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[发明专利]在毕赤酵母中进行重组乙醇氧化酶的表达与纯化的方法-CN201210038196.4有效
发明人：徐志南;刘云平;朱建忠 -专利权人：浙江德清汇宁生物科技有限公司
申请日： 2012-02-20 - 公布日： 2012-07-04 - 主分类号： C12N15/53 文献下载
摘要：本发明公开了一种重组乙醇氧化酶rAOX的表达与纯化的方法。本发明运用分子生物学技术先构建乙醇氧化酶-多聚组氨酸表达载体pPIC9K-AOX-HIS，然后将其线性化后转入毕赤酵母GS115中，从而获得能够表达有活性的重组乙醇氧化酶的毕赤酵母工程菌，且重组乙醇氧化酶可以部分分泌表达通过对重组乙醇氧化酶表达条件进行优化，该工程菌生产的乙醇氧化酶可达到1862U/L。同时，酶的分泌表达与多聚组氨酸标签的引入简化了重组乙醇氧化酶的纯化工艺。通过测定，该工程菌表达的重组乙醇氧化酶热稳定性较毕赤酵母野生型乙醇氧化酶有很大的提高。本发明的整个过程操作简单，可适合于工业化生产，可带来一定经济效益。
酵母进行重组乙醇氧化酶表达纯化方法

[发明专利]一种以聚碳酸酯膜为基体的乙醇氧化酶膜及其制备方法-CN200810225243.X无效
发明人：杨文胜;杨利;刘长霞 -专利权人：北京化工大学
申请日： 2008-10-29 - 公布日： 2009-03-11 - 主分类号： G01N27/327 文献下载
摘要：一种以聚碳酸酯膜为基体的乙醇氧化酶膜及其制备方法，属于电化学生物传感器及其制备技术领域。该乙醇氧化酶膜由聚碳酸酯基体膜、乙醇氧化酶及固定酶的戊二醛组成。该乙醇氧化酶膜的制备方法是：将聚碳酸酯膜粘在O型橡胶圈上，晾干后将该聚碳酸酯膜浸入磷酸缓冲溶液中，取出用高纯氮气吹干后滴加乙醇氧化酶，再通过戊二醛蒸气交联固定乙醇氧化酶制成酶膜。本发明乙醇氧化酶膜具有较短的响应时间、较高的灵敏度、较宽的线性响应范围以及良好的操作稳定性与储存稳定性；此外本发明的乙醇氧化酶膜制备方法简单、成本较低。
一种聚碳酸酯基体乙醇氧化酶及其制备方法

[发明专利]乙醇酸氧化酶及其应用-CN202211425837.1在审
发明人：汪钊;邵帅;章银军;应向贤;白彦兵;林行;张连春;陈梁;刘学愚;娄波;何敏;汪瑾;汪军;殷杭华;伊滨 -专利权人：杭州鑫富科技有限公司;浙江工业大学
申请日： 2022-11-15 - 公布日： 2023-04-18 - 主分类号： C12N9/04 文献下载
摘要：本发明涉及生物催化领域领域，特别涉及乙醇酸氧化酶及其应用。本发明公开了一种乙醇酸氧化酶CreGO及其在合成乙醛酸甲酯中的应用，乙醇酸氧化酶CreGO与谷胱甘肽巯基转移酶GST以连接肽GSG形成融合酶，该融合酶的表达减少了包涵体的形成，提高了乙醇酸氧化酶的表达量以乙醇酸氧化酶CreGO与谷胱甘肽巯基转移酶GST融合酶作为催化剂构建反应体系，再结合氧气鼓泡以及加入过氧化氢酶去除了副产物过氧化氢，200mM乙醇酸甲酯经8h酶法氧化反应后，乙醛酸甲酯得率达83.4％
乙醇氧化酶及其应用

[发明专利]乙醇氧化酶稳定化纳米粒子及制备方法、应用和解酒药-CN202211659717.8在审
发明人：刘阳;史林启;李秋实;姚筱暄;霍艺杰;李雪梅 -专利权人：北京易醒生物科技有限公司;南开大学;北京益醒生物科技有限公司
申请日： 2022-12-22 - 公布日： 2023-06-06 - 主分类号： C12N9/96 文献下载
摘要：本发明涉及乙醇氧化酶稳定化纳米粒子及制备方法、应用和解酒药，乙醇氧化酶稳定化纳米粒子中，乙醇氧化酶负载于壳体中，所述的壳体包含第一链段和第二链段的交联结构，所述的第一链段的原料为壳聚糖及其衍生物中的一种或多种，所述的第二链段的原料为聚谷氨酸及其衍生物中的一种或多种；制备方法包括将乙醇氧化酶水溶液与三聚磷酸钠水溶液、第二链段原料的水溶液初步反应后，加入第一链段原料的醋酸溶液继续反应形成含有乙醇氧化酶稳定化纳米粒子的混合液；上述乙醇氧化酶稳定化纳米粒子或制备方法可用于制造解酒用的药物中。本申请的乙醇氧化酶能够在体内的肠道位置稳定、持续地发挥对乙醇的氧化作用。
乙醇氧化酶稳定纳米粒子制备方法应用和解酒药

