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[发明专利]一种谷氨酸棒状杆菌及其应用-CN202111165962.9在审
发明人：金慈;鲍杰;张明明;刘修才 -专利权人：上海凯赛生物技术股份有限公司;CIBT美国公司
申请日： 2021-09-30 - 公布日： 2023-04-04 - 主分类号： C12N15/77 文献下载
摘要：所述基因工程菌包括包含启动子和xylAB基因的表达盒、或包含启动子和xylAB基因的表达盒A与包含启动子和PntAB基因的表达盒B的表达盒组合，所述基因工程菌的出发菌为谷氨酸棒状杆菌，所述基因工程菌过表达所述表达盒或表达盒组合中的基因所述基因工程菌取得了比高表达其他赖氨酸合成促进基因或敲除赖氨酸合成抑制基因的基因工程菌显著更好的发酵效果。当使用含有葡萄糖和木糖的秸秆水解液，本发明的基因工程菌的赖氨酸产量比出发菌明显提升。
一种谷氨酸杆菌及其应用

[发明专利]重组鱼类干扰素的工程菌及其产物的制备方法-CN201810658535.6在审
发明人：胡向东;项黎新;叶茂 -专利权人：浙江皇冠科技有限公司
申请日： 2018-06-25 - 公布日： 2018-12-14 - 主分类号： C12N1/19 文献下载
摘要：本发明公开了重组鱼类干扰素的工程菌及其产物的制备方法，该工程菌的构建方法为：从草鱼中克隆出干扰素基因，将其克隆入表达质粒，得到重组表达质粒，再通过电转化法导入酿酒酵母，成功表达出草鱼干扰素重组蛋白。工程菌产物的制备方法：将工程菌活化后进行一级种、二级种摇瓶培养、酵罐培养，然后加入IPTG诱导培养，培养结束后收集菌体，用蒸馏水清洗后经细胞破碎、低温干燥、粉碎后制得的粉剂制品即为工程菌产物。有益效果为：本发明工程菌能成功、高效表达出鱼干扰素重组蛋白，工程菌产物‑重组鱼类干扰素的产量高，GcIFN基因易于诱导表达且表达稳定性，不需要进行纯化即可应用。
工程菌鱼类干扰素制备重组蛋白克隆重组表达质粒干扰素草鱼干扰素干扰素基因蒸馏水清洗表达质粒低温干燥电转化法粉剂制品高效表达酿酒酵母收集菌体细胞破碎摇瓶培养诱导表达二级种草鱼构建活化酵罐成功基因应用

[发明专利]一种脂肪酶、工程菌及其制备方法-CN201410545136.0在审
发明人：闫云君;刘子敏;王桂龙;徐莉;潘笃杰 -专利权人：深圳华中科技大学研究院;华中科技大学
申请日： 2014-10-15 - 公布日： 2015-04-01 - 主分类号： C12N9/20 文献下载
摘要：本发明公开了一种脂肪酶、工程菌及其制备方法。所述脂肪酶，其基因序列为由SEQ ID No.1所示的基因序列，或其同源的功能相同的基因序列。所述工程菌其宿主菌为毕赤酵母，在His位点处插入有所述的脂肪酶的基因序列。工程菌的制备方法为：(1)构建脂肪酶基因表达载体；(2)构建分子伴侣组合基因表达载体；(3)制备脂肪酶表达转基因工程菌；(4)制备脂肪酶高表达工程菌。利用所述工程菌制备脂肪酶的步骤为：A、活化获取种子液；B发酵罐发酵；C离心，收集上清液。所述脂肪酶，在工程菌中异源表达量，具有外泌性，单位酶活高，生产方便，具有良好的经济效益。
一种脂肪酶工程及其制备方法

[发明专利]一种生产木糖异构酶的方法-CN201210251839.3无效
发明人：张爱联;尹慧祥;易国辉 -专利权人：中国热带农业科学院热带生物技术研究所
申请日： 2012-07-09 - 公布日： 2012-10-24 - 主分类号： C12N9/90 文献下载
摘要：首先克隆栖热菌、链霉菌和大肠杆菌的木糖异构酶基因；构建含以上三种木糖异构酶基因表达框架的毕赤酵母表达载体、酿酒酵母表达载体和枯草芽孢杆菌表达载体，并将载体分别转化相对应的宿主菌；分别筛选高表达木糖异构酶的重组子作为工程菌；发酵毕赤酵母工程菌、酿酒酵母工程菌和枯草芽孢杆菌工程菌生产重组混合木糖异构酶。与传统的由单基因编码的木糖异构酶不同，本发明生产的重组混合木糖异构酶的适合反应的温度和pH范围广，适合于多种用途；并且，含多基因表达框架的工程菌表达的木糖异构酶的产量明显高于含单基因的工程菌表达的木糖异构酶的产量
一种生产木糖异构酶方法

