本发明提出了一种辅助蛋白在重组蛋白生产中的应用及融合表达系统，所述辅助蛋白的氨基酸序列为SEQ ID NO.1、SEQ ID NO.2、SEQ ID No.3或SEQ ID NO.4，所述的辅助蛋白及包含该辅助蛋白的重组蛋白融合表达系统，表达效率高，能够在细胞内可溶表达重组蛋白，不会形成包涵体，可以通过加热处理菌体实现细胞破碎，释放目标蛋白质，无需超声破碎或高压破碎，操作简单效率高且节约仪器维修和维护成本。加热处理后宿主蛋白会变性形成沉淀而除去，细胞破碎液中目标融合蛋白的含量高、纯度高，且无需多次纯化，大大简化了下游蛋白质的分离纯化工艺，降低纯化成本。
本发明属于融合蛋白技术领域，公开了一种辅助蛋白，为氨基酸序列如SEQ ID NO.1、SEQ ID NO.2或SEQ ID NO.3所示的蛋白，或为与氨基酸序列如SEQ ID NO.1所示的蛋白具有85％以上同源性的蛋白，还公开了包含该辅助蛋白的重组融合蛋白、重组表达载体以及该重组融合蛋白的制备方法。本发明的优点在于，该辅助蛋白可用于生产多种氨基酸个数为20‑80个和/或等电点范围为3‑9的小分子多肽；该重组融合蛋白可分泌至宿主细胞外，在4℃‑100℃均可稳定存在于上清液中，具有较佳的热稳定性，可在60℃‑100℃通过热破壁法即可获得大量重组融合蛋白，简化重组融合蛋白的提取流程，降低成本，再在合适条件下通过酶切割或化学切割使辅助蛋白与目的多肽断裂，即可获得稳定而有活性的目的多肽。
本发明属于生物技术领域，公开了一种辅助蛋白，为氨基酸序列如SEQ ID NO.1、SEQ ID NO.2或SEQ ID NO.3所示的蛋白，或为与氨基酸序列如SEQ ID NO.1所示的蛋白具有85％以上同源性的蛋白，还公开了包含该辅助蛋白的重组融合蛋白、重组表达载体以及该重组融合蛋白的制备方法。本发明的优点在于，该辅助蛋白可用于生产多种氨基酸个数为20‑80个和/或等电点范围为3‑9的小分子多肽；该重组融合蛋白表达于细胞内，破壁后在4℃‑100℃均可稳定存在于上清液中，具有较佳的热稳定性，可在60℃‑100℃通过热破壁法即可获得大量重组融合蛋白，简化重组融合蛋白的提取流程，降低成本，再在合适条件下通过酶切割或化学切割使辅助蛋白与目的多肽断裂，即可获得稳定而有活性的目的多肽。
本发明提供了一种提高DNA修复效率的辅助蛋白及其基因编辑载体和应用，属于基因编辑与基因治疗技术领域。本发明提供的提高DNA修复效率的辅助蛋白的核苷酸序列如SEQ ID NO:1、SEQ ID NO:2或SEQ ID NO:3所示。本发明提供的辅助蛋白片段更短，相比于RAD51‑Cas9n系统，同源重组效率更高，更适合转基因病毒载体包装；相比于Prime editing系统，能修复多碱基与大片段DNA变异，修复功能更强。
本公开涉及一种脲酶辅助蛋白变体、包含所述变体的谷氨酸棒状杆菌(Corynebacterium glutamicum)菌株、使用所述菌株生产L‑缬氨酸的方法及用途。所述脲酶辅助蛋白变体由SEQ ID NO：1表示的氨基酸序列组成，作为对应于SEQ ID NO：3的第56位的氨基酸的脯氨酸被亮氨酸取代。与具有未修饰多肽的现有微生物的情况相比，在培养包含本公开的脲酶辅助蛋白的谷氨酸棒状杆菌菌株的情况下，可以以更高的产量生产L‑缬氨酸。
