[发明专利]一种光激发蛋白质中二硫键还原得到自由巯基的方法无效
申请号: | 201310016825.8 | 申请日: | 2013-01-17 |
公开(公告)号: | CN103087183A | 公开(公告)日: | 2013-05-08 |
发明(设计)人: | 武灵芝;胡栋 | 申请(专利权)人: | 南京邮电大学 |
主分类号: | C07K14/76 | 分类号: | C07K14/76;C07K14/435;C07K1/00;C07K17/00;C12N11/00;C12N13/00;C12N9/36;C12N9/18;C12N9/20;C12N9/14;C12N9/16 |
代理公司: | 南京经纬专利商标代理有限公司 32200 | 代理人: | 李纪昌 |
地址: | 210003 江苏*** | 国省代码: | 江苏;32 |
权利要求书: | 查看更多 | 说明书: | 查看更多 |
摘要: | |||
搜索关键词: | 一种 激发 蛋白质 二硫键 还原 得到 自由 巯基 方法 | ||
技术领域
本发明涉及一种光激发蛋白质中二硫键还原得到自由巯基的方法,主要用于生物材料、生物传感器中蛋白质的固定以及自组装。
背景技术
在生物材料、生物传感器以及生物燃料电池等应用中都涉及到蛋白质在界面的吸附固定。为了提高蛋白质在界面的取向分布,更好的发挥其生物功能,人们需要对蛋白质进行修饰,加工。通常的办法是引入氨基、羧基以及巯基等活性基团,通过共价作用将载体蛋白质固定在界面上,实现生物分子固定化的专一性和分子取向的有序性,直接决定了生物传感器的灵敏性和生物材料的特异性[Rusmini F, et al., Biomacromolecules 2007, 8, 1775-1789, Hernandez K, et al., Enzyme and Microbial Technology 2011, 48, 107–122]。其中巯基是最常用的一类活性基团,硫原子非常活跃,和很多金属(如Au、Ag 和Pt)以及各种含硫分子具有很强的相互作用,可在界面形成高度有序且密集排列的生物功能膜,而且分子另一端可以带上不同的活性功能团以适用不同的性能需求[Kawada J, et al., Biomacromolecules 2005, 6, 2271-2274, Rezwan, K, et al., Langmuir 2005, 21, 3493-3497]。目前在蛋白质中引入自由巯基的方法,主要有定点突变引入半胱氨酸,利用DTT等进行二硫键还原以及利用巯基特异性试剂如马来酰亚胺等进行衍生[Johnson S, et al., Anal . Chem. 2008, 80, 978-983, Gauvreau V, et al., Bioconjugate Chemistry 2004, 15, 1146-1156, Jongsma MA, et al., Proteomics 2006, 6, 2650-2655, Lud SQ, et al., Langmuir 2010, 26, 15895–15900]。这些方法步骤比较繁琐,对温度、pH等溶剂环境要求比较高,同时可能降低或者破坏蛋白质的结构和活性,而且修饰后的蛋白质的制备和纯化过程耗时比较长,耗材比较贵,从而限制了蛋白质在生物传感器以及生物材料中的应用。