[发明专利]液体深层发酵转基因工程菌生产人或动物金属硫蛋白制品的方法-CN01128543.5无效
发明人：黄宏科;严斌;李廷宝 -专利权人：湖南省润农实业有限公司
申请日： 2001-08-13 - 公布日： 2003-03-26 - 主分类号： C12P21/00 文献下载
摘要：本发明涉及一种液体深层发酵转基因工程菌生产人或动物金属硫蛋白(MT)制品的方法，该方法是将转基因工程菌通过液体深层发酵，大量培养表达人或动物MT的重组工程菌，进而通过粗滤去渣、离心洗涤、制取表达目的MT的重组工程菌活菌冻干制品；或将离心洗涤的重组工程菌经聚电解质络合，制取含表达目的MT的重组工程菌活菌微胶囊。所表达的目的MT是人或任何一种动物的，不受人或某种动物脏器来源困难的限制，均可进行工业化生产；生产过程不受自然条件的制约，且易于规模化；通过对重组工程菌的选育或改进发酵条件，能不断提高产量、降低生产成本
液体深层发酵转基因工程生产动物金属蛋白制品方法

[发明专利]一种可以分泌漆酶的工程菌株及其构建方法与应用-CN202210337447.2在审
发明人：张天元;邵雄俊;薛怡芸 -专利权人：苏州聚维元创生物科技有限公司
申请日： 2022-03-31 - 公布日： 2022-07-29 - 主分类号： C12N9/02 文献下载
摘要：本发明涉及基因工程技术领域，具体提供了一种可以分泌漆酶的工程菌株，所述工程菌株为带有用于重组表达漆酶基因Tfu_1114的热纤梭菌工程菌株，将来源于褐色高温双岐菌Thermobifidafusca的漆酶基因Tfu_1114，通过将该漆酶基因导入热纤梭菌中，构建了重组表达该基因的热纤梭菌工程菌。所述热纤梭菌工程菌能高效表达漆酶。本发明还公开了该热纤梭菌工程菌株可以高效应用于木质纤维素的水解，具有良好的应用前景。
一种可以分泌工程菌株及其构建方法应用

[发明专利]产多糖絮凝剂的地衣芽孢杆菌基因工程菌及其构建方法-CN201610028296.7有效
发明人：何宁;陈震;余文成;王远鹏;李清彪;沈亮 -专利权人：厦门大学
申请日： 2016-01-15 - 公布日： 2019-02-05 - 主分类号： C12N1/21 文献下载
摘要：多糖絮凝剂的地衣芽孢杆菌基因工程菌及其构建方法，属于基因工程及微生物发酵技术领域。基因工程菌是在地衣芽孢杆菌(Bacillus licheniformis)中过表达epsDEF基因的基因工程菌。基因工程菌制备：将epsDEF基因克隆到表达载体上获得重组表达载体，将重组表达载体通过电转化方法导入产胞外多糖的地衣芽孢杆菌中即得多糖絮凝剂的基因工程菌。多糖絮凝剂的制备：将基因工程菌发酵培养，收集发酵液，提纯，即得多糖絮凝剂。基因工程菌在发酵过程中发酵液絮凝活性显著提高，多糖絮凝剂产量显著提高。多糖絮凝剂在污水处理和食品工程中应用。
高产多糖絮凝地衣芽孢杆菌基因工程及其构建方法