[发明专利]用于治疗草酸盐相关疾病的化合物和方法-CN202080073664.4在审
发明人： A·卡巴基比;M·卡拉曼;M·克莱尔;T·利多姆 -专利权人：奥沙鲁克斯公司
申请日： 2020-08-22 - 公布日： 2022-08-30 - 主分类号： A61K31/4192 文献下载
摘要：本文披露了用于调节乙醇酸氧化酶、用于治疗草酸盐相关疾病如高草酸尿症的化合物和组合物，其中调节乙醇酸氧化酶有望用于有需要的患者的治疗。还提供了调节人或动物受试者中的乙醇酸氧化酶活性的方法。
用于治疗草酸盐相关疾病化合物方法

[发明专利]一种乙醇氧化酶修饰复合糊电极传感器的制备方法-CN201910796251.8在审
发明人：李慧芝;李志英;张诺 -专利权人：济南大学
申请日： 2019-08-27 - 公布日： 2019-11-12 - 主分类号： G01N27/327 文献下载
摘要：本发明公开了一种乙醇氧化酶修饰复合糊电极传感器的制备方法，其特征在于，采用纳米氮化铌、氧化纳米石墨粉、复合胶黏剂和液体石蜡，制得纳米NbN/石墨复合糊电极传感器；采用环氧基硅烷偶联剂对上述糊电极进行预处理，采用去离子水，乙醇氧化酶，烟酰胺腺嘌呤二核苷酸，黄原胶制得乙醇氧化酶固定液固定液；采用滴涂法将乙醇氧化酶固定液固定液滴涂到环氧基硅烷偶联剂预处理纳米NbN/石墨复合糊电极，得到乙醇氧化酶修饰复合糊电极传感器该电极传感器具有比普通的碳糊电极导电性能高，对乙醇具有专一识别性，灵敏度高，广泛应用于生物医药、化妆品、生物、环保检测等相关领域。
乙醇氧化酶电极传感器复合固定液修饰环氧基硅烷偶联剂预处理电极石墨滴涂制备烟酰胺腺嘌呤二核苷酸导电性能环保检测去离子水生物医药碳糊电极氧化纳米液体石蜡专一识别灵敏度氮化铌黄原胶胶黏剂石墨粉乙醇化妆品应用

[发明专利]乙醇酸氧化酶突变体及其应用-CN202211427594.5在审
发明人：汪钊;邵帅;章银军;应向贤;白彦兵;林行;张连春;陈梁;刘学愚;娄波;何敏;汪瑾;汪军;殷杭华;伊滨 -专利权人：杭州鑫富科技有限公司;浙江工业大学
申请日： 2022-11-15 - 公布日： 2023-07-25 - 主分类号： C12N9/04 文献下载
摘要：本发明涉及生物催化领域，特别涉及乙醇酸氧化酶突变体及其应用。本发明公开了一种乙醇酸氧化酶突变体CreGO‑Mut及其在合成乙醛酸甲酯中的应用，所述乙醇酸氧化酶突变体CreGO‑Mut是将SEQ ID NO.2所示氨基酸序列中第27位酪氨酸突变为丝氨酸，同时将第111乙醇酸氧化酶突变体CreGO‑Mut相较于野生型CreGO活力提高了3.23倍。融合酶GST‑GSG‑CreGO‑Mut作为催化剂，过氧化氢酶CAT作为辅助酶，再结合氧气鼓泡，300mM乙醇酸甲酯经8h酶法氧化反应后，乙醛酸甲酯得率达93.5％。
乙醇氧化酶突变体及其应用