半胱氨酸、色氨酸、络氨酸是天然的氨基酸,是蛋白质序列结构的重要组成部分。其中两个半胱氨酸形成二硫键对蛋白质的构象稳定以及生物活性具有重要的作用。色氨酸和络氨酸等芳香氨基酸是蛋白质中重要的吸光氨基酸,受到紫外光的照射,可以发出荧光,是观测蛋白质结构变化的重要探针。通过对大量蛋白质的序列结构比对以及实验验证,我们发现在大量蛋白质家族中,都存在芳香氨基酸和二硫键临近的空间构象。这一保守的结构模式存在于溶菌酶、角质酶、乳白蛋白、免疫球蛋白、血清蛋白、胰岛素以及水解酶、脂肪酶和碱性磷酸酶等蛋白家族[Serrano AL, et al., Protein Science 2012,21,157-170, Prompers JJ, et al., FEBS Letter 1999, 456, 409-416, Wu LZ, et al., J Mol Struct 2008, 882, 101-106]。
发明内容
技术问题:本发明的目的是提出一种光激发蛋白质得到自由巯基的方法,具有反应快速,操作简单,高效稳定的特点,可以用于生物传感器和生物材料中蛋白质的特异性固定。
本发明的技术方案为:一种光激发蛋白质中二硫键还原得到自由巯基的方法,其特征在于该方法包括如下步骤:
(1)配制蛋白质溶液,其蛋白质的浓度小于1 mM,pH为7-8,蛋白质溶液的温度为10-40℃;
(2)用紫外光照射蛋白质溶液,其辐射的强度小于30W/m2,光照时间10-1000分钟,得到含有自由巯基的蛋白质。
所述的紫外光波段为260-300nm,由高压汞灯、氢灯或氙灯提供。
所述的蛋白质为具有芳香氨基酸与二硫键空间临近构象的蛋白质,蛋白质中的芳香基氨基酸和组成硫键的半胱氨酸的原子间距离小于10?。
所述蛋白质为溶菌酶、角质酶、乳白蛋白、免疫球蛋白、水解酶、脂肪酶或碱性磷酸酶。
芳香基氨基酸为色氨酸或络氨酸吸收光子能量,传递给临近的半胱氨酸,导致二硫键还原。
一种光激发蛋白质中二硫键还原得到自由巯基的方法,生成的自由巯基可以用于蛋白质的固定。
该专利技术资料仅供研究查看技术是否侵权等信息,商用须获得专利权人授权。该专利全部权利属于南京邮电大学,未经南京邮电大学许可,擅自商用是侵权行为。如果您想购买此专利、获得商业授权和技术合作,请联系【客服】
本文链接:http://www.vipzhuanli.com/pat/books/201310016825.8/2.html,转载请声明来源钻瓜专利网。
- 同类专利
- 一种分离纯化猪血浆中白蛋白的方法-201910754947.4
- 杨海;唐青海;王芳宇;杨灿;刘会敬;唐姣玉;龚慧芳;张淇美 - 衡阳师范学院
- 2019-08-15 - 2019-10-11 - C07K14/76
- 本发明公开了一种分离纯化猪血浆中白蛋白的方法,包括以下步骤:步骤一、白蛋白上清液的制备:调血浆蛋白含量至5%;调pH值以及温度;乙醇加入后调节PH;搅拌温度控制在‑4.5~‑5.0℃,搅拌2小时,离心杯预冷至‑3.0℃~‑4.5℃,装入制品,制品离心,至上清液澄清;步骤二、白蛋白的制作与分离:步骤三、白蛋白的纯化以及过滤;白蛋白沉淀纯化:白蛋白的过滤,除菌过滤、分装。本发明对猪血浆中的单一蛋白建立提取工艺;通过调控温度、pH等参数,利用乙醇沉淀和超滤技术分离目的蛋白,目的蛋白具有高纯度和高提取率;采用的材料价格低廉,降低成本;整个分离纯化过程不到10h,分离效率高;获得的猪血浆白蛋白为高附加值产品,显著提高了猪血浆的加工效益。
- 一种驼乳乳清抗肿瘤活性蛋白及其制备方法和应用-201910222766.7
- 杨洁;张兆肖;高杨;豆智华;王红娟 - 新疆大学
- 2019-03-22 - 2019-07-23 - C07K14/76
