本发明公开了一种基于西班牙盐盒菌和pyrF基因的遗传操作系统及其应用。该遗传操作系统包括重组嗜盐古菌和重组质粒载体;重组嗜盐古菌按照包括如下步骤的方法制备得到:使含有SEQ ID NO:1所示蛋白的编码基因的出发嗜盐古菌中的SEQ ID NO:1所示蛋白的编码基因的功能丧失,得到的重组菌为所述重组嗜盐古菌;重组质粒载体中至少含有如下元件:在大肠杆菌中复制所需的复制原点、用于筛选大肠杆菌转化子的抗性选择标记基因的表达盒、SEQ ID NO:1所示蛋白的编码基因的表达盒、供外源基因插入的多克隆位点该遗传操作系统可作为一个高效的基因敲除系统,可以对Haloarcula hispanica进行广泛的基因功能研究和代谢途径阐明。实验证明,用本发明系统进行遗传转化获得阳性重组子的频率大大提高。
本发明公开了一种基于地中海富盐菌和pyrF基因的遗传操作系统及其应用。该遗传操作系统包括重组嗜盐古菌和重组质粒载体;重组嗜盐古菌按照包括如下步骤的方法制备得到:使含有SEQ ID NO:1所示蛋白的编码基因的出发嗜盐古菌中的SEQ IDNO:1所示蛋白的编码基因的功能丧失,得到的重组菌为所述重组嗜盐古菌;重组质粒载体中至少含有如下元件:在大肠杆菌中复制所需的复制原点、用于筛选大肠杆菌转化子的抗性选择标记基因的表达盒、SEQ ID NO:1所示蛋白的编码基因的表达盒、供外源基因插入的多克隆位点该遗传操作系统可作为一个高效的基因敲除系统,可以对Hfx.mediterranei进行广泛的基因功能研究和代谢途径阐明。实验证明,用本发明系统进行遗传转化获得阳性重组子的频率大大提高。