本发明涉及农业生物技术领域,尤其涉及一种植物组成型启动子CEPro432及其应用。所述CEPro432启动子包括如SEQ ID NO.1所示的核苷酸序列或如SEQ ID NO.2所示的核苷酸序列。本发明在GRMZM2G090432基因中筛选发现了两个CEPro432启动子,其可以驱动各类基因在植物中表达,例如功能基因、功能基因的反义基因、或小RNA基因等的表达,且CEPro432‑1942启动子的表达略强于CEPro432‑1076启动子。本发明提供的CEPro432启动子在植物的基因工程领域有重要意义,可有效降低外源DNA引起的转基因植物的潜在安全风险。
本发明涉及基因检测技术领域,尤其涉及一种转基因作物目的基因拷贝数检测方法及试剂盒。本发明所述转基因作物目的基因为GAT‑MS,其核苷酸序列如SEQ ID NO.1所示,所述检测方法以转基因作物的基因组DNA为模板,若GAT‑MS在转基因作物中表达,则可利用GAT‑MS和内源基因的共用引物对,在同一qPCR反应体系中扩增得到两种大小不同、含量不同、GC比例不同的PCR产物;进而通过分析所述PCR产物的熔解曲线,根据GAT‑MS熔解峰和内源基因熔解峰的荧光强度比值,可准确定量转基因作物GAT‑MS拷贝数,且具有检测灵敏度高、结果准确性高、检测效率高、成本低、检测周期短及普适性广等优点。
本发明涉及一种水稻GAT转化事件GATV3‑97‑2的侧翼序列及其检测引物与应用。本发明提供的侧翼序列包括如SEQ ID NO.1所示的右侧翼序列和如SEQ ID NO.2所示的左侧翼序列。本发明提供检测侧翼序列的特异性引物SEQ ID NO.9‑10或SEQ ID NO.11‑12。采用本发明提供的特异性引物对待测水稻的DNA样品进行PCR扩增,能够特异性地指示水稻第2号染色体的预测蛋白Os02g0705201的第一内含子29104182‑29104183碱基处是否插入pC0309‑KhvMaau MCMK5400的T‑DNA片段。本发明成功实现了对转基因水稻及其衍生系实施检测和安全管理。
本发明涉及一种水稻GAT转化事件GATV3‑328‑1的侧翼序列及其检测引物与应用。本发明提供的侧翼序列包括如SEQ ID NO.1所示的右侧翼序列和如SEQ ID NO.2所示的左侧翼序列。本发明提供检测该侧翼序列的特异性引物SEQ ID NO.9‑10和SEQ ID NO.11‑12。采用上述特异性引物对待测水稻的DNA样品进行PCR扩增,能够特异性地指示水稻第9号染色体锌指蛋白Os09g0511500第6个外显子的19881585‑19881622碱基处是否插入pC0309‑KhvMaauMCMK5400的T‑DNA片段。本发明成功实现了对转基因水稻及其衍生系实施检测和安全管理。
本发明属于生物工程技术领域,具体涉及一种用于检测载体GATV2转化事件的引物组、试剂盒和方法。所述引物组包括左边界特异性引物和/或右边界特异性引物,左边界特异性引物包括GATV2‑LB‑R1/R2/R3,其序列依次分别如SEQ ID NO:1~3所示;右边界特异性引物包括GATV2‑RB‑F1/F2/F3,其序列依次分别如SEQ ID NO:4~6所示。本发明的引物组能准确、快速的找出GATV2的左右侧翼序列,而在非转基因或其他转基因植物中均未能扩出特异条带,适用于对水稻遗传智能化育种技术(GAT)保持系GATV2及其衍生系实施检测、监测和安全管理。
本发明涉及一种水稻GAT转化事件GATV2‑88‑4的侧翼序列及其检测引物与应用。本发明提供的侧翼序列包括如SEQ ID NO.1所示的左侧翼序列和如SEQ ID NO.2所示的右侧翼序列。本发明提供检测所述侧翼序列的特异性引物SEQ ID NO.9‑10和SEQ ID NO.11‑12。采用本发明提供的特异性引物对待测水稻的DNA样品进行PCR扩增,能够特异性地指示水稻第12号染色体非编码区第27241465‑27241510碱基处是否插入pC0308‑MMMaauCK5400的T‑DNA片段。本发明成功实现了对转基因水稻及其衍生系实施检测和安全管理。
本发明涉及一种水稻GAT转化事件GATV3‑96‑1的侧翼序列及其检测引物与应用。本发明提供的侧翼序列包括如SEQ ID NO.1所示的右侧翼序列和如SEQ ID NO.2所示的左侧翼序列。本发明提供检测所述侧翼序列的特异性引物SEQ ID NO.9‑10或SEQ ID NO.11‑12。采用本发明提供的特异性引物对待测水稻的DNA样品进行PCR扩增,能够特异性地指示水稻第2号染色体表达蛋白Os02g0125700的第一外显子第1344745‑1344777碱基处是否插入pC0309‑KhvMaauMCMK5400的T‑DNA片段。本发明成功实现了对转基因水稻及其衍生系实施检测和安全管理。
本发明涉及一种水稻GAT转化事件GATV3‑426‑1的侧翼序列及其检测引物与应用。本发明提供的侧翼序列包括如SEQ ID NO.1所示的右侧翼序列和如SEQ ID NO.2所示的左侧翼序列。本发明提供检测所述侧翼序列的特异性引物SEQ ID NO.9‑10和SEQ ID NO.11‑12。采用本发明提供的特异性引物对待测水稻的DNA样品进行PCR扩增,能够特异性地指示水稻第8号染色体非编码区第26084763‑26084830碱基处是否插入pC0309‑KhvMaauMCMK5400的T‑DNA片段。其中本发明成功实现了对转基因水稻及其衍生系实施检测和安全管理。
本发明涉及农业生物技术领域,尤其涉及一种CEPro722启动子及其应用。所述CEPro722启动子包括如SEQ ID NO.1所示的核苷酸序列或如SEQ ID NO.2所示的核苷酸序列。本发明经过研究,在GRMZM2G069722基因中筛选发现了CEPro722启动子,该启动子可以驱动基因在例如水稻、小麦或玉米等植株中表达;尤其是在植物愈伤组织、营养生长期的叶片,幼穗及种子等各组织中高效稳定的表达,可替代非植物源启动子。本发明提供的CEPro722启动子在植物的基因工程领域有重要意义,可有效降低外源DNA引起的转基因植物的潜在安全风险。
本发明涉及生物工程技术领域中转基因植物的安全评估和检测方法,具体涉及一种用于检测载体GATV3转化事件的引物组、试剂盒和方法。所述引物组包括左边界特异性引物和/或右边界特异性引物;其中,左边界特异性引物包括GATV3‑LB‑R1/R2/R3,其序列依次分别如SEQ ID NO:1~3所示;右边界特异性引物包括GATV3‑RB‑F1/F2/F3,其序列依次分别如SEQ ID NO:4~6所示。其能准确、快速的找出GATV3的左右侧翼序列,而在非转基因或其他转基因植物中均未能扩出特异条带,适用于对水稻遗传智能化育种技术(GAT)保持系GATV3及其衍生系实施检测、监测和安全管理。