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[发明专利]一种表达Cas9基因的转基因斑马鱼及其构建方法和应用-CN201810043624.X在审
发明人：崔恒宓;杨钰;杨哲;戴振清 -专利权人：扬州大学
申请日： 2018-01-17 - 公布日： 2018-07-06 - 主分类号： C12N15/85 文献下载
摘要：本发明涉及一种表达Cas9基因的转基因斑马鱼及其构建方法和应用。所述的表达Cas9基因的转基因斑马鱼，是在斑马鱼Mitfα基因中插入了Cas9基因。本发明利用CRISPR/Cas9转基因技术在色素基因Mitfα定点靶向构建了可表达Cas9基因的转基因斑马鱼，并利用色素消退作为筛选纯合敲除品系的标志。Cas9转基因斑马鱼与传统的CRISPR/Cas9技术在斑马鱼中的运用相比，具有更高的基因编辑效率；为大规模的基因筛选和疾病模型的建立提供了一个简单有效的工具。
转基因斑马鱼基因构建斑马鱼纯合敲除转基因技术基因敲除基因筛选疾病模型色素基因传统的色素靶向品系应用筛选

[发明专利]一种基于RPA-CRISPR/Cas12a检测大丽轮枝菌的引物和试剂盒及检测方法-CN202210526068.8在审
发明人：王强;秦铭;商文静;胡小平;黄卫利 -专利权人：西北农林科技大学;西安黄氏生物工程有限公司
申请日： 2022-05-16 - 公布日： 2022-07-22 - 主分类号： C12N15/11 文献下载
摘要：本发明提供了一种基于RPA‑CRISPR/Cas12a检测大丽轮枝菌的引物，包括RPA上游引物、RPA下游引物、crRNA1引物和Univ引物，依次如SEQIDNO:1‑4所示；还提供了试剂盒，包括基于RPA‑CRISPR/Cas12a检测大丽轮枝菌的引物、Cas12蛋白、T7转录酶、DNA聚合酶、缓冲液、Cas12/13专用核酸检测试纸条；还提供了检测方法：用RPA上、下游引物建立RPA反应体系的建立，得到RPA反应产物，合成指导RNA的DNA模板，合成指导RNA，用RPA反应产物和指导RNA建立CRISPR/Cas12a反应体系，得到RPA‑CRISPR/Cas12a反应产物，用Cas12/13专用核酸检测试纸条检测
一种基于 rpa crispr cas12a 检测大丽轮枝菌引物试剂盒方法

[发明专利]一种钢包自动吹氩的系统及方法-CN202211270720.0在审
发明人：谭永明;徐军;于合松 -专利权人：阳春新钢铁有限责任公司
申请日： 2022-10-17 - 公布日： 2022-12-30 - 主分类号： C21C7/072 文献下载
摘要：本发明提供了一种钢包自动吹氩的系统及方法，涉及炼钢技术领域，包括钢包、氩气管路和吹氩控制模块，所述吹氩控制模块电性连接有CAS精炼合金加料模块、CAS废钢加料模块和转炉摇炉角度模块，所述钢包设在加工位上，且加工位上的两端均分别设有钢水车在CAS精炼位信号模块、钢水车在出钢位信号模块，所述钢水车在CAS精炼位信号模块、钢水车在出钢位信号模块与吹氩控制模块电性连接；本发明通过各个模块检测钢水车在出钢位信号、检测转炉15摇炉角度、检测钢水车在CAS精炼位信号、检测CAS精炼加合金信号、检测CAS精炼加废钢信号、检测钢水车离开精炼位信号来控制吹氩和停止，全过程自动控制，能有效降低人员的操作强度。
一种钢包自动系统方法

[发明专利]Cas9融合蛋白及其编码序列-CN201610038907.6有效
发明人：李晓江;涂著池;杨伟莉;郭祥玉;李世华 -专利权人：广州元曦生物科技有限公司;中国科学院遗传与发育生物学研究所
申请日： 2016-01-20 - 公布日： 2017-08-18 - 主分类号： C12N9/22 文献下载
摘要：具体地，本发明提供了一种包括Cas9片段及Ubiquitin片段的Cas9融合蛋白及其编码序列。本发明一方面可以使得Cas9蛋白在胚胎细胞中发挥打靶作用之后迅速降解，从而降低了胚胎发育的嵌合突变效应。更重要的是，本发明所提供的Ubiquitin‑i‑Cas9(i为连接Ubiquitin和Cas9的连接子的首位氨基酸，其可以为精氨酸(R)或脯氨酸(P)或亮氨酸(L))蛋白可以提高基因打靶胚胎的纯合效率尤其是特别优选的Ubiquitin‑R‑Cas9蛋白，其对野生型Cas9蛋白基因打靶效率提高了3.51倍。这是技术人员预期之外的。
cas9 融合蛋白及其编码序列

