本申请涉及双链特异性核酸酶,特别涉及双链特异性核酸酶变体及其应用。本申请的双链特异性核酸酶突变体的氨基酸序列与SEQ ID NO:1所示序列相比,具有一个或多个氨基酸取代,取代位点包括第95位、第104位、第107位、第111位、第326位和第327位中至少一个。本申请的双链特异性核酸酶变体与现有的DSN相比,活性更高;极大的推动了低成本、高效获取高活性DSN的工业化进程。
本发明公开了一种Yep非特异性核酸酶、基因、载体、工程菌及应用,所述Yep非特异性核酸酶,所述酶的氨基酸序列如SEQ ID NO:2所示;本发明所述的Yep非特异性核酸酶能降解各类PCR扩增产物,单链、双链、线状、环状和超螺旋形式的DNA和RNA,且具有广泛的适用性:耐酸碱、耐冷热、耐化学物质,为该核酸酶的工业化应用打下基础。
本发明涉及双链特异性核酸酶,特别涉及双链特异性核酸酶变体及其应用。所述双链特异性核酸酶变体的氨基酸序列与SEQ ID NO:1相比,具有一个或多个氨基酸取代;所述氨基酸取代的位点选自第32位、第56位、第91位、第146位、第162位、第247位、第326位或其组合。本发明的双链特异性核酸酶变体与北极虾野生型DSN相比,活性更高;本发明的可溶表达的双链特异性核酸酶变体则解决了野生型DSN在原核表达系统中难以可溶表达的问题,进一步提高了DSN的可溶表达水平和活性;极大的推动了低成本