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[发明专利]G418发酵液的精制纯化工艺-CN202110060711.8有效
发明人：任兆龙;王福聚;李婷婷 -专利权人：北京泛球生物科技有限公司
申请日： 2021-01-18 - 公布日： 2022-04-12 - 主分类号： C07H1/06 文献下载
摘要：本发明提供一种G418发酵液的精制纯化工艺，用草酸调节G418发酵液pH至2.0‑3.0，然后加入助滤剂，充分搅拌，再经板框过滤、得到G418溶液；然后将G418溶液依次经陶瓷膜过滤、阳离子交换树脂吸附、阴离子交换树脂脱色、大孔吸附树脂吸附、真空浓缩、活性炭脱色和干燥即得G418纯品。本工艺操作步骤简单，产品纯度高，可实现G418稳定、安全高效地生产。
g418 发酵精制纯化工艺

[发明专利]一种高产G418工程菌及其构建方法与应用-CN201410004713.5无效
发明人：孙宇辉;郭俊红;邓子新 -专利权人：武汉大学
申请日： 2014-01-06 - 公布日： 2014-03-26 - 主分类号： C12N1/20 文献下载
摘要：本发明公开了一种高产G418工程菌及其构建方法与应用，属于抗生素制药领域。高产G418工程菌为编码C-6’羟基氧化还原酶的基因genQ功能缺失的棘孢小单孢菌ΔgenQ，其保藏编号为CCTCCNO：M2013729。本发明利用同框敲除技术对庆大霉素产生菌棘孢小单孢菌中的genQ基因进行缺失，以阻断庆大霉素C组分及其相关中间产物的合成，使其主要产生G418。本发明ΔgenQ的G418产量和纯度高，简化了生产G418的生产工艺，降低了生产成本。
一种高产 g418 工程及其构建方法应用

[发明专利]含NPT－II标记基因转基因水稻的快速检测方法-CN200410023293.1无效
发明人：易自力;王紫萱;蒋建雄;覃静萍;张昊;谭炎宁 -专利权人：易自力;王紫萱;蒋建雄
申请日： 2004-06-10 - 公布日： 2005-12-14 - 主分类号： C12Q1/68 文献下载
摘要：本发明公开了一种快速检测含NPT－II标记基因转基因水稻的方法，此方法能实现转基因水稻在整个生育期各个阶段的快速检测，此方法包括一种抗生素溶液或含这种抗生素的培养基，此抗生素为G418。水稻不同外植体对G418的敏感性不同，因此检测的浓度有差异。本发明确定了通过G418溶液或含G418的培养基检测转基因水稻的临界浓度，其浓度一方面可以杀死转基因水稻中的非转化植株，另一方面又能保证转基因水稻中转化株的正常生长。
npt ii 标记基因转基因水稻快速检测方法

[发明专利]一种甘蔗体细胞胚及其诱导方法-CN202210787134.7在审
发明人：姚伟;张木清;黄振;王彩霞;周宇明;段真珍;暴怡雪 -专利权人：广西大学
申请日： 2022-07-06 - 公布日： 2023-03-03 - 主分类号： A01H4/00 文献下载
摘要：本发明提供了一种甘蔗体细胞胚及其诱导方法，包括如下步骤：1)将甘蔗细胞在DEM培养基中培养11～17天；(2)将甘蔗细胞转移到含有G418的DEM培养基中培养8～12天，然后在含有G418的DEM培养基继代培养8～12天，筛选存活的甘蔗细胞；(3)将存活的甘蔗细胞转移到含有G418的NB培养基上筛选培养8～12天，继代转接到含有G418的NB培养基中筛选8～12天，得到甘蔗体细胞胚。
一种甘蔗体细胞及其诱导方法

[发明专利]一种甘蔗体细胞胚及其诱导方法-CN202310757768.2在审
发明人：姚伟;张木清;黄振;王彩霞;周宇明;段真珍;暴怡雪 -专利权人：广西大学
申请日： 2023-06-26 - 公布日： 2023-09-19 - 主分类号： A01H4/00 文献下载
摘要：本发明提供了一种甘蔗体细胞胚及其诱导方法，包括如下步骤：1)将甘蔗细胞在DEM培养基中培养11～17天；(2)将甘蔗细胞转移到含有G418的DEM培养基中培养8～12天，然后在含有G418的DEM培养基继代培养8～12天，筛选存活的甘蔗细胞；(3)将存活的甘蔗细胞转移到含有G418的NB培养基上筛选培养8～12天，继代转接到含有G418的NB培养基中筛选8～12天，得到甘蔗体细胞胚。
一种甘蔗体细胞及其诱导方法

