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[发明专利]一种蛋白质表达纯化的方法-CN202010506686.7在审
发明人：陈郑;郑兰花;洪礼清;蒋奎胜;刘仁源 -专利权人：东莞市东阳光诊断产品有限公司
申请日： 2020-06-05 - 公布日： 2020-09-15 - 主分类号： C07K19/00 文献下载
摘要：本发明涉及一种蛋白质表达纯化的方法，首先构建融合蛋白的表达载体：在目的蛋白的一端依次连接第一酶切位点、报告标记和第一纯化标签，另一端依次连接第二酶切位点、第二纯化标签；将该表达载体转入表达菌株进行表达培养，收集培养产物；根据第二纯化标签对产物进行纯化，然后对第一、第二酶切位点进行酶切；将酶切产物分别根据第一纯化标签、第二纯化标签进行纯化，即得到目标蛋白。该表达纯化方法增加了蛋白质的可溶性和产量，使得蛋白质的表达可视化；纯化步骤简单，在未增加纯化的流程的情况下，显著提高了目的蛋白的纯度。
一种蛋白质表达纯化方法

[发明专利]利用蓝藻铁氧还蛋白Fd直观检测目的蛋白表达纯化的方法-CN202210715402.4在审
发明人：韦佩君;李西莹;董春霞;赵进东 -专利权人：北京大学
申请日： 2022-06-23 - 公布日： 2022-09-13 - 主分类号： C12N15/70 文献下载
摘要：本发明公开了利用蓝藻铁氧还蛋白Fd直观检测目的蛋白表达纯化的方法。首先构建目的蛋白基因与蓝藻fd基因或其同源基因的融合基因，并将含该融合基因的表达载体转入表达菌种中进行表达，通过观察表达菌液破碎后的上清液和/或其纯化组分的颜色来判断融合蛋白是否被成功表达和/或纯化，如果上清液和/或纯化组分呈现棕红色，说明目的蛋白与蓝藻Fd蛋白或其同源蛋白一起被表达和/或纯化。该方法实现了对目的蛋白表达纯化的直观检测，准确性高，方便快捷，大大节省了常规验证目的蛋白成功表达纯化的时间。
利用蓝藻铁氧还蛋白 fd 直观检测目的表达纯化方法

[发明专利]利用蓝藻黄素蛋白FNR直观检测目的蛋白表达纯化的方法-CN201710908190.0有效
发明人：郑正高;董春霞;吉雅晴;李荣贵 -专利权人：青岛大学
申请日： 2017-09-29 - 公布日： 2020-10-02 - 主分类号： C12N15/62 文献下载
摘要：本发明公开了一种利用蓝藻黄素蛋白FNR直观检测目的蛋白表达纯化的方法，首先构建目的蛋白基因与蓝藻fnr基因或其同源基因的融合基因，并将含该融合基因的表达载体转入表达菌种中进行表达，通过观察表达菌液破碎后的上清液和/或其纯化组分的颜色来判断融合蛋白是否被成功表达和/或纯化，如果上清液和/或纯化组分偏黄色，说明目的蛋白与蓝藻FNR蛋白或其同源蛋白一起被表达和/或纯化。该方法实现了对目的蛋白表达纯化的直观检测，方便快捷。
利用蓝藻黄素蛋白 fnr 直观检测目的表达纯化方法

[发明专利]利用蓝藻蛋白RbrA直观检测目的蛋白表达纯化的方法-CN201710906063.7在审
发明人：郑正高;李西莹;董春霞;李荣贵 -专利权人：青岛大学
申请日： 2017-09-29 - 公布日： 2018-02-13 - 主分类号： C12N15/70 文献下载
摘要：本发明公开了一种利用蓝藻含铁紫红色蛋白RbrA直观检测目的蛋白表达纯化的方法，首先构建目的蛋白基因与蓝藻rbrA基因或其同源基因的融合基因，并将含该融合基因的表达载体转入表达菌种中进行表达，通过观察表达菌液破碎后的上清液和/或其纯化组分的颜色来判断融合蛋白是否被成功表达和/或纯化，如果上清液和/或纯化组分偏紫红色，说明目的蛋白与蓝藻RbrA蛋白或其同源蛋白一起被表达和/或纯化。该方法实现了对目的蛋白表达纯化的直观检测，方便快捷。
利用蓝藻蛋白 rbra 直观检测目的表达纯化方法

