[发明专利]一种增强TRAIL抗肿瘤活性的双靶点融合蛋白无效
| 申请号： | 201310478404.7 | 申请日： | 2013-10-14 |
| 公开（公告）号： | CN103524627A | 公开（公告）日： | 2014-01-22 |
| 发明（设计）人： | 陈守春;潘凤;闫娟;徐琦;胡海洋;李昭君;朱文彦 | 申请（专利权）人： | 成都华创生物技术有限公司 |
| 主分类号： | C07K19/00 | 分类号： | C07K19/00;C12N15/62;C12N15/70;A61K38/17;A61P35/00 |
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| 地址： | 610041 四川省成都*** | 国省代码： | 四川;51 |
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| 摘要： | |||
| 搜索关键词： | 一种 增强 trail 肿瘤 活性 双靶点 融合 蛋白 | ||
1.一种增强TRAIL抗肿瘤活性的双靶点融合蛋白，其特征在于，编码融合蛋白的全长融合基因序列1的编码cDNA序列见SEQ ID NO1。
2.根据权利要求1所述的增强TRAIL抗肿瘤活性的双靶点融合蛋白，其特征在于，全长融合基因序列1的编码氨基酸序列见SEQ ID NO2。
3.根据权利要求1或2所述的增强TRAIL抗肿瘤活性的双靶点融合蛋白，其特征在于，该蛋白由R8、SMAC N7、内源性蛋白酶酶切位点与TRAIL蛋白肽段顺序融合而成。
4.根据权利要求1所述的增强TRAIL抗肿瘤活性的双靶点融合蛋白，其特征在于，编码融合蛋白的全长融合基因序列2的编码cDNA序列见SEQ ID NO4。
5.根据权利要求4所述的增强TRAIL抗肿瘤活性的双靶点融合蛋白，其特征在于，全长融合基因序列2的编码氨基酸序列见SEQ ID NO5。
6.根据权利要求4或5所述的增强TRAIL抗肿瘤活性的双靶点融合蛋白，其特征在于，该蛋白由TAT、SMAC N7、内源性蛋白酶酶切位点与TRAIL蛋白肽段顺序融合而成。
7.根据权利要求1、2、4、5任一所述的增强TRAIL抗肿瘤活性的双靶点融合蛋白，其特征在于，治疗的靶点为TRAIL受体DR4、DR5和凋亡拮抗因子XIAP。
8.根据权利要求1、2、4、5任一所述的增强TRAIL抗肿瘤活性的双靶点融合蛋白，其特征在于，将其编码cDNA克隆于原核表达载体pET32a或pTWIN1上。
9.根据权利要求8所述的增强TRAIL抗肿瘤活性的双靶点融合蛋白，其特征在于，所述表达载体pET32a中切除Trx标签序列。
10.根据权利要求8所述的增强TRAIL抗肿瘤活性的双靶点融合蛋白，其特征在于，所述表达载体pTWIN1中切除Intein内含肽序列。
11.根据权利要求8所述的增强TRAIL抗肿瘤活性的双靶点融合蛋白，其特征在于，所述表达载体采用BL21（DE3）宿主菌表达。
12.根据权利要求8所述的增强TRAIL抗肿瘤活性的双靶点融合蛋白，其特征在于，表达的最佳诱导温度为18℃，可溶性表达水平为60～100%。
13.根据权利要求1、2、4、5任一所述的增强TRAIL抗肿瘤活性的双靶点融合蛋白用作抗肿瘤药物的用途。
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