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[发明专利]基于Q-6XL和4FF的腺病毒载体规模化纯化方法-CN202010154302.X在审
发明人：胡利明;王弘扬;黄映辉;马羚;张霖 -专利权人：北京工业大学
申请日： 2020-03-07 - 公布日： 2020-06-19 - 主分类号： C12N7/02 文献下载
摘要：基于Q‑6XL和4FF的腺病毒载体规模化纯化方法涉及腺病毒载体纯化领域，特别设计了基于Q‑6XL和4FF串联的规模化腺病毒纯化方案,旨在提高腺病毒载体制备的效率和纯度，最终提高腺病毒制剂的产量和质量。病毒发酵液经过离心、冻融、PEG浓缩、置换缓冲液等工艺处理后，首先采用Q‑6XL阴离子交换层析除去病毒发酵液中的宿主蛋白、宿主DNA，获得腺病毒粗纯液。然后采用4FF凝胶过滤层析(分子筛)对病毒粗纯液进行精纯，最终得到高纯度的腺病毒载体。特别的是，本方法适用于腺病毒载体规模化纯化。满足了临床阶段对于高纯度腺病毒载体用量日益增加的需求。
基于 xl ff 病毒载体规模化纯化方法

[发明专利]一种从商陆中提取纯化商陆抗病毒蛋白的方法-CN201910384278.6在审
发明人：张春发;黄超;秦人胜;邓柳红;高海波;陈吉良;王胜 -专利权人：江苏森瑞谱生物制药有限公司
申请日： 2019-05-09 - 公布日： 2019-07-16 - 主分类号： C12N9/24 文献下载
摘要：本发明属医药领域，涉及一种从商陆中提取纯化商陆抗病毒蛋白的方法，是取商陆叶片提取总蛋白后用硫酸铵盐析出得到商陆抗病毒粗蛋白，将商陆抗病毒粗蛋白溶解于Tris‑HCl缓冲液后，采用阴离子交换层析、阳离子交换层析进一步纯化，洗脱得到商陆抗病毒蛋白溶液，超滤浓缩，真空冷冻干燥得到纯度大于或等于99％的商陆抗病毒蛋白。本发明采用盐析粗纯化后进行阴离子交换层析、阳离子交换层析进一步纯化的工艺路径，获得纯度大于或等于99％的商陆抗病毒蛋白，解决了现有技术中提取商陆抗病毒蛋白的纯度低及缺乏高纯度商陆抗病毒蛋白对照品和标准品的问题
商陆抗病毒蛋白商陆阳离子交换层析阴离子交换层析提取纯化粗蛋白抗病毒真空冷冻干燥提取总蛋白析出超滤浓缩工艺路径临床应用硫酸铵盐医药领域标准品对照品高纯度缓冲液洗脱盐析叶片溶解

[发明专利]一种刺参球形病毒的分离方法-CN201010273964.5无效
发明人：郑风荣;刘洪展;孙修勤;张进兴;李继业 -专利权人：国家海洋局第一海洋研究所
申请日： 2010-09-04 - 公布日： 2011-01-19 - 主分类号： C12N7/00 文献下载
摘要：本发明涉及一种刺参球形病毒的分离方法。其特征在于包括刺参球形病毒粗提液的制备和高纯度的刺参球形病毒溶液制备两个步骤：刺参球形病毒粗提液的制备步骤是将携带刺参球形病毒的组织低温下研磨，用含抗生素的灭菌过滤海水冲洗后差速离心制得粗提液；高纯度的刺参球形病毒溶液制备步骤是将制得的粗提液用密度梯度离心方法分离得到病毒沉淀，将沉淀用TNE或PBS缓冲液溶解后制得高纯度的刺参球形病毒溶液。本发明的特点是过程简单、成本低，可大量获得刺参球形病毒材料，以满足刺参疾病的早期诊断、预防和治疗的病毒材料的需求。
一种刺参球形病毒分离方法