- 本发明提供一种驼乳乳清抗肿瘤活性蛋白及其制备方法和应用,通过分离乳清蛋白采用超滤的方法获得,以新疆双峰驼乳清蛋白为研究对象,通过组分CM‑1,含有188种已知蛋白质,含有糖基化依赖性细胞粘附分子1、α‑乳白蛋白、肽聚糖识别蛋白1、维生素D结合蛋白、乳过氧化物酶、IgG‑Fc片段结合蛋白、14‑3‑3蛋白质、Igγ‑3C、乳铁蛋白、肌动蛋白、胺氧化酶、核连蛋白、泛素‑60s核糖体蛋白L4、RAS致癌基因家族成员等多种与肿瘤发生发展密切相关的蛋白质。实验表明,CM‑1对肿瘤细胞有明显抑制增殖作用,与化疗药物联合给药,抑制肿瘤细胞增殖的效果明显优于化疗药物单独给药,为肿瘤治疗提供一种多药联合方案,具有广泛的开发价值。
- 尤其用于治疗软骨缺损的含白蛋白的组合物-201780066900.8
- H.伍斯特;N.克劳森;N.巴尔达西 - 泰特科组织工程技术股份公司
- 2017-08-28 - 2019-06-14 - C07K14/76
- 本发明涉及一种组合物,其具有空间上相互分离的第一组分和第二组分,其中所述第一组分包含可交联白蛋白且所述第二组分包含聚合物,其中所述聚合物的非末端单体单元至少部分、特别是仅部分具有白蛋白交联基团。本发明进一步涉及一种可借助所述组合物获得的反应产物,一种医学装置,一种用于新型疗法的药物,一种试剂盒,一种出料装置,以及一种官能化透明质酸。
- 一种低铝残留量人血白蛋白的超滤方法-201910341902.4
- 张安山;何彦林;韩祥东;郭广兆;刘晓;韩国德 - 兰州兰生血液制品有限公司
- 2019-04-26 - 2019-06-11 - C07K14/76
- 本发明涉及人血白蛋白领域,尤其明涉及一种低铝残留量人血白蛋白的超滤方法。包含如下步骤:(1)调整超滤前制品的pH值至7.3~7.5;(2)将超滤前制品浓缩至蛋白质含量70~100g/L;(3)采用温度为2.0~8.0℃的注射用水对倍透析2~3次;(4)用0.4~0.6mol/L NaCl溶液透析,透析溶液量不低于透析液体积的2.5倍;(5)用温度为8.0~16.0℃的注射用水等体积透析,透析用水量应不少于透析液体积的2.5倍;(6)将人血白蛋白原液浓缩至蛋白质含量>210g/L。采用本法生产的人血白蛋白产品的铝残留量低,不高于20μg/L。
- 由血管高通透性介导的疾病的治疗-201780050334.1
- D.巴尔-奥尔;G.托马斯 - 安皮奥制药股份有限公司
- 2017-07-26 - 2019-04-02 - C07K14/76
- 本发明提供了抑制有此需要的动物中的血管高通透性的方法。方法包括对动物施用有效量的药物组合物和一种或多种p38 MAPK抑制剂,所述药物组合物通过从人血清白蛋白组合物中除去白蛋白来制备。
- 一种食品级水解乳清蛋白及其制备方法-201810656607.3
- 杨敏;杨继涛 - 甘肃农业大学
- 2018-06-24 - 2018-11-06 - C07K14/76
- 本发明公开了一种食品级水解乳清蛋白及其制备方法。本发明所述的食品级水解乳清蛋白主要成分为氨基酸和短肽,产品纯度高,氯化物含量低于5%,技术指标满足食品级水解乳清蛋白产品要求,可为食品工业、日化品行业、发酵工业、化学工业、饲料工业以及植物微肥企业提供高品质的氨基酸和短肽原料,也可为科研人员提供高纯度的水解乳清蛋白产品。本发明所述的食品级水解乳清蛋白制备方法是以乳清蛋白及其制品为原料,以高压反应釜为水解设备,工艺过程包括盐酸水解、蒸发脱酸、活性炭脱色、阴离子交换树脂纯化、干燥,制备工艺简单、能耗低,盐酸用量少,制备周期短,产品纯度高;该工艺制备成本低,环境污染小,符合低碳环保新理念;该工艺既能在实验室实施,又能产业化放大,应用范围广泛,具有重要的推广应用价值。