[发明专利]一种促进植酸酶在毕赤酵母中表达的载体-CN201210550026.4无效
发明人：黄亦钧;程斯达;康丽华;王华明;许丽红;刘艳萍;吴秀秀 -专利权人：青岛蔚蓝生物集团有限公司
申请日： 2012-12-17 - 公布日： 2013-05-08 - 主分类号： C12N15/81 文献下载
摘要：本发明为一种促进植酸酶在毕赤酵母中表达的载体，属于微生物工程技术领域，具体涉及一种含有翻译调控因子Hac1的载体。在表达植酸酶的毕赤酵母工程菌中导入上述载体后，工程菌的植酸酶表达水平得到显著提高。毕赤酵母表达工程菌具有胞外分泌和和翻译后修饰的优点，因此，超水平表达毕赤酵母工程菌可应用于工业化生产，节省发酵成本。
一种促进植酸酶酵母表达载体

[发明专利]一种生产α淀粉酶的方法-CN201210251847.8在审
发明人：张爱联;罗进贤;张添元;符仙;刘振旺 -专利权人：中国热带农业科学院热带生物技术研究所
申请日： 2012-07-09 - 公布日： 2012-10-24 - 主分类号： C12N9/32 文献下载
摘要：首先分别克隆大麦、地衣芽孢杆菌和曲霉的α淀粉酶基因；构建含以上三种α淀粉酶基因表达框架的毕赤酵母表达载体、酿酒酵母表达载体和枯草芽孢杆菌表达载体，并将载体分别转化相对应的宿主菌；分别筛选高表达α淀粉酶的重组子作为工程菌；发酵毕赤酵母工程菌、酿酒酵母工程菌和枯草芽孢杆菌工程菌生产重组混合α淀粉酶。与传统的由单基因编码的α淀粉酶不同，本发明生产的重组混合α淀粉酶的适合反应的温度和pH范围广，适合于多种用途；并且，含多基因表达框架的工程菌表达的α淀粉酶的产量明显高于含单基因的工程菌表达的α淀粉酶的产量
一种生产淀粉酶方法

[发明专利]一种光控裂解工程菌及其构建方法和应用-CN202110913684.4在审
发明人：付生伟;张荣荣;金帆 -专利权人：中国科学院深圳先进技术研究院
申请日： 2021-08-10 - 公布日： 2023-02-17 - 主分类号： C12N15/78 文献下载
摘要：本发明提出一种光控裂解工程菌及其构建方法和应用，其中，该工程菌通过构建光敏基因表达盒、抗终止基因表达盒和裂解基因表达盒，可分别表达得到光敏蛋白、抗终止蛋白和裂解蛋白，通过光敏蛋白在近红外光调控下合成信使分子，信使分子诱导抗终止蛋白表达，抗终止蛋白诱导裂解蛋白表达，当调控所述光敏蛋白的光强大于裂解阈值时，所述裂解蛋白的表达量使所述工程菌裂解，从而释放菌内物质。从而本发明技术方案得到的光控裂解工程菌在外界近红外光光源的刺激下，当光强低于裂解阈值时，细菌可以正常生长；当光强达到裂解阈值时，细菌裂解，实现了工程菌的可控裂解，并且无毒副作用。
一种光控裂解工程及其构建方法应用

[发明专利]生产纽莫康定B0-CN201911379415.3有效
发明人：陈少欣;卫腾云;谢秋萍;吴远杰;杨松柏;张正玉;赵苗苗 -专利权人：上海医药工业研究院;中国医药工业研究总院
申请日： 2019-12-27 - 公布日： 2023-01-24 - 主分类号： C12N1/15 文献下载
摘要：本发明公开了一种基因工程菌、质粒组合、利用质粒组合制备所述基因工程菌及所述基因工程菌的用途。其中所述基因工程菌可过表达异源脯氨酸羟化酶基因，其中所述基因工程菌的出发菌株为丝状真菌Glarea lozoyensis，且所述异源脯氨酸羟化酶基因定点整合于所述基因工程菌的基因组上。所述质粒组合包括cas9表达质粒和包含异源脯氨酸羟化酶基因的sgRNA表达质粒，可用于制备本发明的基因工程菌。使用本发明的基因工程菌，不需添加脯氨酸，且无需纯化即能制备高纯度的PB0、且无PC0副产物产生，在工业上具有广泛的用途
生产康定 base sub