[发明专利]功能化氧化石墨烯高效运载CRISPR/Cas9用于基因编辑的方法-CN201710719879.9有效
发明人：周小明;邢达;乐花花 -专利权人：华南师范大学
申请日： 2017-08-21 - 公布日： 2019-10-22 - 主分类号： C12N9/22 文献下载
摘要：本发明公开一种功能化氧化石墨烯高效运载CRISPR/Cas9用于基因编辑的方法。本发明的NGO‑PEG‑PEI/Cas9/sgRNA复合体是将氨基化PEG和PEI共价修饰到氧化石墨烯上，得到NGO‑PEG‑PEI；然后将Cas9蛋白和sgRNA在室温条件下组装成Cas9/sgRNA复合体；将NGO‑PEG‑PEI与Cas9/sgRNA复合体在室温条件下进行混合得到。本发明中功能化GO具有生物相容性好，负载效率高的的特点，能够高效运载Cas9/sgRNA复合体进细胞来执行其功能；且具有保护Cas9/sgRNA复合体免于酶降解的功能，稳定性高。
复合体功能化氧化石墨运载室温条件靶基因生物相容性氧化石墨烯负载效率共价修饰氨基化功能化酶降解基因蛋白组装细胞

[发明专利]基于CAS与第三方服务器实现登录认证的方法和系统-CN202110670836.2有效
发明人：石永刚;任翔 -专利权人：南京网觉软件有限公司
申请日： 2021-06-17 - 公布日： 2022-03-15 - 主分类号： H04L67/00 文献下载
摘要：本发明公开了一种基于CAS与第三方服务器实现登录认证的方法，CAS服务器将未通过认证的用户访问请求重定向到第三方服务器；第三方服务器向用户返回登录页面并接收用户发送的登录信息，对于登陆信息通过验证的，返回含有重定向到CAS服务器的信息给用户，用户重定向到CAS服务器；CAS服务器向第三方服务器验证用户是否通过认证，对于通过认证的，CAS服务器返回含有重定向到用户要访问的应用站点的信息给用户。本发明利用CAS和第三方服务器结合，能够解决现有技术中登录每个系统需要单独对接第三方认证的问题。
基于 cas 第三服务器实现登录认证方法系统

[发明专利]一种Cas12a变体及其在基因编辑中的应用-CN202110578385.X有效
发明人：殷雷;周进;陈鹏;王宏建;刘欢;方嘉凌 -专利权人：武汉大学
申请日： 2021-05-26 - 公布日： 2022-10-21 - 主分类号： C12N9/22 文献下载
摘要：本发明提供了一种Cas12a变体及其在基因编辑中的应用，所述Cas12a变体包括如下中的至少一种：Lb2Cas12a‑K518R，氨基酸序列分别如SED ID NO.1所示；LbCas12a‑K538R本发明首次通过蛋白改造，获得Cas12a变体，使Cas12a的PAM识别相比较对应野生型更严格，从而降低脱靶效应；所述三种Cas12a变体能够在crRNA的介导下定点对真核生物基因组进行基因编辑且具有更低的脱靶效应，三种Cas12a变体的发现进一步扩大了基因编辑工具的种类。
一种 cas12a 变体及其基因编辑中的应用

[发明专利]提高基因编辑效率的Cas9融合蛋白、编码基因及其应用-CN201910699618.4有效
发明人：郑雪莲;张勇;杨丽佳;唐旭 -专利权人：电子科技大学
申请日： 2019-07-31 - 公布日： 2022-12-09 - 主分类号： C07K19/00 文献下载
摘要：本发明属于基因工程技术领域，具体涉及一种提高基因编辑效率的Cas9融合蛋白、编码基因及其应用。本发明要解决的技术问题是提高CRISPR‑Cas9系统在基因组靶位点的编辑效率，尤其是提高在低活性靶位点上的编辑效率。本发明解决技术问题的技术方案是提供一种Cas9融合蛋白。该Cas9融合蛋白的碳端连接了一段来源于拟南芥泛素受体蛋白RAD23a的UBA2结构域。进一步的，本发明还提供了该Cas9融合蛋白的编码基因。基于本发明Cas9融合蛋白编码基因构建的CRISPR‑Cas9基因编辑系统能够有效的增加不同基因位点，特别是低效率位点的基因编辑效率。
提高基因编辑效率 cas9 融合蛋白编码及其应用

