本发明提供了一种用于检测FLT3‑F691L突变的crRNA、等温扩增引物和试剂盒,所述crDNA的核苷酸序列如SEQ ID NO.3所示;用于检测FLT3‑F691L突变的等温扩增引物,包括如SEQ ID NO.13所示的上游引物和如SEQ ID NO.16所示的下游引物;所述试剂盒含有所述crDNA或者所述的crRNA、以及Cas12a蛋白、荧光探针和所述等温扩增引物。本发明首次采用CRISPR荧光法检测FLT3基因F691L突变,具有成本低、可多次重复检测、方法简单、检测速度快、灵敏(最低检测极限达到10拷贝/uL)、特异形的特点。