[发明专利]一种大规模生产高纯度猪圆环病毒ORF2蛋白的方法-CN201710537620.2有效
发明人：周明光;范金秀;陈波;徐高原;金建云 -专利权人：武汉科前生物股份有限公司
申请日： 2017-07-04 - 公布日： 2021-02-05 - 主分类号： C07K14/01 文献下载
摘要：本发明属于疫苗制备技术领域，具体涉及一种大规模生产高纯度猪圆环病毒ORF2蛋白的方法。所述方法包括：取猪圆环病毒ORF2蛋白培养液，加入少量壳聚糖摇匀后自然沉降，吸取上清利用中空纤维柱澄清过滤，再利用离子交换柱进行离子交换，洗脱液经G25层析柱脱盐、除菌过滤后，即得高纯度猪圆环病毒ORF2本发明通过化学试剂沉降，澄清过滤，离子交换，层析柱脱盐等工艺，实现了大规模(500L～1000L)高效生产制备高纯度猪圆环病毒ORF2蛋白，高纯度猪圆环病毒ORF2蛋白的回收率可达99.46％，杂蛋白去除率高达
一种大规模生产纯度圆环病毒 orf2 蛋白方法

[发明专利]病毒纯化放大方法-CN201511016482.0在审
发明人：范洁;姜东秀;塞伦苏;刘大钧 -专利权人：苏州药明康德检测检验有限责任公司;无锡药明康德生物技术股份有限公司
申请日： 2015-12-30 - 公布日： 2016-03-23 - 主分类号： C12N7/02 文献下载
摘要：本发明公开了一种病毒纯化放大方法，步骤包括：1)去除病毒中的细胞碎片；2)采用层析法捕获病毒；3)用核酸酶处理步骤2)捕获的病毒，酶解病毒中的宿主细胞核酸；4)对步骤3)处理后的病毒进行精细纯化，去除宿主细胞蛋白本发明应用层析法实现病毒纯化放大，并在层析柱、层析填料方面进行优化，相较于传统病毒纯化方法，不仅提高了纯化后的病毒纯度和滴度，而且具有易放大、成本低的优点；所得低残留、高纯度、高滴度的病毒运用到病毒清除验证中，可增加病毒过滤膜的通量，降低病毒过滤膜的成本投入。
病毒纯化放大方法

[发明专利]生产高效价、高纯度的病毒母液的方法及使用其的方法-CN201180018931.9有效
发明人：戴蒙·R·亚瑟;亚曼达·B·卡兹;纳维德·Z·坎恩;乌许玛·梅塔 -专利权人： EMD密理博公司
申请日： 2011-04-08 - 公布日： 2017-12-05 - 主分类号： C12N7/02 文献下载
摘要：用于病毒清除研究的病毒母液的纯度和效价对研究结果具有重要影响，且影响缩尺模型可以多好地代表生产规模方法。病毒母液中的杂质在测试小病毒保持性过滤器的过程中尤为重要，因为这些杂质可能引起过滤器过早地结垢，导致过滤器的真实通量能力被低估以及随后对生产规模单元的尺寸确定不当。另外，杂质也可通过改变结垢机制以及随后经过病毒过滤器的流体传递来影响所观察到的病毒清除程度。本文描述制备、生产和使用具有高效价的高纯度病毒母液的方法。
生产高效纯度病毒母液方法使用

[发明专利]一种大规模获得高纯度、高活性慢病毒的工艺方法-CN201510523086.0在审
发明人：易丹;吕斌;谢昌彬;宋侠侠 -专利权人：深圳市百恩维生物科技有限公司
申请日： 2015-08-24 - 公布日： 2016-01-06 - 主分类号： C12N7/02 文献下载
摘要：本发明提供一种大规模获得高纯度、高活性慢病毒的工艺方法，包括以下几个步骤：步骤A:收集慢病毒原液，过滤去除细胞碎片，澄清后的样品用于DEAE弱阴离子纯化柱上样；步骤B:通过DEAE弱阴离子纯化柱纯化；步骤C:将收集的初纯病毒液加入超滤系统样品杯，再通过凝胶过滤纯化柱纯化；步骤D:用过滤除菌，取适量样品进行纯度检测，感染滴度检测。本发明的有益效果是：通过初级纯化和精细纯化工艺，获得高纯度慢病毒颗粒，达99%以上；可实现更高的浓缩倍数；处理量大，实现规模化生产；采用改良的离子交换层析缓冲液，能保证终产物的高活性，减少纯化过程中慢病毒的失活
一种大规模获得纯度活性病毒工艺方法