[外观设计]外套（G418）-CN202130494693.5有效
发明人：杨旎可 -专利权人：杨旎可
申请日： 2021-08-02 - 公布日： 2021-12-14 - 主分类号： 02-02 文献下载
摘要：1.本外观设计产品的名称：外套（G418）。2.本外观设计产品的用途：用于日常穿着。3.本外观设计产品的设计要点：在于形状与图案的结合。4.最能表明设计要点的图片或照片：立体图。
外套 g418

[发明专利]减弱阿霉素毒副作用的方法-CN201910561877.0在审
发明人：苏正定;成细瑶;周曦 -专利权人：武汉艾默佳华生物科技有限公司
申请日： 2019-06-26 - 公布日： 2019-09-27 - 主分类号： A61K31/704 文献下载
摘要：本发明提供了一种减弱阿霉素毒副作用的方法，具体地，提供了氨基糖苷G418与抗肿瘤药物阿霉素联合用药在抗肿瘤疾病中的应用。通过G418和DOX的联合用药，可以降低DOX的毒副作用，同时实现相当的药物效果。
毒副作用阿霉素联合用药抗肿瘤疾病抗肿瘤药物氨基糖苷药物效果应用

[发明专利]G418抗性标记在农杆菌介导的木霉遗传转化中的应用-CN201310611921.7无效
发明人：唐俊;陈捷;马越;张雷 -专利权人：阜阳师范学院
申请日： 2013-11-26 - 公布日： 2014-05-28 - 主分类号： C12N15/80 文献下载
摘要：本发明涉及G418抗性标记的农杆菌介导的木霉遗传转化中的应用，以G418的抗性为木霉抗性筛选标记。该农杆菌介导的木霉遗传转化方法包括将G418抗性基因与经过酶切并去磷酸化的载体p1300连接成p1300-neo载体；农杆菌菌株活化并培养至OD₆₀₀值为0.3～0.6，并用15～用LB培养基在25～35℃培养，再用含卡那霉素和利福平的YEB培养基培养并筛选出重组农杆菌；将处于对数生长期且OD660值为0.6～0.8的活化的重组农杆菌菌液与木霉分生孢子悬液混匀并诱导培养，再用含G418的M-100培养基在25～30℃培养并筛选出抗G418的木霉。
g418 抗性标记杆菌遗传转化中的应用

[发明专利]一种产G418单组分的工程菌及其应用-CN201410030139.0有效
发明人：洪文荣;阙新桥;胡育龙 -专利权人：福州大学;福州市鼓楼区荣德生物科技有限公司
申请日： 2014-01-23 - 公布日： 2014-06-18 - 主分类号： C12N1/20 文献下载
摘要：本发明属于抗生素制药领域，涉及一种产G418单组分的工程菌及其应用，该工程菌为绛红色小单孢菌GQ175，该菌株已于2013年12月6日在中国微生物菌种保藏管理委员会普通微生物中心登记保蒇，保藏编号为CGMCCNo.8543，通过破坏绛红小单孢菌中庆大霉素的生物合成关键基因，阻断庆大霉素的生物合成代谢流，促使代谢产物中间体G418的积累，不再合成庆大霉素复合物。本发明通过基因框内敲除的方法灭活绛红小单孢菌中庆大霉素生物合成基因genQ，构建穿梭载体pDB303，pDB303转化绛红小单孢菌G1008，筛选双交换菌株，发酵生产，代谢产物检测和新组分鉴定本发明产单组分G418，填补国内至今无法生产G418的空白，该工程菌生产工艺简单，成本低，产率高，便于控制，质量稳定。
一种 g418 组分工程及其应用

[发明专利]一种G418在少孢节丛孢菌中遗传转化筛选体系的建立方法-CN202110642739.2在审
发明人：王永中;彭慧;盛康亮;汪静敏;孔小卫 -专利权人：安徽大学
申请日： 2021-06-09 - 公布日： 2021-09-07 - 主分类号： C12N15/80 文献下载
摘要：该方法包括如下步骤：首先将G418编码的对应氨基酸序列根据少孢节丛孢菌密码子偏好性进行密码子优化；将优化后的DNA序列在5’加上Ptef，3’加上Ttef，接着连接在pUC57载体上进行合成，获得Ptef‑G418‑Ttef的DNA模板；在使用时根据实验要求设计特异性引物进行PCR合成使用；使用同源重组‑原生质体转化法将G418导入少孢节丛孢菌。本发明为少孢节丛孢菌增加了一种新的抗性选择标记，可使原来对G418敏感的少孢节丛孢菌对其产生抗性，可对少孢节丛孢菌进行遗传基因操作，为研究少孢节丛孢菌的基因功能带来了巨大方便，而且费用低廉。
一种 g418 少孢节丛孢菌中遗传转化筛选体系建立方法

