[发明专利]泰万菌素发酵过程中提高泰乐菌素转化率的生产工艺

说明书

技术领域

本发明涉及泰万菌素的发酵，尤其涉及一种泰万菌素发酵过程中提高泰乐菌素转化率的生产工艺。

背景技术

泰万菌素是一种新型高效大环内酯类抗生素，是在泰乐菌素基础上经生物发酵半合成得到，是泰乐菌素的第三代升级产品，是动物专用药物，其特点是抗菌谱广、抗菌活性高，不易产生耐药性，同时具有抗支原体活性及抑制蓝耳病毒复制的能力。随着国际药品形势和我国兽药法规的变化，国际国内均在限制和禁止人用药在动保行业的使用，尤其是欧盟和美国出台了限制和禁止的相关政策。近期我国相继出台了多个政策性公告和通知，限制和禁止部分人兽共用抗生素的使用。由于泰万菌素是动物专用药品，并且具有安全、高效、低残留、不易产生耐药性的特点。根据产品本身的培育和发展，预计作为限制、禁止类产品的替代和补充，其市场前景广阔、生命周期可期，同时也将是政策鼓励发展的重点产品。

泰万菌素及替米考星均为泰乐菌素的升级换代产品，都是在泰乐菌素的基础上改造而成，二者都是泰乐菌素的衍生物，生产过程中都需要使用泰乐菌素，故泰乐菌素转化率的高低决定着泰万菌素的生产经济性，即转化率越高，泰乐菌素利用率越高，生产成本越低，反之亦然。故如何提高转化率则比较关键。

在泰万菌素的后处理工艺中，其主要提取方法有二次结晶法、盐析法和有机溶媒萃取法、，然而，这些方法均存在一些技术缺陷，二次结晶法和盐析法：这两种方法是目前提取泰万菌素采用比较多的方法，不过这两种工艺在提取过程中，结晶效果较差，晶体细碎，因而影响了泰万菌素的收率，另外在提取的过程中，容易产生较多的杂质，导致成品质量低，杂质超标，溶解性不合格等；进一步影响泰万菌素的收率，增加生产成本。萃取法是采用有机溶媒作为萃取剂进行提取，该工艺生产过程中容易出现乳化现象；而且操作毒性大，容易对环境产生污染；收率低，生产成本较高，不利于规模化大生产。

发明内容

本发明的目的在于克服现有技术中存在的缺陷，提供一种泰万菌素发酵过程中提高泰乐菌素转化率的生产工艺，该生产工艺在保证目标产物质量的前提下，实现了泰乐菌素转化率的提高，以及泰万菌素的收率。

本发明的技术方案为：一种泰万菌素发酵过程中提高泰乐菌素转化率的生产工艺，包括发酵步骤，所述发酵步骤包括以下步骤：

步骤A、初级代谢菌体生产：培养泰乐菌丝生长；

步骤B、次级代谢菌素生产：当发酵液因碳源代谢加速，pH下降，补入底物泰乐菌素溶液；

步骤C、补入底物泰乐菌素溶液后，pH升高，通过补入葡萄糖溶液，调节发酵过程pH，使其控制在7.05-7.10。

进一步地，本发明提供的泰万菌素发酵过程中提高泰乐菌素转化率的生产工艺，还包括在发酵步骤前还包括种子培养步骤，发酵步骤后还包括后处理步骤：

所述种子培养步骤为：将种子冻存液注入种子摇瓶中培养种子，并在种子罐中进行扩大培养；

所述后处理步骤包括：

(1)、酸化；

(2)、板框过滤、复滤；

(3)、结晶；

(4)、水洗、结晶溶解成盐、喷雾干燥和混粉。

进一步地，步骤A中，所述泰乐菌丝的生长温度控制在29-31℃，提供较多的具有碳源及氮源的营养。

本发明所述步骤A中，发酵液pH先降低，后升高，然后再下降。

进一步地，所述步骤B，发酵液pH开始下降，当发酵液pH下降至7.0开始补入无菌的泰乐菌素溶液。

补底物后，发酵液pH会继续下降，当下降至6.7左右，发酵液pH会升高，传统工艺发酵液pH升高至7.3后开始补入葡萄糖，通过葡萄糖代谢产酸的特性将发酵液pH控制在7.25-7.3，然而传统的工艺pH控制较高，补充葡萄糖量少，容易造成发酵液中碳源不足。

进一步地，本发明的生产工艺的步骤C中，补入底物泰乐菌素溶液后，发酵液pH开始下降，后升高至7.10时开始补入葡萄糖。

更进一步地，步骤C中，在发酵液pH升高至7.10时开始补入葡萄糖，所述补入的葡萄糖将发酵液pH控制在7.06-7.09，即增加葡萄糖补入量，提高菌体活力、延缓菌体衰老，提高泰乐菌素的转化率。

进一步地，步骤B中，补入底物泰乐菌素溶液前，发酵液温度为29-31℃，补入底物泰乐菌素溶液后发酵液温度为27-29℃。通过试验来看，通过控制发酵过程中的温度，大大提高了有效成分的含量，成品经过加速试验，稳定性与该工艺实施前一致，但有效成分提高了4.76％以上。

本发明的工艺，将泰乐菌素的转化率92-94％提高至96-98％，且对成品质量无影响。