[发明专利]一种LPOR蛋白的表达纯化方法-CN201811023329.4在审
发明人：程奇;孙文丽 -专利权人：浙江善测禾骑士生物科技有限公司
申请日： 2018-09-03 - 公布日： 2019-01-15 - 主分类号： C12N9/02 文献下载
摘要：本发明公开了一种LPOR蛋白的表达纯化方法，具体包括LPOR蛋白的表达方法和LPOR蛋白的纯化方法，其中LPOR蛋白的表达方法包括：筛选LPOR基因的DNA序列、DNA序列的扩增、双酶切、LPOR表达载体构建、LPOR表达载体的筛选和LPOR蛋白表达；其中LPOR蛋白的纯化方法包括：His‑tag亲和层析、蛋白浓缩和凝胶过滤。本发明提供了一种LPOR蛋白的表达纯化方法，使得LPOR蛋白具有较高的活性，为其他光敏感超速蛋白的表达纯化提供实验技术，为光敏感超速蛋白的结构解析奠定基础；同时对彻底阐明和确定光敏感超速蛋白的催化机理或将其工程化奠定了基础
蛋白光敏感超速表达载体筛选催化机理蛋白表达蛋白浓缩结构解析凝胶过滤亲和层析实验技术工程化双酶切构建扩增基因

[发明专利]植物膜结合转录因子原核表达纯化的方法-CN202011279881.7在审
发明人：李晓娟;张原;鲁雨晴;边佳辉;姚晓敏;张耿;苏晓;刘佩佩 -专利权人：北京林业大学
申请日： 2020-11-16 - 公布日： 2021-02-05 - 主分类号： C12N15/70 文献下载
摘要：本发明公开了植物膜结合转录因子原核表达纯化的方法，包括如下步骤，步骤1：设计引物构建原核表达载体；步骤2：原核系统中蛋白的表达；步骤3：蛋白纯化。本发明在传统原核表达纯化的基础上，根据膜结合蛋白的蛋白结构与性质，优化了其纯化方法，并筛选了相应的诱导表达条件与纯化缓冲液配置方法，实现了对膜结合蛋白的原核高浓度纯化表达。
植物结合转录因子表达纯化方法

[发明专利]一种基因工程重组表达多肽的系统纯化方法-CN202110034679.6在审
发明人：徐展平;田竣元;何印波;黄娟;吴玉水 -专利权人：福建基诺厚普生物科技有限公司
申请日： 2021-01-12 - 公布日： 2021-05-18 - 主分类号： C12N1/06 文献下载
摘要：本发明公开了一种基因工程重组表达多肽的系统纯化方法，该纯化方法包括以下步骤：重组表达菌体的裂解、镍离子柱纯化方法、重组表达菌体的裂解的自裂解过程、疏水层析纯化步骤、反相色谱纯化步骤和切向流超滤浓缩。通过该基因工程重组表达多肽的系统纯化方法，可获得重组多肽的纯度高达97％以上。获得重组多肽的纯度高，非常适合工业化规模的量产。
一种基因工程重组表达多肽系统纯化方法