[发明专利]一种分离纯化高纯度猪圆环病毒Cap蛋白的层析方法-CN201610850930.5在审
发明人：刘为涛;易国军 -专利权人：武汉汇研生物科技股份有限公司
申请日： 2016-09-26 - 公布日： 2017-02-22 - 主分类号： C07K14/01 文献下载
摘要：本发明涉及一种分离纯化高纯度猪圆环病毒Cap蛋白的层析方法，包括以下步骤：S1：将表达猪圆环病毒Cap蛋白的昆虫细胞破碎离心后，取上清用孔径为0.45μm的滤膜过滤，得到包含猪圆环病毒Cap蛋白的原样品液；S2：使原样品液通过弱阴离子交换层析，得到第一纯化液；S3：使第一纯化液通过强阳离子交换层析，得到第二纯化液；S4：使第二纯化液经历凝胶过滤层析，得到高纯度猪圆环病毒Cap蛋白溶液。该方法可去除从表达猪圆环病毒Cap蛋白的昆虫细胞得到的粗原样品液中的DNA、色素和宿主细胞蛋白，并且将猪圆环病毒Cap蛋白大大浓缩，从而得到高纯度、高浓度的猪圆环病毒Cap蛋白，有利于提高Cap蛋白的免疫原性和反应原性
一种分离纯化纯度圆环病毒 cap 蛋白层析方法

[发明专利]含人类免疫缺陷病毒RNA片段的假病毒颗粒及其制备方法-CN201710058509.5有效
发明人：乐小炎;彭春梅;邓可基;张晓玮;李家导;张嘉;李海茵;林志豪;林敏深;林若琳;谢丽娟;罗园香;石壮壮;王法;王星;张新;莫静嫣;陈观芝;陈凤英 -专利权人：广州海力特生物科技有限公司
申请日： 2017-01-23 - 公布日： 2020-07-28 - 主分类号： C12N15/70 文献下载
摘要：本发明公开了一种含人类免疫缺陷病毒RNA片段的假病毒颗粒的制备方法，其制备步骤是：1）制备含MS2基因序列的克隆质粒；2）筛选HIV基因保守序列，制备HIV克隆质粒；3）双质粒共转染，诱导表达假病毒颗粒该制备方法制备的假病毒包装效率得到显著提高，稳定性好，可以长时间保存，纯度高，含有高纯度的RNA而不含有DNA，适合大规模的生产和应用。
人类免疫缺陷病毒 rna 片段颗粒及其制备方法

[发明专利]一种分离纯化高纯度猪圆环全病毒疫苗的层析方法-CN201810833541.0在审
发明人：易国军;刘为涛;肖胜杰;岳平;汤志敏 -专利权人：武汉汇研生物科技股份有限公司
申请日： 2018-07-26 - 公布日： 2018-12-21 - 主分类号： C12N7/02 文献下载
摘要：本发明涉及一种分离高纯度猪圆环全病毒疫苗的层析方法，包括以下步骤：S1将悬浮培养的猪圆环全病毒收获液离心取上清经过孔径为0.45μm的滤膜过滤，调节滤液pH，得到待纯化样品液；S2将待纯化样品液经阴离子交换层析，得到高纯度猪圆环全病毒疫苗。用本发明的层析方法纯化猪圆环全病毒疫苗的纯化效率提高数百倍，节省了生产成本，且工艺简单稳定，易于快速放大生产。
圆环全病毒疫苗高纯度样品液层析阴离子交换层析层析方法纯化放大生产分离纯化滤膜过滤悬浮培养全病毒收获液生产成本

[发明专利]可用于转导真核细胞的基于病毒的载体组合物-CN201911037487.X在审
发明人： P.布耶;H.韦尼奥;R.加永;Y.莫阿尔 -专利权人：韦克塔里斯公司
申请日： 2012-07-26 - 公布日： 2020-01-14 - 主分类号： C12N7/02 文献下载
摘要：本发明提供高滴度和纯度的病毒载体组合物，以及用于生产所述组合物的方法。本发明的方法包括多种特征，例如在无血清培养基中生产病毒载体颗粒，和在转导生产细胞后的多个收获步骤，其提供了增强的所述病毒载体的生产。本发明的病毒载体组合物，由于它们的高滴度和纯度，使在靶细胞转导后通常发生的有害的表型变化如转导细胞的亚群的损失，和对转导细胞的增殖、分化、重编程或功能性的影响减到最少。
病毒载体高滴度转导病毒载体颗粒无血清培养基表型变化生产细胞转导细胞靶细胞重编程对转亚群生产增殖分化细胞收获

