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[发明专利]热塑性动物蛋白及其制备方法-CN201110109650.6无效
发明人：罗学刚;徐东 -专利权人：西南科技大学
申请日： 2011-04-29 - 公布日： 2011-11-23 - 主分类号： C08F289/00 文献下载
摘要：本发明公开了一种热塑性动物蛋白及其制备方法。热塑性动物蛋白各组分重量比为：动物纯化蛋白20～100，氯化锌溶液600～3000，50%过氧化氢溶液20～100，亚硫酸氢钠20～100，引发剂0.2～10，接枝单体60～300。它是动物蛋白纯化得到纯化动物蛋白，再经接枝共聚，最后热塑性蛋白分离所得固体经水洗至中性后真空干燥得到的。
塑性动物蛋白及其制备方法

[发明专利]一种藻红蛋白(PE)与Annexin V蛋白偶联方法-CN202011149769.1在审
发明人：郭爱龙 -专利权人：杭州联科生物技术股份有限公司
申请日： 2020-10-23 - 公布日： 2021-05-04 - 主分类号： C07K14/47 文献下载
摘要：本发明公开了一种藻红蛋白(PE)与Annexin V蛋白偶联方法，包括以下步骤：步骤1：Annexin V蛋白表达纯化：1.1：基因序列优化：查找人Annexin V蛋白的基因序列，将人AnnexinV基因序列优化，去除终止密码子序列，将其连入原核表达载体pET28a上，保留前后His标签蛋白，为蛋白纯化及后续偶联荧光素纯化做准备；1.2：Annexin V蛋白诱导表达：挑取pET28a‑Annexin，按照1：100将培养的菌液接种到含50μg/ml卡那霉素的LB液体培养基中，37℃200rpm振荡培养至菌液浓度OD600为04‑0.6；本发明先通过分子筛纯化去除大部分游离的PE后再采用镍柱纯化浓缩，得到纯度较高的Annexin V‑PE标记物，且保持蛋白良好的生物活性，可用于细胞凋亡检测。
一种蛋白 pe annexin 方法

[发明专利]一种使用混合吸附色谱分离纯化贻贝粘蛋白的方法-CN200710179491.0有效
发明人：孟桂凤;邢思亮 -专利权人：北京康铭优盛生化技术有限公司
申请日： 2007-12-14 - 公布日： 2009-01-21 - 主分类号： C07K1/36 文献下载
摘要：本发明涉及一种使用混合吸附色谱分离纯化贻贝粘蛋白的方法。贻贝粘蛋白中含有L－3，4－二羟基苯丙氨酸(L－DOPA)基团，其酚羟基可作为氢键供体，其苯环可形成疏水作用，其赖氨酸带有强正电荷可形成静电键。利用贻贝粘蛋白的上述性质，采用混合吸附色谱，即氢键吸附、疏水吸附、静电吸附三种原理的吸附色谱，提供一种高选择性、高收率的贻贝粘蛋白分离纯化方法，克服使用传统方法分离纯化贻贝粘蛋白收率低的问题。采用强酸提取，以脱盐柱去除小分子化合物，利用高浓度、高交联度琼脂糖介质分离纯化贻贝粘蛋白，采用乙酸－尿素－聚丙烯酰胺凝胶电泳，通过四氮唑蓝特异性显色鉴别贻贝粘蛋白。在一种分离介质上利用三种原理分离贻贝粘蛋白，形成了高选择性，简化了纯化工艺，降低了生产成本。
一种使用混合吸附色谱分离纯化贻贝蛋白方法

[发明专利]一种制备分子生物级牛血清白蛋白的方法-CN201810839672.X有效
发明人：时彦祎;杨心意;覃雨棠 -专利权人：珠海宝锐生物科技有限公司
申请日： 2018-07-27 - 公布日： 2021-02-19 - 主分类号： C07K14/765 文献下载
摘要：本发明属于蛋白质纯化领域，具体涉及一种制备分子生物级牛血清白蛋白的方法。本发明制备分子生物级牛血清白蛋白的方法包括吸附剂分散液制备、吸附剂纯化牛血清白蛋白样品、肝素‑琼脂糖层析柱处理牛血清白蛋白样品、超滤浓缩以及透析处理等步骤。本发明的方法采用硅藻土与Heparin‑sepharose层析柱的结合对牛血清白蛋白样品进行纯化，能够去除牛血清白蛋白样品中的核酸酶，得到分子生物级的牛血清白蛋白；整个纯化过程都在低温环境下进行，最大限度的保持了牛血清白蛋白的活性；并且不涉及DEPC处理，不会对环境造成污染；可以可完全去除牛血清白蛋白中微量的核酸酶，省时省力且回收效率高，便于放大规模。
一种制备分子生物血清白蛋白方法

