本发明提供了一种基于热力学指导的用于癌症诊疗一体化的DNA纳米结构,由A、B、C、D和H五条寡核苷酸链组成,其中寡核苷酸链A、寡核苷酸链的DNA序列分别如SEQ ID No.1‑No.5所示。该DNA纳米结构同时具有诊断成像、化疗和基因治疗联合效果。其具有识别多药耐药1(MDR1)mRNA的能力,对MDR1 mRMA的检测限为0.05µM;热力学数据表明其对阿霉素和柔红霉素具有高的载药量;该DNA纳米结构具有良好的基因治疗效果且增强了对耐药细胞的化疗效果。
本发明公开了一种基于免标记无酶DNA机器荧光放大策略检测尿嘧啶-DNA糖基化酶活性的方法,包括以下步骤:(1)用于UDG的识别和信号转导的探针的制备:首先设计一个含尿嘧啶碱基和引发序列的双链DNA探针P1-P2,其中P1链为抑制链,其核苷酸序列如序列表中SEQ ID NO.1所示);P2链为含尿嘧啶DNA序列与引发序列的嵌合共轭链,其核苷酸序列如序列表中SEQ ID NO.2所示;P1链和P2链部分互补形成双链DNA探针P1-P2;(2)免标记无酶的DNA机器的构建:根据P2链的引发序列,设计两个部分互补的发夹探针H1和H2用于构建免标记无酶的DNA机器,G-四联体序列嫁接在发夹探针H2的末端;(3)UDG的活性检测。本发明的检测方法成功实现了背景降低和信号放大,检测限为0.00044U/mL。