[发明专利]一种可以分泌纤维膨胀蛋白的工程菌株、构建方法及应用-CN202210433263.6在审
发明人：张天元;邵雄俊;薛怡芸 -专利权人：苏州聚维元创生物科技有限公司
申请日： 2022-04-24 - 公布日： 2022-07-29 - 主分类号： C12N1/15 文献下载
摘要：本发明涉及基因工程技术领域，具体提供了一种可以分泌纤维膨胀蛋白的工程菌株，所述菌株为带有用于重组表达纤维膨胀蛋白基因Clocl‑1298的热纤梭菌工程菌，纤维膨胀蛋白基因Clocl‑1298来源于克莱弗雷梭菌的纤维膨胀蛋白基因Clocl‑1298，通过将该纤维膨胀基因导入热纤梭菌中，构建了重组表达该基因的热纤梭菌工程菌。所述热纤梭菌工程菌能高效表达纤维膨胀蛋白。本发明还公开了该热纤梭菌工程菌株可以高效应用于木质纤维素的水解，具有良好的应用前景。
一种可以分泌纤维膨胀蛋白工程菌株构建方法应用

[发明专利]表达Harpin蛋白的重组载体pGAprEHS及其工程菌-CN200910223354.1无效
发明人：高学文;乔俊卿;伍辉军;沈波 -专利权人：无锡亚克生物科技有限公司
申请日： 2009-11-19 - 公布日： 2010-08-25 - 主分类号： C12N15/75 文献下载
摘要：本发明公开一种表达Harpin蛋白的重组载体pGAprEHS及其工程菌。是将Harpin蛋白的编码基因克隆到表达载体中构建表达Harpin蛋白的枯草芽孢杆菌重组载体pGAprEHS；然后将其重组到枯草芽孢杆菌染色体上的碱性蛋白水解酶aprE基因位点，得中间工程菌FZB42/AHS；再将nprE基因定点突变载体pUNprEK转化到前述中间工程菌中，以敲除另一中性蛋白水解酶nprE基因，构建出缺失两个蛋白水解酶且表达Harpin蛋白的枯草芽孢杆菌基因工程菌FZB42/ANHSK；最后借助Cre/lox重组酶系统去除工程菌中的抗生素筛选标记，得到对环境和人畜更加安全友好的工程菌。
表达 harpin 蛋白重组载体 pgaprehs 及其工程

[发明专利]表达颗粒状甲烷单加氧酶的方法及其专用工程菌-CN200810225730.6无效
发明人：邢新会;韩冰;苏涛;江皓;杨程;吴昊 -专利权人：清华大学
申请日： 2008-11-10 - 公布日： 2009-03-25 - 主分类号： C12N1/21 文献下载
摘要：本发明公开了一种表达颗粒状甲烷单加氧酶的方法及其专用工程菌。该方法，是诱导表达具有颗粒状甲烷单加氧酶表达活性的工程菌，得到含有颗粒状甲烷单加氧酶的发酵菌液。该工程菌，是将可表达颗粒状甲烷单加氧酶的重组表达载体导入宿主菌中，筛选得到的可表达颗粒状甲烷单加氧酶的重组菌株。所述重组表达载体为含有单加氧酶的启动子及其下游连接的颗粒状甲烷单加氧酶的编码基因的可在宿主菌中表达的载体。本发明的工程菌可高效表达颗粒状甲烷单加氧酶，可用于沼气转化为甲醇，将丙烯氧化成1，2-环氧丙烷等的催化反应。
表达颗粒状甲烷单加氧酶方法及其专用工程

[发明专利]基于原核密码子偏好性构建高表达IGF-1基因的工程菌-CN201410118148.5在审
发明人：刘文洪;叶志青;王炜钢;李俊峰;张贝贝;贾孟荻 -专利权人：浙江中医药大学
申请日： 2014-03-27 - 公布日： 2014-07-09 - 主分类号： C12N1/21 文献下载
摘要：基于原核密码子偏好性构建高表达IGF-1基因的工程菌。本发明依据原核密码子使用频率表，人工合成不同偏好全基因序列和人源原基因序列，并克隆在不同表达载体上，然后转化到不同表达大肠杆菌菌株中，共构建27株工程菌。PCR筛选阳性克隆、IPTG诱导表达、SDS-Page电泳和HPLC检测，筛选获得了一株经偏好性改造能高效表达融合蛋白的工程菌株，该工程菌株命名为RPP②，经液相检测RPP②目的蛋白的表达量是所构建的未经改造人源原基因工程菌最高表达量的2.4倍，若该菌用于工业化生产，能极大提高工业产值并为企业带来显著经济效益。
基于密码子偏好构建表达 igf 基因工程

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