本发明涉及一种人轮状病毒P[8]△VP8*-P[6]△VP8*重组嵌合蛋白,其氨基酸序列如SEQ ID No.2所示。本发明还提供了该蛋白的编码基因、制备方法以及该蛋白在制备轮状病毒疫苗中的应用。本发明将P[8]△VP8*和P[6]△VP8*两个片段串联表达成P[8]△VP8*-P[6]△VP8*重组嵌合蛋白,该蛋白可以同时诱导抗人轮状病毒主要P基因型P[8]、P[4]、P[6]的中和抗体,克服了现有疫苗只能诱导产生抗一种基因型的抗体的缺陷
本发明公开了一种CTB/LTB多肽与VP8的融合蛋白,其氨基酸序列包括人轮状病毒VP8蛋白氨基酸片段和外源多肽片段组成,所述外源多肽片段为CTB‑1、CTB‑2和/或LTB‑1,所述CTB‑1的氨基酸序列如SEQ ID NO:1所示,LTB‑1的氨基酸序列如SEQ ID NO:2所示,CTB‑2的氨基酸序列如SEQ ID NO:6所示,所述VP8蛋白氨基酸片段是人轮状病毒Wa株蛋白的氨基酸片段第64‑223本发明从CTB和LTB中筛选出多肽片段CTB‑1、CTB‑2和LTB‑1,将多肽片段与轮状病毒的VP8蛋白进行融合表达,分别纯化得到3个多肽‑VP8融合蛋白,具有较好的蛋白水溶性,并且能产生高免疫原性。
本发明公开了一种基于兔轮状病毒VP8*蛋白的间接ELISA抗体检测试剂盒,包括兔轮状病毒VP8*蛋白包被的ELISA板;所述兔轮状病毒VP8*蛋白的氨基酸序列如SEQ ID NO.1所示。本发明以兔轮状病毒VP8*蛋白为包被抗原,其对于RVs抗体的特异性高,安全性好,只与RVs阳性血清特异结合,不与兔其它病毒的阳性血清发生交叉反应,具有良好的抗原性。