- 犬白蛋白的制备方法及其产品-201810795784.X
- 王宏伟 - 北京博莱得利生物技术有限责任公司;泰州博莱得利生物科技有限公司
- 2018-07-19 - 2018-09-18 - C07K14/76
- 本发明公开了一种犬白蛋白的制备方法,包括:以健康犬血清或血浆为原料,用阴离子交换层析柱UniGel‑80Q进行第一次层析分离得到犬白蛋白粗品;(Ⅱ)将犬白蛋白粗品用阴离子交换层析柱QBestaroseFF进行第二次层析分离得到纯化的犬白蛋白。本发明直接以健康的犬血清或血浆为原料,用阴离子交换层析柱进行两次层析分离制备得到犬白蛋白,最终制品中犬白蛋白的含量>100mg/ml,纯度≥97%,内毒素含量<8EU/ml。本发明制备方法能够最大限度的降低白蛋白活性的损失,显著提高犬白蛋白纯度和回收率,步骤简便、安全性高,综合生产成本也低于常用的低温乙醇法。
- 一种乳清蛋白的纯化方法-201310452798.9
- 赵建敏;王建武;付明波;汤波;李宁 - 北京济普霖生物技术有限公司;无锡科捷诺生物科技有限责任公司
- 2013-09-27 - 2017-11-21 - C07K14/76
- 本发明提供了一种乳清蛋白的纯化方法,以哺乳动物乳汁为原料,经预处理得到乳清,进行疏水层析分离,得到纯化的α‑乳清白蛋白和β‑乳球蛋白。还提供了一种当乳清蛋白含有重组人α‑乳清白蛋白时,在进行疏水层析分离之前,先通过阴离子交换层析,使重组人α‑乳清白蛋白与内源的α‑乳清白蛋白以及β‑乳球蛋白分离开,再进行疏水层析分离,得到纯化的重组人α‑乳清白蛋白及动物内源的α‑乳清白蛋白和β‑乳球蛋白的方法。
- 白蛋白变体和缀合物-201710127505.8
- C·J·A·芬尼斯;J·M·海;E·P·弗里伊斯;J·卡梅隆;D·斯里普 - 阿尔布梅迪克斯医疗公司
- 2010-02-11 - 2017-07-28 - C07K14/76
- 本发明涉及白蛋白变体和缀合物。基于白蛋白的三维结构,发明人设计了具有一个或多个带有游离巯基的半胱氨酸残基的变体多肽(mutein)(下文中称作“硫代白蛋白”)。变体多肽可以通过半胱氨酸残基的硫原子与缀合配偶体如生物活性化合物缀合。
- 一种稳定同位素标记α‑乳白蛋白特征肽段的合成方法-201710228093.7
- 徐仲杰;罗勇;钟佳琪;涂亚辉;王浩然;孙雯;卢伟京;杨维成 - 上海化工研究院有限公司
- 2017-04-10 - 2017-07-04 - C07K14/76
- 本发明涉及稳定同位素标记α‑乳白蛋白特征肽段的合成方法,利用液相合成多肽方法,以稳定同位素标记或非标记缬氨酸为起始原料,和Fmoc保护的非标记或者标记甘氨酸,在缩合剂的作用下,合成二肽,然后脱掉保护基Fmoc,再和Fmoc保护的非标记或者标记异亮氨酸,在缩合剂的作用下,生成三肽,依次和Fmoc保护的非标记或者标记天冬酰胺、酪氨酸、色氨酸、亮氨酸、丙氨酸、组氨酸以及和Cbz保护的非标记或者标记赖氨酸进行反应,最终生成稳定同位素标记α‑乳白蛋白特征肽段VGINYWLAHK。本发明合成的产品化学纯度达99%以上,同位素丰度在99%以上,可充分满足食品中过敏原α‑乳白蛋白的检测需要。
- 抗发炎蛋白与制备及使用其的方法-201180062599.6
- 阿嫚达·比恩;彼得·莫蓝;雷·库森斯;理查·威尔金斯 - 曼努卡米德有限公司
