本发明涉及微生物领域，公开了自洽型P450酶及其制备方法、25‑羟基胆固醇或其衍生物的制备方法。该自洽型P450酶为具有如SEQ ID NO：2或SEQ ID NO：3所示氨基酸序列的酶；或者为前述氨基酸序列经过取代、缺失或添加至少一个氨基酸残基且仍具有自洽型P450酶活性的氨基酸序列的酶；或者为与前述氨基酸序列具有80％以上同源性且具有自洽型P450酶活性的氨基酸序列所示的酶；或者为前述氨基酸序列的氨基末端和/或羧基末端连接有标签的氨基酸序列的酶；或者为前述氨基酸序列的氨基末端连接有信号序列的氨基酸序列的酶。该自洽型P450酶具有显著提高的转化胆固醇或其衍生物的能力。
角毛壳菌几丁质酶基因及其编码的氨基酸序列和用于克隆的引物，它涉及一种几丁质酶基因及其编码的氨基酸序列和用于克隆的引物。本发明旨在增加几丁质酶的种类，拓宽几丁质酶的获得途径。本发明角毛壳菌几丁质酶基因序列如SEQ ID NO：1所示。角毛壳菌几丁质酶基因完整的开放读码框的基因序列如SEQ ID NO：2所示。角毛壳菌几丁质酶基因编码的氨基酸序列如SEQ IDNO：3所示。用于克隆角毛壳菌几丁质酶基因的引物P1～P4的基因序列如SEQID NO：4～7所示。本发明角毛壳菌几丁质酶基因是一个新的几丁质酶基因，为酸性内切几丁质酶基因。
