鲁氏菌阿米卡星耐药性RT‑PCR试剂盒及其使用方法,属于生物技术领域。该试剂盒包括A液(RT‑PCR缓冲液、RT‑DNA聚合酶和灭菌双蒸水)、B液(引物对、探针)、阴性质控标准品和阳性质控标准品组成,其中包括用于检测布鲁氏菌的特异性引物对seq ID No.1和seq ID No.2以及探针seq ID No.3,以及检测布鲁氏菌阿米卡星耐药性的特异性引物对seq ID No.4和seq ID No.5以及探针seq ID No.6。该RT‑PCR试剂盒实用性强,耗时短,可重复性好,通过RT‑PCR扩增后,能够快速、有效、直观的鉴别临床样品中是否含有阿米卡星耐药性的布鲁氏菌。
本发明涉及分子标记技术领域,具体涉及鉴定布鲁氏菌疫苗株M5的SNP分子标记及其应用。本发明提供的SNP分子标记,其包含位于如SEQ ID NO.1所示序列第37位多态性为A/C的核苷酸序列,该SNP分子标记的多态性位点为A,对应于布鲁氏菌疫苗株M5,多态性位点为C,对应于野毒株或其他布鲁氏菌疫苗株。本发明的SNP分子标记及其检测引物和探针可实现布鲁氏菌疫苗株M5和野毒株、其他布鲁氏菌疫苗株的简便和高效鉴别,准确性较高,可应用于布鲁氏菌病病原监测和流行病学分析,为布鲁氏菌病防控提供精准的技术支撑。
本发明涉及分子标记技术领域,具体涉及鉴别布鲁氏菌疫苗株S2和野毒株的SNP分子标记及其应用。本发明提供用于鉴别布鲁氏菌疫苗株S2和野毒株的SNP分子标记,其包含位于如SEQ ID NO.1所示序列第749位多态性为G/T的核苷酸序列,该SNP分子标记的多态性位点为G,对应于布鲁氏菌疫苗株S2,多态性位点为T,对应于野毒株。本发明的SNP分子标记及其检测引物和探针可实现布鲁氏菌疫苗株S2和野毒株的简便和高效鉴别,准确性较高,可应用于布鲁氏菌病病原监测和流行病学分析,为布鲁氏菌病防控提供高效的技术支撑。
一种鉴别布鲁氏菌猪种S2疫苗株与其他种属野毒株的PCR试剂盒及其使用方法,属于检测领域。该试剂盒包括PCR缓冲液、DNA聚合酶、灭菌双蒸水、野毒株质控标准品和疫苗株质控标准品组成,其中包括用于鉴定猪种1型菌株的特异性引物对seq ID No.1和seq ID No.2,以及S2疫苗株和野毒株的特异性引物对seq ID No.3和seq ID No.4。该PCR试剂盒实用性强,成本低,耗时短,可重复性好,通过普通PCR扩增后,利用电泳检测扩增条带的大小,能够快速、有效、直观的鉴别样品中布鲁氏菌猪种S2疫苗株和其他种属野毒株,用于解决布鲁氏菌和防控过程中疫苗株和野毒株鉴别诊断的难题。
本发明提供一种布鲁氏菌LF‑RPA检测引物和探针及检测试剂盒。所述试剂盒中包含基于RPA技术检测布鲁氏菌的引物及探针,上、下游引物和探针序列分别如SEQ ID NO:1‑3所示。本发明首次采用RPA扩增技术建立快速检测布鲁氏菌的方法,进一步结合侧流层析技术,可用于临床和现场检测,为布鲁氏菌的现场快速检测提供一种灵敏、可靠的新方法。本发明大大简化了检测步骤,缩短了检测时长,同时还具有敏感性高、特异性强、稳定性好、检测标本类型多等优点,能够实现对人全血(血清)、关节液、脑脊液和动物全血(血清)、组织、流产物、可疑奶制品等感染布鲁氏菌的检测,对布鲁氏菌病的现场快速诊断具有重要意义。