- 2011-12-22 - 2017-05-24 - C07K14/76
- 本案的揭示是关于抗发炎蛋白、其用途、制备方法及其侦测方法。特定而言,本发明是关于来自麦卢卡蜂蜜的经甲基乙二醛修饰的主要蜂王浆蛋白及其片段。
- 改性α‑乳白蛋白及其制备方法与应用以及功能性食品-201210200640.8
- 任发政;葛克山;郭慧媛;郑俊彦 - 中国农业大学
- 2012-06-14 - 2017-01-18 - C07K14/76
- 本发明公开了一种改性α‑乳白蛋白及其制备方法与应用以及功能性食品,该改性α‑乳白蛋白具有SEQ ID NO1所示的氨基酸序列,或者该改性α‑乳白蛋白具有将SEQ ID NO1所示的氨基酸序列经过一个或几个氨基酸残基的取代、缺失或添加后仍基本上不改变所述改性α‑乳白蛋白三级结构的氨基酸序列,其特征在于,SEQ ID NO1所示的氨基酸序列中至少第58位的赖氨酸残基具有麦芽三糖修饰,所述麦芽三糖修饰为赖氨酸残基的ε氨基上的一个氢被式(1)所示基团所取代。本发明提供的改性α‑乳白蛋白具有较低的抗原性。
- 一种改性乳清蛋白粉的制备方法-201310541612.7
- 江连洲;李杨;隋晓楠;王妍;王中江;齐宝坤;曹亮;赵城彬 - 东北农业大学
- 2013-11-06 - 2014-02-12 - C07K14/76
- 一种改性乳清蛋白粉的制备方法属于牛乳蛋白加工技术,该方法包括以下步骤:(1)将乳清蛋白溶于水,配制成一定浓度的乳清蛋白溶液;(2)往蛋白溶液中加入一定量的琥珀酸酐进行琥珀酰化;(3)将琥珀酰化的蛋白溶液调节pH至碱性,然后对其进行微波处理;(4)将微波处理后的蛋白溶液调节pH至酸性,搅拌一段时间后离心分离,取沉淀部分;(5)将沉淀部分真空干燥即得改性的乳清蛋白粉;本发明方法利用微波辅助琥珀酰化改性乳清蛋白提高其凝胶性,制备一种具有高凝胶性的乳清蛋白粉,所需要的设备简单、操作安全、快捷,改性的蛋白凝胶性高,有利于乳清蛋白在食品中的应用。
- 一种光激发蛋白质中二硫键还原得到自由巯基的方法-201310016825.8
- 武灵芝;胡栋 - 南京邮电大学
- 2013-01-17 - 2013-05-08 - C07K14/76
- 本发明公开了一种光激发蛋白质中二硫键还原得到自由巯基的方法,该方法包括如下步骤:(1)配制蛋白质溶液,其蛋白质的浓度小于1mM,pH为7-8,蛋白质溶液的温度为10-400C;(2)用紫外光照射蛋白质溶液,其辐射的强度小于30W/m2,光照时间10-1000分钟,得到含有自由巯基的蛋白质。该方法操作简单,高效便捷,具有很强的特异性,而且对蛋白质的结构破坏最小。因此光激发蛋白质得到自由巯基的方法可以用于蛋白质在界面的高覆盖率,取向有序、特异性固定,这一技术在生物传感器、生物材料以及生物能源等领域具有重大的应用前景,将会给医疗、化工等行业发展带来巨大的经济效益和社会效益。
- 一种膜分离工艺回收利用大豆乳清废水的方法-201210522447.6
- 邱全国 - 成都连接流体分离科技有限公司
- 2012-12-07 - 2013-04-03 - C07K14/76
- 本发明公开了一种膜分离工艺回收利用大豆乳清废水的方法,它包括:预处理杀菌;絮凝、离心分离除杂;超滤膜连续分离方式回收乳清蛋白;回收乳清蛋白粉;纳滤膜连续浓缩方式回收低聚糖浆;回收低聚糖;反渗透膜连续浓缩回收透析水。本发明可避免乳清废水的酸败和超滤膜的污堵,提高了产品品质;采用连续式分离浓缩方式,最大限度地减少了截留物或蛋白、杂质浓液在膜组件中的停留,不再往返循环于膜进液罐和膜系统中,同时控制膜表面的流速,解决了膜的污染和分离效率低的难题;采用洗涤渗滤膜工艺,自动加水洗滤,解决了膜的污堵问题,而且提升了产品品质;选用耐高温亲水性膜材料,保证有高的水通量,有利于降低膜的污染。
