[发明专利]异种移植制品和方法

权利要求书

1.一种用于异种移植到人接受者中的生物制品，所述生物制品包括在异种移植后形成血管的活细胞和组织，

其中所述活细胞和组织来源于非野生型生物工程化猪，其

A)具有生物工程化基因组，使得其不表达一种或多种细胞外表面聚糖表位；

B)不含至少以下人畜共患病原体：

(i)粪便物质中的蛔虫属种、隐孢子虫属种、棘球属、粪类圆线虫和弓形虫；

(ii)通过抗体滴度确定的钩端螺旋体属种、猪肺炎支原体、猪生殖和呼吸综合征病毒(PRRSV)、伪狂犬病、可传播的胃肠炎病毒(TGE)、可传播的猪呼吸道冠状病毒和弓形虫；

(iii)猪流感；

(iv)通过细菌培养确定的以下细菌病原体：支气管脓毒症博德特菌、凝固酶阳性葡萄球菌、凝固酶阴性葡萄球菌、牲畜相关的耐甲氧西林的金黄色葡萄球菌(LA MRSA)、亮毛杜鹃和毛癣菌属种；

(v)猪巨细胞病毒；和

(vi)猪布鲁氏菌；

C)根据减少生物负荷的程序来维持，所述程序包括将所述猪维持在隔离的封闭畜群中，其中已确认在所述隔离的封闭畜群中的所有其他动物均不含所述人畜共患病原体，其中所述猪被隔离免于与在所述隔离的封闭畜群之外的任何非人动物和动物安置设施接触；

其中，通过对所述猪实施安乐死并从所述猪中无菌地去除所述生物制品而从所述猪中收获生物制品；

其中，使用不会由3-(4,5-二甲基噻唑-2-基)-2,5-二苯基四唑鎓溴化物(MTT)还原测定所测定将细胞生存能力降低至小于50％细胞生存能力的灭菌过程对所述生物制品进行处理。

2.如权利要求1所述的生物制品，其中所述生物制品不含两种或更多种类型的细胞外表面聚糖表位，其通过流式细胞术确认。

3.如权利要求2所述的生物制品，其中所述生物制品不含α-1,3-半乳糖基转移酶表位和N-羟乙酰神经氨酸表位，其通过流式细胞术确认。

4.如权利要求2所述的生物制品，其中所述生物制品不含α-1,3-半乳糖基转移酶表位、N-羟乙酰神经氨酸表位和β1,4-N-乙酰半乳糖氨基转移酶表位，其通过流式细胞术确认。

5.如权利要求1所述的生物制品，其中所述生物制品不进行最终灭菌，并且经确认：

a.不促进需氧和厌氧细菌在无菌测定中生长，

b.不促进支原体集落在支原体测定中生长，

c.在内毒素测定中不含内毒素，

d.在MTT还原测定中具有至少50％的细胞生存能力，

e.通过流式细胞术确定的不具有半乳糖基-α-1,3-半乳糖表位，

f.不含蛔虫属种、隐孢子虫属种、棘球属、粪类圆线虫、弓形虫、猪布鲁氏菌、钩端螺旋体属种、猪肺炎支原体、猪生殖和呼吸综合征病毒、伪狂犬病、葡萄球菌属种、亮毛杜鹃属种、毛癣菌属种、猪流感、猪巨细胞病毒、动脉炎病毒、冠状病毒、支气管脓毒症博德特菌和家畜相关的耐甲氧西林的金黄色葡萄球菌。

6.如权利要求1所述的生物制品，其中所述生物制品不进行最终灭菌，并且其中所述生物制品通过UV-C辐照和在抗病原体浴中浸浴中的至少一者灭菌。

7.如权利要求1所述的生物制品，其中所述生物制品获自通过亲本猪的自然交配生产的猪，所述亲本猪也维持在所述隔离的封闭畜群中并且也不含所述人畜共患病原体，并且其中所述猪通过阴道活产分娩。

8.如权利要求1所述的生物制品，其中所述生物制品具有的性质使得与来自非遗传修饰的对应猪的细胞相比，所述生物制品当与人外周血单核细胞(PBMC)共培养时诱导降低的细胞因子白介素6(IL-6)的产生和较低的CD8+T细胞免疫反应，其通过体外混合淋巴细胞反应测定测量。

9.如权利要求1所述的生物制品，其中所述生物制品具有的性质使得所述制品保留生物活性，并且包含在-40℃或以下的温度下冷冻保存至少一年之后能够形成血管的活细胞和组织。