[发明专利]一种基于乙醇氧化酶的电化学乙醇传感器及其制备方法-CN201510627447.6有效
发明人：朱良胜;李琳;刘刚 -专利权人：深圳市美特瑞科技发展有限公司
申请日： 2015-09-28 - 公布日： 2018-06-26 - 主分类号： G01N27/416 文献下载
摘要：本发明涉及一种基于乙醇氧化酶的电化学乙醇传感器及其制备方法，该传感器中具有三个电极，在工作电极上覆盖乙醇氧化酶膜层，乙醇氧化酶将样品气体中的乙醇选择性氧化成乙醛，乙醛在工作电极上氧化电流与乙醇的浓度成线性关系乙醇氧化酶层的酶催化层没有导电性，为电化学惰性层，有关酶的全部反应与电化学传感器工作电极的电流没有直接关系。酶的催化反应产物扩散到工作电极，进一步发生反应，产生电化学电流，电流与乙醇的浓度成线性关系。该乙醇传感器的响应时间短，测试结果准确，对其他有机气体没有明显的响应，但对乙醇具有极高的选择性和灵敏度，其更能够适应复杂环境下乙醇检测的需要。
乙醇氧化酶工作电极乙醇传感器乙醇浓度成线性关系电化学传感器制备催化反应产物电化学传感器乙醇氧化酶膜导电性电化学电流电化学惰性氧化成乙醛乙醇选择性复杂环境氧化电流样品气体乙醇检测有机气体直接关系乙醛低活性灵敏度酶催化电极响应扩散覆盖

[发明专利]一种乙醇酸氧化酶制剂、制备方法及应用-CN200810040498.9无效
发明人：潘江;朱虹;胡彬;许建和 -专利权人：华东理工大学
申请日： 2008-07-11 - 公布日： 2008-11-19 - 主分类号： C12N9/04 文献下载
摘要：本发明公开了一种黄花苜蓿乙醇酸氧化酶制剂，其制备方法及用于乙醇酸氧化以制备乙醛酸的应用。所述的乙醇酸氧化酶制剂是将植物黄花苜蓿汁液经过硫酸铵沉淀、冷冻干燥等步骤制备而得；亦可将硫酸铵沉淀所得的酶蛋白溶解、透析除盐后，上载于磁性纳米颗粒材料，即可制得磁粉固定化的乙醇酸氧化酶制剂。利用乙醇酸氧化酶作为生物催化剂，在温和的条件下催化乙醇酸有限氧化为乙醛酸，当底物浓度为50～1000mM时，乙醛酸的产率最高可达98.9％。若使用磁粉固定化的乙醇酸氧化酶作为催化剂，则在反应结束后，可通过磁场作用很容易地将固定化酶从反应体系中分离出来，并可以多次反复使用。
一种乙醇氧化酶制剂制备方法应用

[发明专利]一种动物组织脂肪氧化酶活性的定量检测方法-CN201110326420.5有效
发明人：刘永乐;王建辉;王发祥;李向红;俞健;刘冬敏 -专利权人：长沙理工大学
申请日： 2011-10-25 - 公布日： 2012-06-20 - 主分类号： G01N21/33 文献下载
摘要：本发明提供了一种动物组织脂肪氧化酶活性的定量检测方法，具体步骤为：(1)配制粗酶液和底物液；(2)于粗酶液中加入10倍体积的底物液，在20～30℃水浴缓慢震荡，反应20～30min，加入4倍粗酶液体积的无水乙醇终止反应，离心，取上清液0.5mL加入2mL无水乙醇，并用7.5mL质量浓度为60％乙醇稀释成测定液，并制备空白对照液，于234nm处测定吸光度；(3)绘制脂肪氧化酶酶活力与吸光度的标准曲线，将测得的吸光度与反应体系中脂肪氧化酶浓度相对应，根据脂肪氧化酶标准样品的酶活力单位，将不同样品的脂肪氧化酶活力进行量化。本发明的定量检测方法灵敏度高，稳定性和重现性好，操作方便，对设备要求低，且避免了底物液和粗酶液对测定带来的干扰。
一种动物组织脂肪氧化酶活性定量检测方法

[发明专利]一种具有抑制单胺氧化酶B功能的保健食品和药品的生产方法及其在临床的应用-CN201210183211.4无效
发明人：吴铁;谢爱媚;崔燎;司徒永立;卢旱云 -专利权人：广东医学院;湛江广医医药科技开发有限公司
申请日： 2012-05-24 - 公布日： 2012-12-12 - 主分类号： A61K36/296 文献下载
摘要：取天然红曲经乙醇提取红色素后，烤干，微粉化后，加入等量的淫羊藿，用乙醇浸泡，回流提取，过滤，滤渣再用乙醇浸泡24h，回流提取，过滤，合并3次滤液，减压浓缩，制成可供临床应用的具有抑制单胺氧化酶B功能保健食品和药品，这些产品经实验研究，证明对单胺氧化酶B的活性有明显的抑制作用，可以作为单胺氧化酶B抑制剂用于预防和治疗忧郁症，帕金森氏病和老年性痴呆等疾病。
一种具有抑制单胺氧化酶功能保健食品药品生产方法及其临床应用