- 复合物和生产过程-201080011265.1
- 珍妮·彼得森-凯斯伯格;凯塞纳·斯万保格;肯尼思H·莫;安-克里斯汀·莫新伯格 - 哈姆雷特药品AB
- 2010-01-08 - 2012-02-08 - C07K14/76
- 本发明描述了用于制备生物活性复合物的方法和过程,并要求其权利,所述方法包含带有α-乳清蛋白,例如人α-乳清蛋白的序列或其片段但缺少分子内二硫键的重组蛋白,以及油酸。该重组蛋白适当地带有在天然蛋白中找到的半胱氨酸,其被改变为其他氨基酸例如丙氨酸。本发明还描述了生物活性复合物的重组表达、过程合理化和产量上的改进,以及获得的复合物,并要求其权利。
- 乳清蛋白的规模纯化方法-201110191731.5
- 李荣秀;王一;翟东改;李雪;霍晨曦;颜远伟 - 上海交通大学
- 2011-07-08 - 2011-12-21 - C07K14/76
- 一种生物工程技术领域的乳清蛋白的规模纯化方法,通过以人α-乳清白蛋白重组牛乳为原料,经预处理纯化蛋白后,用阴离子交换层析分离得到重组人α-乳清白蛋白、牛α-乳清白蛋白和牛β-乳球蛋白。本发明能够可快速、简便、低成本、大批量纯化重组人α-乳清白蛋白,降低生产成本,提高了生产效率。
- 人血清白蛋白接头以及其结合物-200980154509.9
- 查尔洛特·麦克唐纳格;迈克尔·费尔德豪斯;亚历山大拉·胡哈洛夫 - 梅里麦克制药股份有限公司
- 2009-10-14 - 2011-12-14 - C07K14/76
- 本发明披露了一种人血清白蛋白(HSA)接头和与该HSA接头结合的结合剂、诊断剂、以及治疗剂。本发明还披露了一种结合物,其中该HAS接头共价结合于作为第一和第二单链Fv分子(scFv)的氨基端和羧基端结合部分。示例性的结合物可用于例如减少肿瘤细胞增殖,例如,用于治疗应用。本发明还披露了HSA接头结合物的诊断和治疗应用的方法和试剂盒。
- 人血白蛋白的生产方法-201110030776.4
- 李常禄;魏舒;孙晓东;杨金平;陈凤珠;于洋;郭晶 - 哈尔滨派斯菲科生物制药股份有限公司
- 2011-01-28 - 2011-08-24 - C07K14/76
- 本发明涉及一种生物制品技术中蛋白质的分离、提纯工艺方法,具体是一种人血白蛋白的生产方法。其主要特点是:用三步法进行分离,简化现有的分离工艺,提高了产品收率和生产效率,在压滤时加入合适比例的硅藻土作为助滤剂,提高过滤速度,改善过滤效果。加入层析步骤后,降低了人血白蛋白的多聚体含量,改进了人血白蛋白的稳定性,也控制了内毒素含量。产品的各项质量指标均超过国家标准。
- 一种脱氧雪腐镰刀菌烯醇人工抗原的制备方法及应用-201010602291.3
- 张旭;邢锦城;马鸿翔;余桂红;孙晓波 - 江苏省农业科学院
- 2010-12-23 - 2011-07-13 - C07K14/76
- 本发明属于免疫检测及生物技术领域,具体涉及一种脱氧雪腐镰刀菌烯醇人工抗原的制备方法及应用。利用丁基硼酸封闭脱氧雪腐镰刀菌烯醇(DON)的7,15-羟基,戊二酸酐酰化3-羟基合成3-HG-DON,通过二环已基碳二亚胺活泼酯法将3-HG-DON偶联到载体蛋白BSA,得到人工抗原DON-HG-BSA。本发明提供的制备方法尽量避免反应副产物的生成,降低或避免蛋白对半抗原的掩蔽效应,制备过程温度条件比较温和,在10~37℃之间,避免高温条件下DON氧化而产生副产物,操作简易可行。