[发明专利]一种毒素蛋白的纯化方法-CN201710124205.4有效
发明人：王晓雪;李百元 -专利权人：中国科学院南海海洋研究所
申请日： 2017-03-03 - 公布日： 2020-03-24 - 主分类号： C12N1/20 文献下载
摘要：本发明公开了一种毒素蛋白的纯化方法，其包括如下步骤：(1)将含有能特异降解抗毒素蛋白的蛋白酶的假交替单胞菌SCSIO 6842的菌体破碎得到全细胞裂解液；(2)将毒素基因和抗毒素基因扩增并克隆到表达载体中诱导其表达，得到毒素蛋白和抗毒素蛋白的复合物；(3)对毒素蛋白和抗毒素蛋白复合物进行纯化；(4)将步骤(1)所得全细胞裂解液与步骤(3)所得复合物混合处理，从而分离毒素蛋白并纯化、脱盐，得到毒素蛋白。本发明纯化方法具有蛋白活性高、操作简单、成本低等优点，具有良好的应用前景。
一种毒素蛋白纯化方法

[发明专利]一种从植物叶片中提取纯化内质网及其蛋白的有效方法-CN201911405514.4有效
发明人：朱玮;欧钰婷;田景奎;李守信;刘胜志;钟卓珩 -专利权人：浙江大学
申请日： 2019-12-30 - 公布日： 2022-03-18 - 主分类号： C12N5/04 文献下载
摘要：本发明公开了一种从植物叶片中提取纯化内质网及其蛋白的有效方法，该方法以植物叶片为材料，通过调整材料类型、材料用量、研磨方式、离心转子类型、蛋白重悬方式等过程，结合差速离心方法，得到了高质量的植物叶片内质网蛋白采用15天左右的适龄植物叶片，新鲜叶片直接加缓冲液研磨的方式取代液氮研磨后超声提取的方式，并且在12000xg转速离心时以水平转子代替定角转子，纯化后内质网蛋白与总蛋白相比，内质网蛋白阳性标记GRP78和CNX，分别上升了约3.3倍和6.1倍，叶绿体阳性蛋白RCA和细胞核阳性蛋白Histone H3分别下降了约84.1％和74.4％。本发明首次建立一套适用于植物叶片内质网蛋白提取纯化的有效体系，对于其他植物叶片构建内质网蛋白提取纯化体系具有参考意义。
一种植物叶片提取纯化内质网及其蛋白有效方法

[发明专利]一种新型纯化PE类重组毒素的方法-CN201310024739.1有效
发明人：柳增善;宋杰;任洪林;卢士英;李岩松;周玉;张茂林;高世奇;吴南玄 -专利权人：吉林大学
申请日： 2013-01-23 - 公布日： 2013-05-08 - 主分类号： C07K14/21 文献下载
摘要：本发明涉及一种新型纯化PE类重组毒素的方法，属生物蛋白快速纯化检验领域，以切胶纯化的绿脓杆菌外毒素重组蛋白免疫小鼠制备单克隆抗体，筛选可在温和条件下进行抗原识别、洗脱的抗体，建立一种快速高效且不影响绿脓杆菌外毒素类重组毒素活性的亲和层析纯化方法本发明的抗体亲和纯化方法，大大减少了操作步骤，节约了纯化时间。
一种新型纯化 pe 重组毒素方法

[发明专利]一种蛋白质提取纯化方法-CN202210146583.3在审
发明人：李红臣 -专利权人：河北佑仁生物科技有限公司
申请日： 2022-02-17 - 公布日： 2022-05-13 - 主分类号： C07K1/16 文献下载
摘要：本发明公开了一种蛋白质提取纯化方法，包括以下步骤：A、建立提取纯化系统，提取纯化系统包括两个层析机构，两个层析机构通过第一管路串联，两个层析机构的进料端之间连接有第二管路，第一开关阀的进液端连接有第三管路，层析机构包括外壳，外壳内安装有两个层析柱，两个层析柱的进料端和出料端分别安装有二位三通阀；B、根据待纯化蛋白的性质选择对应的填料进行装柱准备，然后通过第一开关阀、第二开关阀和第三开关阀的开闭控制选择两个层析机构的串并联关系；C、使用提取纯化系统对待纯化蛋白进行提取纯化。本发明能够改进现有技术的不足，提高了蛋白质纯化工业化处理的开机率。
一种蛋白质提取纯化方法