[发明专利]一种鸭ACE2基因真核表达质粒的构建方法以及在CHO稳定细胞系构建中的应用-CN202010727641.2在审
发明人：张源淑;李帅;王换换;叶平生;付亚丽;谢娜娜 -专利权人：南京农业大学
申请日： 2020-07-24 - 公布日： 2022-01-25 - 主分类号： C12N15/85 文献下载
摘要：本发明涉及可以表达外源鸭ACE2的重组质粒pcDNA3.1‑ACE2的构建以及鉴定，以及CHO细胞G418压力筛选浓度的确定，通过稳定转染将该重组质粒转染进CHO内，在G418压力筛选下，借助免疫荧光及
一种 ace2 基因表达质粒构建方法以及 cho 稳定细胞系中的应用

[发明专利]一种全基因组高通量克隆载体的构建-CN201910109486.5有效
发明人：翁炳焕;黄荷凤;马端 -专利权人：翁炳焕
申请日： 2019-02-05 - 公布日： 2021-04-23 - 主分类号： C12N15/867 文献下载
摘要：一种用于生物医学领域的全基因组高通量克隆载体的构建，其特征在于，构建含hTERT和SV40LT的逆转录病毒载体，转染PT67包装细胞，以G418和PM联合筛选获得质粒包装PT67细胞，提取其培养液，转染sp2/0细胞，再以G418和PM联合筛选获得高度永生化的质粒包装sp2/0细胞，能在植入外源性全基因组后经HAT、G418和PM联合筛选而获得可冻存和扩增全基因组的高度永生化的杂交株，用于罕见病全基因组的产业制备及其永生基因库的构建
一种基因组通量克隆载体构建

[发明专利]一种稳定表达VP1融合EGFP的单克隆细胞株的制备方法-CN201910575181.3在审
发明人：高凤山 -专利权人：大连大学
申请日： 2019-06-28 - 公布日： 2019-10-08 - 主分类号： C12N15/85 文献下载
摘要：本发明解决技术问题的技术方案包括以下步骤：培养细胞PK15、G418的适用浓度应为500μg/mL、将LipofectamineTM2000与pEGFP‑N1‑VP1质粒以1:1的比例转染至PK15细胞、G418筛选、弱酸洗脱得到SLA‑I类呈递肽。
单克隆细胞株稳定表达制备培养细胞弱酸洗脱疫苗技术融合呈递肽质粒转染

[发明专利]一种筛选高表达FAD-GDH重组毕赤酵母菌株的方法-CN202111133183.0在审
发明人：董聪;王玥;高庆华;罗同阳;王庆庆;刘攀 -专利权人：河北省微生物研究所有限公司
申请日： 2021-09-27 - 公布日： 2021-11-30 - 主分类号： C12N1/19 文献下载
摘要：包括如下步骤：通过依次使用Zeocin、G418及G418浓度梯度筛选，以增加重组菌中FAD‑GDH基因拷贝数。pPICZαA‑GDH电转入毕赤酵母X33构建重组子，使用Zeocin及试管发酵筛选获得毕赤酵母重组菌株X33‑GDH‑2，将其制成感受态；最后将pMD‑GDH电转入X33‑GDH‑2感受态细胞，利用G418结果表明，转入pMD‑GDH后100μg/mlG418平板上的转化子X33‑GDH‑2‑1酶活比X33‑GDH‑2提高94％；2000μg/mlG418梯度平板上菌株X33‑GDH‑2‑17酶活最高，比
一种筛选表达 fad gdh 重组酵母菌株方法

[发明专利]酵母G418为选择性标记的质粒的构建方法-CN200910095094.4无效
发明人：魏云林;谢莹莹;季秀玲;井申荣;林连兵 -专利权人：昆明理工大学
申请日： 2009-10-26 - 公布日： 2010-04-21 - 主分类号： C12N15/81 文献下载
摘要：一种以酵母G418为筛选标记的穿梭质粒构建方法，解决了目前酵母质粒多以营养缺陷型为筛选标记，难以在全营养型酵母菌基因工程改造中使用这一问题。本发明方法所构建的载体可使原来对G418敏感的酿酒酵母对其产生抗性，使全营养型酵母无需进行营养缺陷型诱变即可进行基因操作，缩短了基因改造时间。
酵母 g418 选择性标记质粒构建方法

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