- 一种碱性橙Ⅱ人工抗原的合成方法-201010600988.7
- 匡华;胥传来;宋珊珊;林菲;赵书阁;刘微波;赵媛;王利兵 - 江南大学
- 2010-12-23 - 2011-07-13 - C07K14/76
- 一种碱性橙Ⅱ人工抗原的合成方法,属于生物化工技术领域。本发明以对氨基苯丁酸及间苯二胺为原料,通过重氮化法制备碱性橙Ⅱ-丁酸人工半抗原,用碳二亚胺法将其与载体蛋白牛血清白蛋白BSA偶联,制得碱性橙Ⅱ-丁酸-BSA偶联物,用分光光度法测定偶联物的偶联比。试验结果表明我们制得碱性橙Ⅱ-丁酸-BSA偶联物产生了针对碱性橙Ⅱ很好的抗体,即是碱性橙Ⅱ人工抗原。本发明成功合成了碱性橙Ⅱ人工抗原,合成步骤简洁,有效,完全可用于免疫分析当中,为以后人们的研究提供了必需的碱性橙Ⅱ人工抗原,可以满足国内对其研究的需要。
- 一种高效纯化金属离子结合蛋白的疏水层析分离纯化方法-201010252608.5
- 苏志国;张焱;罗坚;马光辉 - 中国科学院过程工程研究所
- 2010-08-13 - 2011-01-19 - C07K14/76
- 本发明一种高效纯化金属离子结合蛋白的疏水层析分离纯化方法,其步骤为:选取含有金属离子结合蛋白的待分离物料,添加沉淀剂进行沉淀粗分离获得蛋白混合物。在蛋白混合物中添加过量的螯合剂去除目标蛋白的辅基金属离子I,透析去除螯合剂后添加适量不易沉淀的金属离子II,以保持目标蛋白的三级结构。将处理所得蛋白混合物进行疏水层析分离操作,并在层析缓冲液中添加适量的金属离子II,由于金属离子辅基II可以有效地保持目标蛋白的天然结构,因此可以有效地提高目标蛋白与杂蛋白在疏水层析中的分辨率。进一步通过凝胶过滤层析可以得到高纯度、高回收率的金属离子结合蛋白的纯品,生产工艺稳定,适于规模化生产。
- 凝血因子VIIA调节剂的制造、组合物和用途-200880116583.7
- 戴维·劳里;诺伯特·普罗 - 环状药物公司
- 2008-10-16 - 2010-10-13 - C07K14/76
- 本文揭示使用因子VIIa的抑制剂,使用式I化合物来治疗癌症和血栓栓塞性病症。
- 一种适用于从人尿中大规模富集白蛋白的方法-201010106302.9
- 苗丕渠;傅和祥;俞恒;傅和亮 - 扬州艾迪生物科技有限公司;扬州维普生物科技有限公司
- 2010-02-05 - 2010-08-11 - C07K14/76
- 本发明涉及一种从人尿中富集白蛋白的方法,特别适合于大规模使用,它是采用阴离子交换剂制作尿液过滤装置,将其置放于尿斗或小便池内,用以承接尿液从过滤装置流过;尿液过滤装置的形状、大小与尿斗或小便池相适应;定时回收尿液过滤装置,对其中的阴离子交换剂作集中解吸,收集含白蛋白的组份,并对阴离子交换剂作再生处理备作再用。经后续的纯化处理,可制得各种指标均达到药典要求的白蛋白,在多种领域作为人血浆来源白蛋白的替代品应用。
- 转铁蛋白融合蛋白库-200780050623.8
- 安德鲁·J·特纳;王百扬 - 比奥雷克西斯药物公司
- 2007-12-07 - 2010-01-06 - C07K14/76
- 本发明公开了含有转铁蛋白部分和整联蛋白结合域的融合蛋白及其肽库。本发明包括筛选在被宿主细胞表达的融合蛋白中展示的转铁蛋白和整联蛋白肽库的方法。本发明的融合蛋白包括能够在酵母中表达的转铁蛋白融合蛋白。
- 乳清蛋白的分离和测定方法-200910161153.3