[实用新型]一种新型蛋白纯化装置-CN202022063574.7有效
发明人：梁耀极;赵燕燕;陈莹 -专利权人：厦门柏慈生物科技有限公司
申请日： 2020-09-18 - 公布日： 2021-06-08 - 主分类号： C07K1/14 文献下载
摘要：本实用新型公开了一种新型蛋白纯化装置，包括纯化箱，纯化箱的底端螺纹安装有收集箱，纯化箱的顶端中心处开设有通风口，纯化箱的顶端开设有注料口且靠近通风口的一侧，纯化箱内部底端中心处一体连接有安装座，安装座顶端固定安装有电机，电机上安装有旋转加压机构，本实用新型的有益效果是：设有四个分离机构，采用电机带动分离机构旋转，只需从注料口便可依次对四个分离机构进行注料，进行多个蛋白纯化工作，通过加压器对腔柱注入气压，利用分流杆分流给四个分离机构，使重力柱内部加压，促进蛋白分离速度，提高纯化效率，通过过滤网过滤杂质，对蛋白提纯，整体结构合理，减少人力操作，省时省力，操作性较高，实用性好。
一种新型蛋白纯化装置

[实用新型]一种适用于偶联蛋白分离纯化的重力柱装置-CN202222909558.4有效
发明人：秦秀娟;姚洪涛 -专利权人：北京卢米特生物技术有限公司
申请日： 2022-11-02 - 公布日： 2023-02-24 - 主分类号： B01D15/10 文献下载
摘要：本实用新型公开了一种适用于偶联蛋白分离纯化的重力柱装置，具体涉及重力柱技术领域，包括重力柱纯化组件和安装重力柱纯化组件两侧的支撑架，所述重力柱纯化组件包括安装板和五个重力纯化柱，五个重力纯化柱在安装板内从左往右依次分布本实用新型通过电机驱动连接杆带动转轴一起旋转，转轴上的多个搅拌杆可以将储料箱内的偶联蛋白搅拌打散，使偶联蛋白保持活性，避免偶联蛋白长时间存放产生沉淀，然后控制电磁铁与铁块相吸，使第一齿轮与连接杆连接，利用第一齿轮驱动升降组件带动安装板上的重力纯化柱上下移动，将重力纯化柱移到加料管底部进行输料，不需要手动加料，使用起来省时省力。
一种适用于蛋白分离纯化重力装置

[发明专利]纯化的凝结马铃薯蛋白质产品、其提供方法及其用途-CN202080015985.9在审
发明人： M·H·威尔布林克;R·E·J·斯贝尔布林克;N·弗吉亚特兹 -专利权人：艾维贝皇家合作公司
申请日： 2020-02-21 - 公布日： 2021-12-10 - 主分类号： A23J3/14 文献下载
摘要：具体来说，其涉及用于提供具有理想味道的高度纯化的凝结马铃薯蛋白质的方法，该蛋白质有利地用于食物产品的强化。提供用于提供纯化的凝结马铃薯蛋白质产品的方法，所述方法包括：(i)在允许从所述热凝结马铃薯蛋白质组合物中提取配糖生物碱和脂质的条件下，在3至6的pH下，使得热凝结马铃薯蛋白质经受使用醇提取溶剂的一个或多个提取步骤，所述醇提取溶剂包含：(a)比例为90:10至60:40(体积/体积)的乙醇和水；或(b)比例为90:10至40:60(体积/体积)的丙醇和水；然后(ii)用水对提取的热凝结马铃薯蛋白质进行洗涤以获得纯化的凝结马铃薯蛋白质产品，然后(iii)对纯化的凝结马铃薯蛋白质产品进行干燥。
纯化凝结马铃薯蛋白质产品提供方法及其用途

[发明专利]纤维素结合域在棒状杆菌分泌表达系统中的应用-CN201310045414.1无效
发明人：赵志敬;蒋欢;胡广 -专利权人：北大工学院绍兴技术研究院
申请日： 2013-01-28 - 公布日： 2014-08-06 - 主分类号： C12N15/77 文献下载
摘要：本发明属于蛋白表达纯化技术领域，具体是利用里氏木霉的纤维素结合域作为亲和标签，在棒状杆菌表达系统中进行分泌表达和纯化重组蛋白的方法。所述方法包括以下步骤：1)优化并合成编码里氏木霉糖苷水解酶I的纤维素结合域(CBD)的密码子序列；2)将步骤1合成的序列作为蛋白标签序列克隆至棒状杆菌分泌表达载体；3)将目的蛋白序列插入到步骤2获得的标签载体；4)将步骤3获得的重组载体转化至棒状杆菌中进行蛋白的分泌表达；5)以CBD为亲和标签，利用纤维素柱纯化该重组菌分泌的重组蛋白。该方法不需菌体破碎，直接利用低成本的纤维素柱填料对诱导后的培养基进行蛋白纯化，从而降低蛋白的生产成本。
纤维素结合杆菌分泌表达系统中的应用