[发明专利]机顶盒条件接收系统的数据备份方法-CN202210178053.7有效
发明人：张弋戈;刘建华;沈建春;张令;张美青 -专利权人：杭州国芯科技股份有限公司
申请日： 2022-02-25 - 公布日： 2023-04-25 - 主分类号： H04N21/443 文献下载
摘要：本发明方法将flash划分出两个分区，每个分区包括CAS数据存储块和一个校验数据存储块。CAS数据写操作时，首先校验CAS分区的数据是否有效，若无效则将CASBACK分区数据拷贝到CAS分区里，然后将数据和校验码写入CASBACK分区，再写入CAS分区，并且完成一个写操作后，立即校验当前分区数据是否有效本发明方法保证了两个分区中至少有一个分区的CAS数据是有效的，便于重启时恢复CAS数据。
机顶盒条件接收系统数据备份方法

[发明专利]数字多媒体广播的移动条件接收系统客户端设备-CN200810176656.3无效
发明人：朴成镇;金承炫;禹锺贤 -专利权人：梦想视界技术有限公司
申请日： 2008-11-14 - 公布日： 2009-05-20 - 主分类号： H04H60/15 文献下载
摘要：本文提供了一种数字多媒体广播(DMB)条件接收系统(CAS)客户端设备，具体地说，提供了一种移动CAS客户端设备。该DMB CAS客户端设备用于接收由控制字(CW)加扰的DMB流以及加载了加密的CW的授权管理消息(EMM)和授权控制消息(ECM)，以向多媒体设备提供解扰的DMB流，该移动CAS客户端设备包括：微控制器单元(MCU)；用于连接多媒体设备的通用串行总线(USB)接口；用于存储CAS客户端库的存储器，该CAS客户端库包括使用CW来对加扰的DMB流进行解扰的解扰器；CAS安全芯片，用于从加密的ECM和EMM数据项中提取所述
数字多媒体广播移动条件接收系统客户端设备

[发明专利]低温VSW3 RNA聚合酶体外转录合成全长无中断cas9 mRNA的应用-CN201910440379.0在审
发明人：朱斌;夏恒;蒋怡心 -专利权人：武汉核圣生物技术有限公司
申请日： 2019-05-24 - 公布日： 2020-11-24 - 主分类号： C12N15/10 文献下载
摘要：本发明公开低温VSW3 RNA聚合酶体外转录合成全长无中断cas9 mRNA的应用，所述VSW3 RNA聚合酶体外转录合成全长无中断cas9 mRNA的过程包括以下步骤：(1)构建含VSW3 RNA聚合酶特异性启动子的cas9质粒；(2)PCR法制备转录模板；(3)VSW3 RNA聚合酶转录合成加帽cas9 mRNA；(4)模板DNA消除和mRNA加尾；运用VSW3 RNA聚合酶在低温下转录合成cas9 mRNA不仅能够提高RNA产物的稳定性，更重要的是该酶转录合成cas9 mRNA无中断RNA产物，提高了全长RNA的纯度，省掉分离除去中断RNA产物纯化步骤，减少纯化过程造成的损失，在保证RNA纯度的前提下提高cas9 mRNA产量，是满足cas9 mRNA大量合成需求，且能保证质量和降低生产成本的最佳选择。
低温 vsw3 rna 聚合体外转录合成全长中断 cas9 mrna 应用

[发明专利]Cas9蛋白双元表达载体及其构建方法、应用和转化系统-CN202110671005.7在审
发明人：付阳;谭琦;尚晓冬;宋春艳 -专利权人：上海市农业科学院
申请日： 2021-06-17 - 公布日： 2021-08-03 - 主分类号： C12N15/80 文献下载
摘要：本发明公开了一种Cas9蛋白双元表达载体及其构建方法、应用和转化系统，以双元表达载体GPiE‑egfp为基础，用优化的Cas9蛋白编码基因替换双元表达载体GPiE‑egfp的eGFP编码基因获得Cas9其具有能够在大肠杆菌和农杆菌中复制扩增的元件、能够携带外源基因的LB T‑DNA和RB T‑DNA、灵芝中组成型表达基因gpd的启动子Glgpdp和优化的Cas9蛋白编码基因，所述优化的cas9基因的N端包含Glgpd的第一个内含子和第一个外显子的前3个氨基酸编码序列共76个碱基和3×FLAG标签，同时在cas9基因的N端和C端各增加一个核定位信号编码序列NLS。本发明经密码子优化Cas9蛋白双元表达载体适合在丝状真菌香菇中表达Cas9蛋白。
cas9 蛋白表达载体及其构建方法应用转化系统

