本发明提供一种用于检测环境样品中类雌激素化合物的双杂交酵母及其制备方法,其中该酵母中含有pGBKT7-ER酵母表达质粒和pGAD424-GRIP1酵母表达质粒,其中pGBKT7-hER酵母表达质粒包含雌激素受体基因,pGAD424-GRIP1酵母表达质粒包含具有如SEQ ID No.2所示序列的雌激素受体共激活因子基因片段。本发明还提供了一种检测环境中类雌激素化合物的生物测试方法,其中包括将上述双杂交酵母细胞与待测样品共培养,加入邻硝基苯-β-D-吡喃半乳糖苷的反应液进行反应,根据终止反应后检测到的上清液在420nm处的吸光度值来计算类雌激素化合物的浓度本发明采用重组雌激素受体基因的双杂交酵母用于测试,更加接近哺乳动物内分泌系统的真实作用情况,构建的酵母细胞基因性状稳定,易于培养、筛选,整个类雌激素效应的筛选过程操作简单,所需样品量少,成本低廉。
一种“转录激活子样效应因子(Transcription Activator Like Effectors,TALE)-功能基团-雌激素受体(Estrogen Receptor,ER)”功能蛋白及其应用,所述“转录激活子样效应因子-功能基团-雌激素受体”功能蛋白由转录激活子样效应因子、雌激素受体和功能基团依次连接而成,或者由转录激活子样效应因子、功能基团和雌激素受体依次连接而成。
本发明公开了一种用于检测雌激素受体α的单克隆抗体及其制备方法和应用,属于免疫检测技术领域。本发明的用于检测雌激素受体α的单克隆抗体利用SEQ ID NO:1所示的免疫原多肽免疫实验兔得到,其重链可变区的CDR‑H1、CDR‑H2、CDR‑H3序列和轻链可变区的CDR‑L1、CDR‑L2、CDR‑L3利用本发明的用于检测雌激素受体α的单克隆抗体对雌激素受体α进行检测,特异性强、准确度高,对于临床上乳腺癌的预测、诊断、用药指导和预后具有非常大的临床应用价值。