[发明专利]高载量耐碱蛋白A磁珠及其使用方法-CN201880005785.8在审
发明人：望超;贺瑞娜;韩卫娟;钱红;白涛 -专利权人：南京金斯瑞生物科技有限公司
申请日： 2018-01-04 - 公布日： 2019-08-27 - 主分类号： B01J20/32 文献下载
摘要：提供了一种高载量耐碱蛋白A磁珠，其在pH 2‑14环境下均可保持其化学稳定性，并且结合免疫球蛋白IgG的能力大于50mg/mL。还提供了一种纯化和/或检测免疫球蛋白的方法，包括让含有免疫球蛋白的样品与所述高载量耐碱蛋白A磁珠接触的步骤。前述所提供的耐碱蛋白A磁珠可实现免疫球蛋白的快速纯化，节省约80％的处理时间，总体纯化成本可下降50％。除此之外，该耐碱蛋白A磁珠具备高耐碱特性，可以使用原位清洁的碱性方法对使用后的磁珠进行再生。磁珠本身的快磁响应和较好的分散性，可快速实现磁珠富集、清洗和洗脱，方便实现自动化高通量和大样品量纯化。
磁珠耐碱蛋白A 免疫球蛋白结合免疫球蛋白化学稳定性磁珠富集原位清洁磁响应大样品分散性高通量洗脱清洗自动化再生检测

[发明专利]家族3纤维素结合域在真核生物中作为重组蛋白质表达和纯化的亲和标签的应用-CN201110035017.7无效
发明人：洪泂;宛雯;高晓连 -专利权人：中国科学技术大学
申请日： 2011-01-19 - 公布日： 2011-09-07 - 主分类号： C12N15/31 文献下载
摘要：本发明属于重组蛋白表达纯化领域。本发明提供利用家族3纤维素结合域CBM3作为重组蛋白质表达的亲和标签在真核生物中表达和纯化重组蛋白的方法，所述方法包括下列步骤：(1)构建所述真核生物密码子优化的编码CBM3的核苷酸序列；(2)构建步骤(1)中的所述真核生物密码子优化的编码CBM3的核苷酸序列与编码目标蛋白的核苷酸序列的重组构建体；(3)将步骤(2)中构建的所述重组构建体克隆到适于在所述真核生物中表达的表达载体中；(4)将步骤(3)中获得的重组表达载体在所述真核生物中进行表达；和(5)以CBM3作为亲和标签，利用纤维素纯化所表达的重组蛋白。本发明还提供利用CBM3作为重组蛋白质表达的亲和标签结合内蛋白子在真核生物中表达和纯化重组蛋白的方法，所述方法包括构建目标蛋白-内蛋白子-CBM3重组构建体，从而将融合表达的重组蛋白无外额外氨基酸的切出及纯化
家族纤维素结合生物作为重组蛋白质表达纯化亲和标签应用

[发明专利]一种纯化固定化重组α-淀粉酶的方法-CN201810896417.9在审
发明人：周志江;赵芳坤;杜仁鹏;韩烨;宋巧智;曹硕;肖华志 -专利权人：天津大学
申请日： 2018-08-08 - 公布日： 2018-12-18 - 主分类号： C12N9/28 文献下载
摘要：本发明公开了一种纯化固定化重组α‑淀粉酶的方法，构建α‑淀粉酶‑AcmA融合蛋白重组表达载体，α‑淀粉酶与AcmA锚定区之间添加柔性蛋白Linker，诱导表达后利用GEM(革兰氏阳性基质)进行纯化固定化该方法能够将重组α‑淀粉酶的纯化与固定化结合，减少纯化固定化过程中的步骤，通过该方法固定化的酶，具有很好的酶活和蛋白回收率，同时在长时间保存中能够维持酶活。这种方法能够简化纯化和固定化操作，降低酶活损失。
淀粉酶固定化酶活重组表达载体蛋白回收率革兰氏阳性固定化过程融合蛋白时间保存诱导表达锚定区构建基质蛋白