[发明专利]一种基于Cas13a和中介物介导的双级联循环激活无扩增快速检测RNA方法-CN202111009684.8在审
发明人：杨晓兰;曾宏威;胡小蕾 -专利权人：重庆医科大学国际体外诊断研究院
申请日： 2021-08-31 - 公布日： 2022-04-01 - 主分类号： C12Q1/682 文献下载
摘要：本发明建立一种基于Cas13a和中介物介导的双级联循环激活无扩增快速检测RNA方法，属于生物检测技术领域。设计优选Cas13a反式剪切中介物发夹结构及产物对应引导CrRNA。靶RNA识别并结合Cas13a/RNA1复合物，激活Cas13a高效反式剪切中介物发夹结构生成含脚趾的产物双链RNA2为次级靶；次级靶RNA2识别并激活Cas13a/RNA2复合物，循环剪切中介物发夹结构并累积激活Cas13a，累积活性Cas13a最终剪切报告RNA，由此实现双级联循环激活Cas13a无扩增快速检测RNA。
一种基于 cas13a 中介物介导级联循环激活扩增快速检测 rna 方法

[发明专利]一种新型CRISPR-Cas9系统载体及其应用-CN202110151816.4在审
发明人：刘旭;陈邵宏;史天永;郝丹丹 -专利权人：北京中因科技有限公司
申请日： 2021-02-04 - 公布日： 2022-08-05 - 主分类号： C12N15/867 文献下载
摘要：本发明实施例涉及生物技术领域，具体涉及一种新型CRISPR‑Cas9系统载体及其应用。本发明实施例提供的载体上依次包括下述功能元件：上游LoxP序列、sgRNA序列、Cas9蛋白、可诱导启动子、Cre重组酶、同向下游LoxP序列；其中，sgRNA序列和Cas9蛋白顺序可互换；sgRNA序列靶向目的基因本发明提供的载体，将CRISPR‑Cas9系统与Cre‑Loxp系统结合，充分发挥两套系统的基因敲除功能，将上游LoxP序列设置在CRISPR‑Cas9系统前；在CRISPR‑Cas9系统后依次设置可诱导启动子、Cre重组酶和下游同向LoxP序列；在CRISPR‑Cas9系统完成基因敲除或者基因敲入功能后，对可诱导启动子进行诱导，开始表达Cre重组酶，Cre‑Loxp系统启动，将上游LoxP序列和下游同向LoxP序列之间的功能元件敲除，彻底避免Cre‑Loxp系统和CRISPR‑Cas9系统过度剪切细胞基因组或引起免疫反应。
一种新型 crispr cas9 系统载体及其应用

[发明专利]工程化的Cas12i核酸酶及其效应蛋白以及用途-CN202211325001.4在审
发明人：李伟;周琪;陈阳灿;胡艳萍;王鑫阁;陈逸 -专利权人：中国科学院动物研究所;北京干细胞与再生医学研究院
申请日： 2021-05-27 - 公布日： 2023-03-28 - 主分类号： C12N9/22 文献下载
摘要：本申请提供了一种工程化的Cas12i核酸酶；其包含一种、两种、三种或四种以下基于参比Cas12i核酸酶的突变：(1)将参比Cas12i核酸酶中与PAM相互作用的一个或多个氨基酸替换为带正电的氨基酸；和/或(2)将参比Cas12i核酸酶中参与打开DNA双链的一个或多个氨基酸替换为带芳香环的氨基酸；和/或(3)将参比Cas12i核酸酶中位于RuvC结构域并与单链DNA底物相互作用的一个或多个氨基酸替换为带正电的氨基酸；和/或(4)将参比Cas12i核酸酶中与DNA‑RNA双螺旋相互作用的一个或多个氨基酸替换为带正电的氨基酸；尤其所述参比Cas12i核酸酶为天然Cas12i核酸酶，例如天然Cas12i2核酸酶，其氨基酸序列如
工程 cas12i 核酸酶及其效应蛋白以及用途