本发明公开了一种重组大肠杆菌及制备磷脂酶C的方法和大豆毛油脱胶方法,其中,制备磷脂酶C的方法是通过如下步骤完成的:(1)以保藏编号为GIM1.142(ATCC6538)的金黄色葡萄球菌的基因组DNA为模板,克隆得到磷脂酶C基因,其碱基序列如SEQ ID NO:1所示;(2)将(1)所得的磷脂酶C基因克隆到pET-28a(+)表达载体上,构建得到重组的表达质粒;(3)将(2)所得的重组质粒转化大肠杆菌BL21本发明采用重组大肠杆菌所产磷脂酶C作为催化剂,酶来源方便,产量高,发酵工艺简单且成本低;磷脂酶C脱胶与传统酶法脱胶相比,能缩短反应时间,且降低了中性油的损耗,提高精炼率,在油脂工业领域有一定应用前景。
本发明提供了一种番茄磷脂酶SlPLDδ,所述番茄磷脂酶SlPLDδ的核苷酸序列如SEQ ID NO.1所示。本发明还提供了所述番茄磷脂酶SlPLDδ在耐低钾胁迫中的应用,通过过表达以及RNA干扰技术调控了SlPLDδ在番茄中的表达水平,改变了番茄植株在低钾胁迫下根系以及叶片的生长,进而影响番茄果实品质。本发明通过克隆番茄磷脂酶SlPLDδ并构建过表达以及沉默转基因材料,揭示了磷脂酶SlPLDδ对番茄低钾耐性的调控作用,为提高番茄等果菜类蔬菜的低钾耐性提供了一条有效途径,对于丰富蔬菜作物耐低钾性状遗传调控网络