[发明专利]可用于转导真核细胞的基于病毒的载体组合物-CN201280047202.0在审
发明人： P.布耶;H.韦尼奥;R.加永;Y.莫阿尔 -专利权人：韦克塔里斯公司
申请日： 2012-07-26 - 公布日： 2014-06-04 - 主分类号： C12N7/02 文献下载
摘要：本发明提供高滴度和纯度的病毒载体组合物，以及用于生产所述组合物的方法。本发明的方法包括多种特征，例如在无血清培养基中生产病毒载体颗粒，和在转导生产细胞后的多个收获步骤，其提供了增强的所述病毒载体的生产。本发明的病毒载体组合物，由于它们的高滴度和纯度，使在靶细胞转导后通常发生的有害的表型变化如转导细胞的亚群的损失，和对转导细胞的增殖、分化、重编程或功能性的影响减到最少。
用于转导真核细胞基于病毒载体组合

[发明专利]使用亲和色谱法的用于疫苗病毒的纯化方法-CN201980079874.1在审
发明人：柳在林;蔡珍娥;郑恩朱;李东亿 -专利权人：怡诺安有限公司
申请日： 2019-12-19 - 公布日： 2021-07-23 - 主分类号： C12N7/00 文献下载
摘要：本公开涉及使用亲和色谱法的用于疫苗病毒的分离和纯化方法，并且更具体地，涉及一种能够使用含有疫苗病毒亲和树脂的亲和色谱法来获得高纯度且高产率的疫苗病毒的用于病毒的纯化方法。
使用亲和色谱用于疫苗病毒纯化方法

[发明专利]黄芩素的提取工艺、药用组合物及制剂制备工艺-CN200310110338.4有效
发明人：冯锋;柳文媛;郭青龙;柯学;尤启冬 -专利权人：中国药科大学
申请日： 2003-12-31 - 公布日： 2004-12-22 - 主分类号： C07D311/30 文献下载
摘要：本发明涉及高纯度的黄芩素、其药物组合物、制备方法和医药用途，该高纯度的黄芩素按重量百分比计算含黄芩素为90％以上，另有汉黄芩素、千层纸素和白杨素等化合物；本发明的黄芩素及其药物组合物临床上用于治疗各种病毒感染的疾病，如肝炎、病毒性感冒、病毒感染引起的急性呼吸道综合症等。
黄芩提取工艺药用组合制剂制备

[发明专利]静注巨细胞病毒人免疫球蛋白及其制备方法-CN201110223760.5有效
发明人：张运佳;郭采平;丁玉江;宋清爽;张信;王锦才;吴恩应;张佩;陈玉琴;李慧;黄伟荣;戴美兰;张彦鹏;王春华;罗姗;黄倩云;刘永娣;吴开永 -专利权人：深圳市卫武光明生物制品有限公司
申请日： 2011-08-05 - 公布日： 2011-12-21 - 主分类号： C07K16/08 文献下载
摘要：本发明公开了一种静注巨细胞病毒人免疫球蛋白及其制备方法，要解决的技术问题是提高产品的纯度、收率及安全性。本发明的静注巨细胞病毒人免疫球蛋白比活性不小于2.5PEI-U/mg，抗-CMV效价不小于100PEI-U/ml，纯度大于98.2％，蛋白含量为51～55mg/ml。本发明采用辛酸沉淀、阴离子交换层析代替传统低温乙醇法部分乙醇沉淀步骤，将IgG始终保留在上清液中，以保持IgG的活性；采用辛酸病毒灭活与纳米膜除病毒工艺，有效地保障产品的安全性，研究表明本发明的制备方法不仅提高了产品纯度
巨细病毒免疫球蛋白及其制备方法

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