本发明公开了一种基于免疫磁球的猪流行性腹泻病毒快速检测试剂盒,属于生物领域,该试剂盒包括有:免疫磁球,洗涤液,无菌无核酶水,标准阳性对照样品,检测引物,Real time RT‑PCR反应液;其中的免疫磁球表面具有PEDV膜蛋白特异性多克隆抗体。本发明利用表面(羧基化)修饰的磁球和抗PEDV膜蛋白M特异性兔源多克隆抗体制备了免疫磁球,能够特异性结合粪便、组织等多种样品中的PEDV病原,以免疫磁球‑病原复合物直接作为模板,进行Real time RT‑PCR检测,简化了实验操作步骤并节省了检测时间。