- 任一平;谢宏;蔡增轩;储小军;林晓;黄百芬;张京顺 - 浙江贝因美科工贸股份有限公司
- 2009-08-06 - 2009-12-30 - C07K14/76
- 一种分离和测定牛乳清蛋白的方法,它包括对乳清蛋白进行预处理、用以1.7μm亚乙基桥杂化(BEH)颗粒为填料的超高效液相色谱柱将试样中的牛乳α-乳白蛋白和牛乳βa-乳球蛋白、牛乳βb-乳球蛋白完全分离和用质谱仪进行区间扫描,对未变性的上述牛乳白蛋白和牛乳球蛋白进行定量。在该方法中,添加人α-乳白蛋白作为内标。使用本发明的方法,可以准确测定各种食品中的未变性的上述三种牛乳清蛋白的含量,而且前处理简单、灵敏度高、检测速度快和选择性好。
- 结晶人血清白蛋白的方法-200910004625.4
- K·维苏里;S·尤奥迪拉;S·P·弗尔顿;D·E·考托 - 陶洛斯HSA有限责任公司
- 2003-10-28 - 2009-10-21 - C07K14/76
- 本发明涉及通过结晶和重复的结晶从各种来源纯化和生产人白蛋白。本发明方法的基本特征包括提供特定的反应条件和沉淀试剂以使白蛋白结晶最大化。利用溶解度图作为本发明方法的过程控制的基础。本发明特别地控制磷酸盐浓度、pH和温度以精确指导结晶动力学和晶体产率。
- 氟-18标记的新乳糖白蛋白化合物及其制备方法和应用-200910084553.9
- 张现忠;杨文江;牟甜甜;唐志刚;王学斌;张俊波;陆洁 - 北京师范大学;北京师宏药物研制中心
- 2009-05-21 - 2009-10-14 - C07K14/76
- 本发明公开了一种氟-18标记的新乳糖白蛋白化合物及其制备方法和应用,该化合物的化学表达式为18FB-NGA。以放射性N-琥珀酰亚胺4-[18F]氟苯甲酸酯([18F]SFB)与新乳糖白蛋白(NGA)在碱性条件下反应制备得到所述的放射性氟-18标记的新乳糖白蛋白化合物;该化合物的化学稳定性及生物性能好、初始摄取值与化学纯度高、制备简单并且使用成本低,作为一种新型的肝脏受体PET显像剂应用在放射性药物化学和临床核医学技术领域中。
- 用于检测和测定黄芩苷的抗体、方法和试剂盒-200810171802.3
- 赵琰;屈会化;王庆国;李宇航;杨爱玲;李翼飞 - 北京中医药大学
- 2008-11-13 - 2009-08-05 - C07K14/76
- 本发明提供包括黄芩苷或其衍生物的半抗原,与赋予抗原性的载体物质结合的前述半抗原的免疫原,与标记试剂结合的前述半抗原的偶联物(包被原),以及抗前述免疫原的抗体,该抗体能与完整的黄芩苷中的至少一种结构性抗原决定部位结合。本发明还提供用于检测或定量样品中黄芩苷的方法和试剂盒,以及前述偶联物和前述抗体在检测或定量黄芩苷中的用途。本发明对黄芩苷具有特异性,可用于样品中检测黄芩苷的存在和测定黄芩苷的含量。
- 用于检测和测定绿原酸的抗体、方法和试剂盒-200810172700.3
- 王庆国;赵琰;屈会化;任会明;蒋兴凯;杨爱玲;李翼飞 - 北京中医药大学
- 2008-11-13 - 2009-07-22 - C07K14/76
- 本发明提供包括绿原酸或其衍生物的半抗原,与赋予抗原性的载体物质结合的前述半抗原的免疫原,与标记试剂结合的前述半抗原的偶联物(包被原),以及抗前述免疫原的抗体,该抗体能与完整的绿原酸中的至少一种结构性抗原决定部位结合。本发明还提供用于检测或定量样品中绿原酸的方法和试剂盒,以及前述偶联物和前述抗体在检测或定量绿原酸中的用途。本发明对绿原酸具有特异性,可用于样品中检测绿原酸的存在和测定绿原酸的含量。
- 专利分类