本发明提供细粒棘球绦虫TSP6重组蛋白,所述细粒棘球绦虫TSP6重组蛋白的氨基酸序列为序列表SEQ ID No.2。本发明还提供了一种可溶性表达方法,实现了TSP6重组蛋白的高效可溶性表达表达的重组蛋白质大部分为可溶性蛋白,占大肠杆菌可溶性总蛋白70%;然后用HisPur Cobalt(Clontech)亲和层析纯化重组细粒棘球绦虫
本发明提供细粒棘球绦虫TSP1重组蛋白,所述细粒棘球绦虫TSP1重组蛋白的氨基酸序列为序列表SEQ ID No.2。本发明还提供了一种可溶性表达方法,实现了TSP1重组蛋白的高效可溶性表达:表达的重组蛋白质大部分为可溶性蛋白,占大肠杆菌可溶性总蛋白90%;然后用Ni‑NTA His‑Bind(Clontech)预装柱纯化重组细粒棘球绦虫
本发明公开了一种检测可溶性ST2含量的酶联免疫检测试剂盒,其特征在于,所述试剂盒包括两种抗人ST2单克隆抗体:所述第一抗人ST2单克隆抗体为ST2‑4F12抗体,包括重链和轻链,所述ST2‑4F12的重链可变区(mVH)的氨基酸序列与SEQ ID NO.1相同;ST2‑4F12的轻链可变区(mVL)的氨基酸序列与SEQ ID NO.2相同;所述第二抗人ST2单克隆抗体为ST2‑2D1抗体,包括重链和轻链,所述ST2‑2D1的重链可变区(mVH)的氨基酸序列与SEQ ID NO.3相同;ST2‑2D1的轻链可变区(mVL)的氨基酸序列与SEQ ID NO.4相同。本发明的试剂盒能够有效检测可溶性ST2含量,为后续的质量发挥作用。
本发明提供一种骨形态发生蛋白BMP‑2重组蛋白,其氨基酸序列如SEQ ID No.1所示。还公开了其编码基因、表达质粒、原核表达载体以及原核表达方法。本发明采用原核表达系统,创造性地引入增溶标签,使包涵体表达转为可溶性表达,BMP‑2在原核系统中为包涵体表达,通过添加增溶标签,使蛋白转为可溶性表达,减小了蛋白分离纯化的难度,缩短了纯化周期,提高了纯化效率
本发明公开了一种人肿瘤坏死因子可溶性受体II-抗体Fc段融合蛋白,它具有序列表中SEQ ID No.2所述的氨基酸序列,本发明的优点是利用双顺反子表达载体pTandem-1中的IRES序列,将TNFR-Fc基因和筛选标记DHFR基因连接在一起,可减轻筛选强度,提高表达水平,本发明能有效、稳定地制造人肿瘤坏死因子可溶性受体II-抗体Fc段融合蛋白。
本发明涉及基因工程技术领域,尤其涉及一种单加氧酶突变体及其制备方法和应用,所述单加氧酶突变体具有(I)、(II)所示的氨基酸序列中任意一个:(I)与SEQ ID NO.1所示的氨基酸序列具有至少80%同一性的氨基酸序列;(II)与SEQ ID NO.1所示的氨基酸序列的23至508位氨基酸经修饰、取代、缺失或添加一个或几个氨基酸获得的氨基酸序列;所述取代为取代1‑34个氨基酸;其中,所述突变体具有单加氧酶的活性。本发明中通过设计23至508位氨基酸的多个不同位点的突变,发现这些突变体提高了单加氧酶的活性、稳定性、可溶性表达、选择性、还可以降低单加氧酶的使用量。
本发明涉及基因工程技术领域,尤其涉及改进的酮还原酶突变体及其制备方法和应用,所述酮还原酶突变体具有(I)、(II)所示的氨基酸序列中任意一个:(I)与SEQ ID NO.1所示的氨基酸序列具有至少80%同一性的氨基酸序列;(II)与SEQ ID NO.1所示的氨基酸序列的12至214位氨基酸经修饰、取代、缺失或添加一个或几个氨基酸获得的氨基酸序列;所述取代为取代1‑14个氨基酸;其中,所述突变体具有酮还原酶的活性本发明中通过设计12至214位氨基酸的多个不同位点的突变,发现这些突变体提高了酮还原酶的活性、稳定性、可溶性表达、选择性、还可以降低酮还原酶的使用量。
本分案申请涉及基因工程技术领域,尤其涉及一种单加氧酶突变体及其制备方法和应用,所述单加氧酶突变体具有(I)、(II)所示的氨基酸序列中任意一个:(I)与SEQ ID NO.1所示的氨基酸序列具有至少80%同一性的氨基酸序列;(II)与SEQ ID NO.1所示的氨基酸序列的23至508位氨基酸经修饰、取代、缺失或添加一个或几个氨基酸获得的氨基酸序列;所述取代为取代1‑34个氨基酸;其中,所述突变体具有单加氧酶的活性本发明中通过设计23至508位氨基酸的多个不同位点的突变,发现这些突变体提高了单加氧酶的活性、稳定性、可溶性表达、选择性、还可以降低单加氧酶的使用量。