[发明专利]一种天蚕素抗菌肽的融合表达及其纯化方法-CN201911416552.X在审
发明人：苟兴华;何成霞;邹强;张琼 -专利权人：成都大学
申请日： 2019-12-31 - 公布日： 2020-04-03 - 主分类号： C12P21/00 文献下载
摘要：本发明公开了一种天蚕素抗菌肽的融合表达及其纯化方法，包括三个步骤，分别为天蚕抗菌肽的融合表达；融合表达产物的处理；融合蛋白的纯化。本发明采用自诱导融合表达的方式代替目前常用的IPTG诱导，大大的提高融合蛋白的表达量，因IPTG价格过高，采用自诱导的方式降低成本；采用融合蛋白变性直接上样纯化、洗脱复性的方式纯化目标蛋白，精简纯化步骤缩短了纯化工艺路线，节约时间节约成本；提高了纯化效率和收益，其纯度高于90％时纯化收率大于50％，更加适合于产业化生产，效果更加显著。
一种天蚕抗菌融合表达及其纯化方法

[发明专利]一种人参TCTP蛋白的真核表达和纯化方法-CN202210982976.8在审
发明人：马兆成;邓文俊 -专利权人：华中农业大学
申请日： 2022-08-16 - 公布日： 2023-03-03 - 主分类号： C07K14/415 文献下载
摘要：本发明涉及一种人参TCTP蛋白的真核表达和纯化方法，属于蛋白真核表达技术领域。本发明提供了一种人参TCTP蛋白的真核表达和纯化方法，包括重组表达载体构建，毕赤酵母表达菌株构建、重组酵母转化子和重组高拷贝菌株筛选、蛋白诱导表达和纯化的步骤。本发明所述方法能够实现TCTP蛋白的高效表达，得到的TCTP蛋白生物活性高、毒性低。
一种人参 tctp 蛋白表达纯化方法

[发明专利]一种融合型原核表达载体及其构建方法和应用-CN201310119918.3有效
发明人：华权高;马峰;沈鹤霄;舒芹;易汪雪 -专利权人：武汉华美生物工程有限公司
申请日： 2013-04-08 - 公布日： 2013-07-10 - 主分类号： C12N15/70 文献下载
摘要：本发明公开了一种融合型原核表达载体及其构建方法和应用，包括：启动子、纯化标签基因、蛋白酶切割位点、多克隆位点和终止子；其中，在纯化标签基因和蛋白酶切割位点之间连接有β2微球蛋白基因。本发明融合型原核表达载体中带有β2微球蛋白（β2M）基因，将不易表达的外源蛋白连接在β2M基因的下游，使表达载体在表达不易表达的外源蛋白时能充分利用β2M基因的优良特性，使外源蛋白在宿主细胞中高效表达，且利于后期目标蛋白的复性及分离纯化。此外，本发明融合型原核表达载体中带有纯化标签和酶切位点，也有利于蛋白表达完成之后的分离纯化，也有利于纯化标签以及β2M蛋白的去除，获得更加接近天然序列的目的蛋白。
一种融合型原核表达载体及其构建方法应用

[发明专利]一种WTX及其截短子重组蛋白的表达和纯化方法及其在相分离实验中的应用-CN202211499430.3在审
发明人：徐阳微;李燕燕;钱雪霞;张庆玲 -专利权人：广东省人民医院
申请日： 2022-11-28 - 公布日： 2023-06-30 - 主分类号： C07K14/47 文献下载
摘要：本发明一种WTX及其截短子重组蛋白的表达和纯化方法及其在相分离实验中的应用，属于重组蛋白表达与纯化技术领域。该表达和纯化方法包括：(1)WTX及其截短子重组蛋白表达；(2)WTX及其截短子的纯化，其中，在纯化过程中采用的细胞裂解液组成包括Native binding buffer缓冲液、溶菌酶、蛋白酶抑制剂、本发明为WTX蛋白的纯化提供一个快速高效简便的纯化方法，获得纯度高、生物学活性好的WTX蛋白。
一种 wtx 及其截短子重组蛋白表达纯化方法分离实验中的应用