[发明专利]乙醇诊断/测定试剂(盒)及乙醇浓度测定方法-CN200810244253.8无效
发明人：王尔中 -专利权人：苏州艾杰生物科技有限公司
申请日： 2008-12-10 - 公布日： 2010-06-30 - 主分类号： G01N21/31 文献下载
摘要：本发明涉及一种利用酶倍增法、酶比色法及酶联法技术的乙醇诊断/测定试剂(盒)，同时本发明还涉及测定乙醇浓度的方法、试剂的组成及成分，属于医学/食品/环境检验测定技术领域。本发明的试剂(盒)主要成分包括：缓冲液、辅酶、酒精氧化酶、乙醛氧化酶、NAD(P)H氧化酶及稳定剂；通过将样品与试剂按一定的体积比混合，使之发生一系列的酶促反应，再将反应物置于紫外/可见光分析仪下，检测主波长340nm处吸光度上升的程度，从而测算出乙醇的浓度大小。
乙醇诊断测定试剂浓度方法

[发明专利]一种酶法制备乙醛酸的方法-CN201910803069.0在审
发明人：何连顺;李斌水 -专利权人：精晶药业股份有限公司
申请日： 2019-08-28 - 公布日： 2019-11-15 - 主分类号： C12P7/40 文献下载
摘要：本发明涉及酶催化转化技术领域，具体公开一种酶法制备乙醛酸的方法，其采用特定质量比的豌豆乙醇酸氧化酶和南瓜乙醇酸氧化酶来催化乙醇酸的氧化得到乙醛酸。该酶体系对羟基的氧化活性远远高于对醛的氧化性，有利于减少醛氧化形成的副产物的含量，提高乙醛酸的收率。本发明方法还可以加入有机胺、辅酶和黄素单核苷酸进一步抑制产物的氧化，产物的产率可达90％以上。
乙醛酸乙醇酸氧化酶黄素单核苷酸酶催化转化催化乙醇酶法制备氧化活性副产物酶体系氧化性有机胺质量比产率辅酶收率豌豆羟基南瓜

[发明专利]检测唾液中酒精含量的固定化酶纳米纤维膜的制备方法-CN201310152829.9有效
发明人：李孝红;刘清杰;赵龙;严仕力 -专利权人：西南交通大学
申请日： 2013-04-27 - 公布日： 2013-08-07 - 主分类号： C12N11/00 文献下载
摘要：本发明公开了一种检测唾液中酒精含量的固定化酶纳米纤维膜的制备方法，该制备方法通过聚乙二醇或聚乙烯亚胺等聚合物作为手臂分子多位点共价结合乙醇氧化酶，进一步通过聚乙烯亚胺、聚赖氨酸、聚组氨酸或壳聚糖等通过电荷间物理作用固定乙醇氧化酶的多个亚基检测时，样品中的乙醇被乙醇氧化酶氧化后产生过氧化氢，过氧化氢使靛蓝褪色，靛蓝的褪色程度与标准色卡对照可以方便计算出样品中的乙醇浓度。
检测唾液酒精含量固定纳米纤维制备方法

[发明专利]基于介孔材料的一步法制备葡萄糖氧化酶电极的方法-CN202311100020.1在审
发明人：请求不公布姓名 -专利权人：深圳可孚生物科技有限公司
申请日： 2023-08-30 - 公布日： 2023-10-17 - 主分类号： C12Q1/00 文献下载
摘要：本发明公开了基于介孔材料的一步法制备葡萄糖氧化酶电极的方法，涉及葡萄糖氧化酶电极技术领域，包括以下步骤：（1）得到二茂铁的乙醇饱和溶液；（2）得到复合溶液；（3）得到覆盖液；（4）得到基于介孔材料的葡萄糖氧化酶电极；本发明提供了基于介孔材料的一步法制备葡萄糖氧化酶电极的方法，与现有酶电极制备方法相比，本发明方法通过以电子介体二茂铁和葡萄糖氧化酶同时固定在复合改性介孔材料的孔隙之中，能够大幅度的增强了电子介体二茂铁和葡萄糖氧化酶的稳定性，从而增强了葡萄糖氧化酶酶电极的稳定性，提高了葡萄糖氧化酶电极的灵敏性。
基于材料一步法制备葡萄糖氧化酶电极方法

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