[发明专利]一种用于纯化蛋白的表达载体-CN201711489413.0有效
发明人：王天泽;郝淑静 -专利权人：北京中科唯新生物医学研究所有限公司
申请日： 2017-12-30 - 公布日： 2020-12-15 - 主分类号： C07K19/00 文献下载
摘要：本发明提供了一种用于纯化蛋白的表达载体，上述表达载体包括S100蛋白家族基因编码序列以及其他载体元件，上述S100蛋白家族基因编码序列位于能够正常表达的区域。本发明提供了一种用于纯化蛋白的表达载体，以至少解决现有技术中用于纯化蛋白的表达载体操作复杂成本高的技术问题，本发明提出的新的纯化蛋白的表达载体，操作方便，成本低，纯化效果好。
一种用于纯化蛋白表达载体

[发明专利]猫干扰素γ的可溶性原核表达和纯化方法及应用-CN202110426900.2有效
发明人：魏衍全;张勇;成述儒;武小椿;任丽君 -专利权人：甘肃农业大学
申请日： 2021-04-20 - 公布日： 2023-01-03 - 主分类号： C07K14/57 文献下载
摘要：本发明提供了猫干扰素γ的可溶性原核表达和纯化方法及应用，属于生物基因工程领域。该方法包括的步骤有：⑴FeIFN‑γ蛋白的信号肽序列和理化性质分析；⑵原核表达质粒pET28a‑SUMO‑FeIFN‑γ的构建；⑶含重组质粒的BL21细菌的诱导表达与重组蛋白的可溶性分析；⑷SUMO‑FeIFN‑γ融合蛋白最佳表达条件的筛选；⑸SUMO‑FeIFN‑γ融合蛋白的大量表达和纯化；⑹SUMO‑FeIFN‑γ融合蛋白的酶切和纯化。本发明克隆不包含信号肽的成熟蛋白基因序列，构建了原核表达质粒，并转化BL21感受态细胞进行表达和纯化，使用了带有SUMO助溶标签的pET28a‑SUMO表达载体，从而实现了目的蛋白的可溶性表达，外源蛋白的可溶性表达水平高，具备很高的生物学活性，纯化步骤简便，为后期抗病毒药物的开发奠定了基础。
干扰素可溶性表达纯化方法应用

[发明专利]重组人淀粉样多肽Aβ42的简易可溶性表达纯化方法-CN200910055489.1无效
发明人：蔡建华;邓益斌;江腾;周平 -专利权人：复旦大学
申请日： 2009-07-28 - 公布日： 2011-02-09 - 主分类号： C12N15/70 文献下载
摘要：本发明属于生物技术领域，提供了一种重组人淀粉样多肽Aβ42的简易可溶性表达纯化方法，包括重组载体构建、转化与筛选、表达与纯化。具体步骤如下：(1)将6His-SUMO-Aβ42融合基因的核苷酸编码序列插入表达载体的多克隆位点，获得重组表达载体质粒；(2)将(1)获得的重组表达载体质粒转入大肠杆菌表达菌株，得到能与分子伴侣共表达的Aβ42原核表达菌株；(3)诱导SUMO-Aβ42融合蛋白和分子伴侣的表达，过柱纯化。本发明实现了疏水性Aβ42多肽的可溶性表达，并且纯化步骤简单、生产效率高、成本低廉，为AD疾病致病机理和相应药物开发的研究提供了很好的基础。
重组淀粉多肽 42 简易可溶性表达纯化方法

[发明专利]一种人重组WRN蛋白及其表达和纯化的方法-CN202210415573.5在审
发明人：王永辰;彭鹏 -专利权人：药捷安康（南京）科技股份有限公司
申请日： 2022-04-19 - 公布日： 2022-10-21 - 主分类号： C12N9/14 文献下载
摘要：本发明属于生物技术领域，具体涉及一种人重组WRN蛋白及其表达和纯化的方法，本发明提供的人重组WRN蛋白，具有显著的DNA解旋功能，可以用于人重组WRN抑制剂的筛选和评价，人重组WRN蛋白的表达和纯化方法包括人重组WRN蛋白表达长度设计、细胞表达载体的构建、人重组WRN蛋白的表达、人重组WRN蛋白的纯化以及人重组WRN蛋白的鉴定等步骤。
一种重组 wrn 蛋白及其表达纯化方法

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